SARS-CoVS基因重组质粒的构建与瞬时表达

根据GenBank中登录的SARS-COV（BJ01株）基因序列设计引物，采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法从SARS病毒中扩增得到约3768bp的片段，将其克隆到真核表达质粒pVAX1，鉴定正确后．命名为pVAX1／S。体外转染Hela细胞．间接免疫荧光鉴定S蛋白的表达。构建的重组质粒经酶切及测序鉴定．开放阅读框正确；间接免疫荧光方法鉴定该重组质粒能在Hela细胞中表达。     

乌鲁木齐海关动植物电子标本库的设计与开发

为便于海关动植物出入境检验检疫快速查询、鉴别,并为决策提供必要的数据支撑,为判定和处置提供针对性提示和指导,本文基于动植物海关检验检疫的业务需求,通过对大量实物标本资源数字化进行整理,设计开发了乌鲁木齐海关动植物电子标本库,指导相关人员通过标本、资料比对等方式开展辅助鉴定,提升了把关效能,降低了疫情传播风险,并对提高从业人员的专业素质有着积极意义。     

牛传染性鼻气管炎病毒血清抗体检测试验及结果分析

采用SYNBIOTICS公司酶联免疫吸附试验(ELISA)检测试剂盒对来自新疆15个不同地区(包括4个养牛场)共635份牛血清进行了牛传染性鼻气管炎病毒血清抗体检测,共检出阳性血清329份,最高感染率达90%,最低感染率为5%,平均感染率为51.8%,结果显示该病已在全疆普遍存在,感染没有明确的地域分布规律。对其中的106份血清用Institute Pourquier公司ELISA试剂盒重新检测,发现两试剂盒的符合率为90.6%,Institute Pourquier公司ELISA检测试剂盒敏感性稍高。从该106份血清中再次随机抽取其中的35份用病毒中和实验(VN)检测方法进行了检测,检测结果与SYNBIOTICS公司ELISA检测试剂盒相比较,同为阳性样品24份,同为阴性样品7份,两者符合率88.6%;与Institute Pourquier公司ELISA检测试剂盒相比较,同为阳性样品24份,同为阴性样品6份,两者符合率85.7%。试验结果表明,与VN相比,ELISA检测试剂盒具有操作简便,敏感性高等优点。     

弓形虫TgERP基因的原核表达及间接ELISA方法的建立

为原核表达弓形虫的TgERP基因，参照GenBank中弓形虫GTl株的TgERP基因序列设计引物，通过PCR扩增分离的一株猫源弓形虫（TC株）的TgERP基因，将其克隆至原核表达载体pET-28a中，通过IPTG诱导表达蛋白，应用带His标签的重力柱纯化蛋白，采用BCA方法测定蛋白浓度，利用重组蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体，并对重组蛋白进行SDS-PAGE和Western blotting分析。结果成功表达了TgERP蛋白，且蛋白以上清形式表达，相对分子质量约16 ku。将纯化的重组蛋白pET-28-TgERP作为诊断抗原，初步建立了间接ELISA方法；利用间接ELISA、改良凝集试验（MAT）和间接血凝试验（IHA）3种方法分别检测472份羊、犬、猫血清样品，发现阳性率分别为1.0%、3.8%、3.4%，验证了建立的间接ELISA方法可区分动物感染弓形虫的途径。本研究为弓形虫病快速诊断方法的建立和疫苗的研发奠定了基础。