鲫肠道上皮细胞原代培养方法的研究

探讨了健康鲫(Carassius auratus)幼鱼肠道上皮细胞的原代培养方法。结果显示,用含有抗生素、胶原蛋白酶Ⅰ、EDTA和胶原蛋白酶Ⅳ组成的D-Hanks液消化无菌分离的鲫肠道可以获得大量细胞团及绒毛隐窝;用含有抗生素、胎牛血清(FBS)、表皮生长因子(EGF)、胰岛素的DMEM培养液进行培养,并根据肠道上皮细胞与成纤维细胞贴壁时间的差异进一步纯化,连续培养12d后可以得到纯化的肠道上皮细胞。     

丁酸梭菌对肠道上皮细胞黏附及对鳗弧菌抑制的研究

本试验以鱼肠道上皮细胞为模型,以肠道的致病鳗弧菌为对照,研究了丁酸梭菌对鱼肠道上皮细胞的黏附作用及黏附对细胞的损伤和成活率的影响。结果表明∶丁酸梭菌对鱼的肠道上皮的黏附率为7.39±1.85,低于鳗弧菌的黏附率(P<0.05);对细胞的损伤率为1.02±0.35,显著低于鳗弧菌对细胞的损伤率(P<0.05);黏附后丁酸梭菌组对细胞的成活率的影响与正常对照组比较,差异不显著;当酪酸菌、鳗弧菌与肠道上皮细胞共同培养时,使鳗弧菌的黏附率下降7.03%(P<0.05)。因此,该株丁酸梭菌可以安全地黏附鱼肠道上皮细胞,并能有效抑制鳗弧菌的黏附。     

牛蛙腐皮病病原菌分离鉴定及药敏试验

[目的]明确浙江嘉善某养殖场引起牛蛙腐皮病的致病菌,并探究益生菌与牛蛙腐皮病病原菌间的相互作用,为今后利用益生菌防控牛蛙腐皮病的发生提供技术支持.[方法]通过常规的细菌分离纯化、人工回归感染试验、生理生化特性鉴定及16S rDNA序列扩增,确定引起牛蛙腐皮病的致病菌;根据药敏试验筛选抗菌药物,并从生物防控的角度探究枯草芽孢杆菌等益生菌与致病菌间的相互作用.[结果]从患病牛蛙的内脏及体表溃烂处共分离获得9株疑似致病菌株,经人工回归感染试验确定菌株NWt-2为引起牛蛙腐皮病的致病菌;综合其形态学特征、生理生化特性及分子生物学鉴定结果,可确定菌株NWt-2为布韦不动杆菌(Acinetobacter bouvetii).菌株NWt-2对丁胺卡那、庆大霉素、哌拉西林、头孢氨苄和硫酸阿米卡星等5种抗菌药物高度敏感,对青霉素、复方新诺明、诺氟沙星、氟苯尼考、复方磺胺嘧啶、盐酸林可霉素和盐酸大观林可霉素等7种抗菌药物不敏感(耐药).浓度为105 CFU/mL的枯草芽孢杆菌和紫色杆菌对菌株NWt-2有一定的抑制作用,抑菌圈直径分别为1.45±0.46和0.97±0.38 mm.[结论]布韦不动杆菌是引起浙江嘉善养殖牛蛙发生腐皮病的致病菌,可选用丁胺卡那、庆大霉素、哌拉西林、头孢氨苄和硫酸阿米卡星等抗菌药物进行防治.鉴于枯草芽孢杆菌对布韦不动杆菌具有一定的抑制效果,在当前病原菌对抗菌药物普遍存在耐药性的情况下,选择枯草芽孢杆菌等益生菌进行生物防控具有可行性.     

