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【目的】构建多拷贝整合表达禽流感病毒样颗粒的重组巴斯德毕赤酵母,为H5N1亚型禽流感基因工程疫苗提供基础。【方法】以巴斯德毕赤酵母GS115株18S rRNA基因(rDNA)部分序列,插入pPIC9K载体上XbaⅠ和Bsp1407Ⅰ位点间,构建多拷贝整合表达质粒p8K。再以禽流感病毒H5N1毒株基因组RNA为模板,RT-PCR扩增HA、M和NA基因,分别插入多拷贝载体p8K,构建表达质粒 p8K-HA/M/NA。表达质粒分别扩增后线性化,按比例混合,电转化GS115感受态细胞。增菌后,经遗传霉素G418抗性平板筛选、PCR鉴定携带HA、M和NA基因序列的多拷贝整合菌株。阳性菌株增菌、诱导表达、高压均质破碎后,Western-blot检测表达产物。【结果】PCR鉴定阳性的重组菌株,其细胞裂解蛋白,免疫印迹试验可检测到与HA、M1和NA分子量一致的蛋白条带;电子显微镜可观察到大小约为80~120 nm 的病毒样颗粒,免疫鸡能产生抗禽流感病毒中和抗体。【结论】重组毕赤酵母能够多拷贝整合、表达、组装禽流感病毒样颗粒。 相似文献
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新优多花花灌木巴西野牡丹 总被引:1,自引:0,他引:1
介绍了巴西野牡丹的品种特性、繁殖技术、栽培管理、园林应用,旨在为厦门及周边城市绿化应用提供参考。 相似文献
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目的 探讨胸部高分辨率CT(HRCT)在新生儿胸部疾病诊断中的意义.方法 收集69例行胸部HRCT检查的新生儿临床资料,分析新生儿胸部疾病的常见HRCT征象,并与DR平片进行对比.结果 HRCT对先天性胸肺发育异常疾病的诊断符合率明显高于DR平片(77.8% vs 38.9%,P<0.05);HRCT在发现新生儿重症肺炎特殊征象上明显优于胸部DR平片(71.4% vs 4.8%,P<0.01).结论 胸部HRCT对于肺部发育不良、纵膈病变、新生儿重症肺炎等具有较大的诊断意义. 相似文献
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介绍野牡丹属(Melastoma)植物在福建的水平分布和垂直分布情况,并从城市环境建设作用、植物多样性、生态作用等方面分析该属植物在城市生态系统中所发挥的作用,以期为相关研究和厦门的城市生态系统建设提供参考。 相似文献
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为了解H9N2亚型禽流感病毒在新疆蛋鸡养殖场的致病性及遗传进化特点,对一株分离自蛋鸡的禽流感病毒A/Chicken/Xinjiang/01/2010(H9N2)进行了致病性及遗传进化分析。结果显示,分离株的MDT为92h,ICPI指数为1.125,IVPI指数为0.14,HA裂解位点处氨基酸序列为335 RSSRGLF342,这些特征均证实该分离株为低致病性AIV。HA基因遗传进化分析表明,该分离株在系统进化树上与A/swine/XJWLMQ/7/09(H9N2)及3株野生鸟类新疆分离株的亲缘关系最为接近,该分离株HA基因属于欧亚谱系的A/chicken/Beijing/94(H9N2)和A/chicken/Hongkong/G9/97(H9N2)的一个分支。 相似文献
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根据发表的鸡传染性支气管炎病毒N基因序列设计一对引物,经RT—PCR扩增得到1230bpDNA片段,将其克隆到表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET—N,经测序鉴定正确后,将其转化感受态细胞E.coli BL21(DE3),并进行IPTG诱导表达,结果表明,重组菌可表达分子质量为50kD的融合蛋白。Western-blotting结果显示,该重组蛋白能与IBV阳性血清发生特异性的免疫印迹反应,表明该重组蛋白具有良好的免疫原性。 相似文献
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为了解新疆地区哺乳动物流感病毒的感染流行情况,本研究于2009年~2011年对新疆6个地区的5种哺乳动物进行流感病毒部分亚型的血清学监测,采集猪血清样品1 519份、马血清样品1 095份、驴血清样品802份、狗血清样品130份和猫血清样品40份.用HI方法进行流感病毒血清学监测.结果表明,猪血清中流感病毒H1亚型抗体阳性率为0~31.5%,H3抗体阳性率为0.75%~5.32%,H5亚型抗体阳性率为0~2.7%,H9亚型抗体阳性率为0~10.19%;马血清和驴血清样品的流感病毒H1、H3、H5、H7和H9亚型抗体均为阴性;狗血清流感病毒H9抗体阳性率为1.75%;猫血清样品流感病毒H1抗体阳性率为2.5%. 相似文献
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培训需求的深入挖掘与准确把握是培训取得成功的基础与关键.本文将质量机能展开(QFD)应用到培训需求分析中,并充分考虑到培训的特点,提出了一种基于QFD的培训需求定量分析模型,对培训需求分析提供实践指导及培训方案的定量评审. 相似文献
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