鱼油加工副产品对异育银鲫饲养试验研究

本试验以一种鱼油加工副产品为试验对象,以异育银鲫为试验动物,研究了该鱼油加工副产品的添加对异育银鲫的生长情况。试验将105条健康异育银鲫随机分为3组,试验组分别添加3%和6%鱼油加工副产品,基础日粮为对照组。试验周期为30d,试验结果显示,3%和6%试验组平均增重率为33.04%和44.17%,显著高于对照组(P0.05);饵料系数两个试验组分别为1.66和1.43,显著低于对照组(P0.05)。因此,该鱼油加工副产品对异育银鲫的生长有明显的促进作用,可以作为一种新的饲料资源加以开发利用。     

好氧反硝化细菌YX-6 特性及鉴定分析

从对虾池塘筛选得到 1 株高效的好氧反硝化细菌,命名为YX-6。对该菌生长及反硝化性能间的关系进行研究; 同时研究了不同温度、pH、盐度及碳源对该菌生长及反硝化性能的影响。结果表明,该菌反硝化作用主要发生在对数生长期,可将亚硝酸盐氮由 10 mg/L降至 0;该菌最适生长及反硝化温度为 30 ℃ ;pH值范围为 7 ～ 9 时最适于该菌生长及反硝化性能的发挥。该菌最适盐度范围为 0 ～ 15;丁二酸钠、乙酸钠为该菌生长及反硝化的最适碳源。通过对YX-6 菌 株生理生化及 16S rRNA分子鉴定,初步鉴定为凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）。对该菌株亚硝酸还原酶基因进行序列分析,结果表明,该菌含有亚硝酸还原酶nirS基因。

     

鱼类肠道正常菌群研究进展

鱼类肠道正常菌群是肠道的正常组成部分;是肠道微生物与宿主以及所处的水生环境形成的相互依赖、相互制约的微生态系;对营养物质的消化吸收、免疫反应以及器官的发育等方面具有其他因素不可替代的作用,并且影响到鱼类的生长、发育、生理和病理。笔者拟就鱼类肠道菌群的形成、结     

丁酸梭菌C2菌株对鱼类肠道致病菌体外抑制作用研究

以枯草芽孢杆菌、硫酸链霉素为对照组,以丁酸梭菌C2菌株为试验组,运用滤纸片琼脂平板扩散法,研究了丁酸梭菌C2菌株对鱼类肠道致病菌迟缓爱德华氏菌、鳗弧菌、嗜水气单胞菌的抑制作用。研究结果表明,丁酸梭菌C2菌株可以有效抑制这3种病原菌,并且抑制效果要明显优于硫酸链霉素。     

1株林蛙烂嘴病病原菌的分离鉴定及防治药物筛选

【摘要】［目的］对林蛙致病菌进行分离鉴定,并对其药物敏感性及与益生菌间的作用进行研究。［方法］从患病的林蛙中分离到1株致病菌LWS1,通过APIID32GN系统（细菌自动鉴定系统）鉴定为解藻朊酸弧菌（Vibroalginolyticus）,然后进行药敏试验和拮抗试验。［结果］药敏试验表明,菌株对青霉素G、苯唑青霉素、氨苄青霉素、新生霉素、万古霉素等不敏感,对头孢噻吩、氧氟沙星、卡那霉素等中度敏感,对氯霉素、舒普深、先锋必、痢特灵等高度敏感。拮抗试验表明,益生菌枯草芽孢杆菌、丁酸梭菌对该菌株具有抑制作用。［结论］可以考虑筛选枯草芽孢杆菌等益生菌来预防林蛙烂口病的发生。     

不同加工工艺对肉牛进食量及能量利用率的影响

随着畜牧业迅速发展，生产结构逐步调整，肉牛规模化饲养和产业化进展很快。充分利用我国现有资源发展以肉牛为主的草食家畜将是解决我国人均粮食不多，减少与猪鸡争精料的有效措施。在很长时间内，肉牛的饲养是以秸秆为主，辅以精料育肥。因此如何充分利用农作物秸秆，提高利用率是目前反刍动物营养研究的焦点。     

丁酸梭菌C2菌株对鮸鱼肠道菌群影响的研究

研究了丁酸梭菌C2菌株对鮸鱼肠道菌群数量和后肠好氧菌结构的影响。结果表明,丁酸梭菌C2可以促进鮸鱼中肠、后肠双歧杆菌数量的增长,抑制大肠杆菌的生长,对厌氧菌的总数影响不明显,降低了后肠好氧菌的总数;同时,改变了后肠好氧菌的结构,巩固了假单胞菌优势菌群的地位,降低了不动杆菌属、肠产气杆菌属和短杆菌属细菌的比例。