高效液相色谱法测定婴儿配方奶粉中乳铁蛋白含量.

本研究建立了一种用高效液相色谱测定婴儿配方奶粉中乳铁蛋白的方法。色谱条件:色谱柱为Hi Trap Heparin肝素琼脂糖亲和柱(0.7×2.5cm,1m L),流动相A为50mmol/L的Na2HPO4溶液(p H7.00),流动相B为50mmol/L的Na2HPO4+1.0mol/L的Na Cl溶液(p H7.00),检测波长为230nm。结果表明:乳铁蛋白的检出限为3.0mg/100g,回收率在86%~99%之间,相对标准偏差(RSD)为3.4%。用此方法检测婴儿配方奶粉中乳铁蛋白,操作简单,结果准确可靠,精密度高,重现性好。     

乳铁蛋白对牛精液冷冻效果的影响

[目的]探索乳铁蛋白在牛精液冷冻中的应用效果,为乳铁蛋白在家畜精液保存中的研究与应用提供初步的参考数据。[方法]在常用稀释液(果糖-柠檬酸钠-卵黄-甘油液)的基础上,分别添加不同浓度(250、500、1000mg/L)的乳铁蛋白,观察乳铁蛋白对牛精液冷冻效果的影响。[结果]3种浓度的乳铁蛋白对精子的冻后活力、复苏率、VAP、VSL、VCL、畸形率、顶体完整率及低渗肿胀率均没有显著影响。[结论]在该试验条件下,乳铁蛋白未能显著提高牛精液的冻后质量。     

乳铁蛋白的营养生理作用及其作为饲料添加剂的应用

对乳铁蛋白的乳铁蛋白活性多太的结构及其动物体内的分布进行了分析，重点阐述了它们促进肠道铁离子的吸收，调节机体免疫机能，抑菌和抗菌活性，抗病毒，抗氧化，刺激肠道有益菌群生长，保护肠道等多种生理功能，总结了乳铁蛋白的测定方法，讨论了利用天然初乳制备乳铁蛋白和乳铁蛋白活性肽的的工艺和利用基因工程生产乳铁蛋白和乳铁蛋白活性肽。对乳铁蛋白和乳铁蛋白活性肽在饲料加工过程及动物肠道中的稳定性进行了分析，并初步讨论了乳铁蛋白和乳铁蛋白活性肽代替饲用抗生素作为饲料添加剂的应用前景。     

乳铁蛋白及其生理机能的研究进展

乳铁蛋白作为一种天然的具有免疫功能的糖蛋白,是转铁蛋白家族的一员。它存在于哺乳动物的各种外分泌物中,乳中的含量较高,因其广泛的生理功能,近年来越来越多地受到人们的关注。概括介绍乳铁蛋白的结构及其重要的生理功能以及乳铁蛋白的制备方法,并展望乳铁蛋白作为一种添加剂在畜牧业上的应用前景。     

牛乳铁蛋白基因N-lobe的cDNA克隆及毕赤酵母表达载体的构建

以牛乳腺组织总RAN为模板,经RT-PCR得到牛乳铁蛋白基因的N-lobe片段并将其克隆到pGM-T克隆载体上,最后将其连入表达载体pPICZαA中,构建牛乳铁蛋白基因N-lobe的酵母表达载体。结果表明：克隆片段大小为1028bp,与Gen Bank中登录的序列的相应部位相比,所获牛乳铁蛋白N-lobe cDNA序列的同源性为99.7%;重组表达质粒经酶切和PCR鉴定构建正确,为酵母表达乳铁蛋白基因N-lobe奠定了基础。     

常乳中牛乳铁蛋白的纯化及抗菌活性研究

[目的]研究从常乳中纯化牛乳铁蛋白的工艺条件,探讨牛乳铁蛋白的抗菌活性。[方法]选用SP sepharose HP作为强阳离子交换介质,利用AKTApurifier10高效液相色谱仪纯化牛乳铁蛋白。[结果]结果表明,牛乳铁蛋白在pH值7.5、浓度0.85 mol/L的NaCl洗脱液中可以被洗脱下来,且产品纯度为90%以上。牛乳铁蛋白浓度为5 mg/ml时对大肠杆菌的生长具有显著的抑制作用。[结论]该研究建立了从常乳中纯化牛乳铁蛋白的方法,为大规模生产具有活性的牛乳铁蛋白奠定了基础。     

重组人乳铁蛋白对原代肝、肾细胞的毒性研究

[目的]通过模拟肝、肾毒性的体外细胞试验,研究重组人乳铁蛋白是否对小鼠原代肝肾细胞具有毒性作用,为其进一步的安全性评价提供依据。[方法]采用模拟体外消化试验所得的重组人乳铁蛋白消化产物及重组人乳铁蛋白为受试物,牛乳铁蛋白为对照,以小鼠原代肝、肾细胞为平台,用MTT法检测受试物对细胞活性的半数抑制浓度（IC50）,研究细胞毒性剂量-反应关系。[结果]在设定的试验条件下,未发现重组人乳铁蛋白对肝肾细胞存在靶毒性,结果能与已进行的亚慢性毒性试验相互印证。[结论]为对重组人乳铁蛋白的进一步安全性评价及其他转基因食品的安全性评价方法提供了参考。     

The Effect of Cysteine-Rich Secretory Protein-3 and Lactoferrin on Endometrial Cytokine mRNA Expression After Breeding in the Horse

The equine uterus undergoes a transient innate immune response after breeding, also known as mating-induced endometritis. The deposition of spermatozoa triggers the expression of pro-inflammatory cytokines, which results in the migration of polymorphonuclear neutrophils (PMNs) into the endometrium and the uterine lumen. Select seminal plasma proteins, specifically cysteine-rich secretory protein 3 (CRISP-3) and lactoferrin, have been shown to affect the activity of the PMNs, either by suppressing (CRISP-3) or promoting (lactoferrin) the phagocytosis of spermatozoa based on their viability in vitro. Conjointly, many components of inseminate, including seminal plasma, bacteria, and spermatozoa itself, have shown to have an effect on the expression of endometrial cytokines after breeding. The objective of this study was to determine if select proteins affect the mRNA expression of endometrial cytokines after insemination. Six mares were bred during four consecutive estrous cycles with treatments in randomized order of: 1mg/mL CRISP-3, 150 ug/mL lactoferrin, seminal plasma, or Lactated Ringer’s Solution (LRS) to a total volume of 10 mL combined with 1×10⁹ progressively motile spermatozoa pooled from two stallions. Six hours after treatment, an endometrial biopsy was obtained for qPCR analysis. No treatment effects were found for the mRNA expression of IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, TNFα, and IFNγ, while lactoferrin significantly suppressed the mRNA expression of IL-1RN when compared to LRS. In conclusion, the seminal plasma proteins CRISP-3 and lactoferrin have minimal effect on the expression of select endometrial cytokines at 6 hours post breeding.     

乳铁蛋白生物学特性及其在断奶仔猪生产中的应用研究

乳铁蛋白是一种存在于哺乳动物外分泌液中的非血红素铁结合性糖蛋白,它具有多种生物活性功能.本文主要就乳铁蛋白的生物学功能及其在仔猪中生产中的应用前景做一综述.     

乳铁蛋白牛初乳颗粒增强免疫调节作用的研究

评价乳铁蛋白牛初乳颗粒增强免疫力作用,为该产品提供功能学资料。采用SPF级雌性小鼠,设0.200,0.04,1.200 g/kg(分别相当于人体推荐量的5,10,30倍)3个剂量组,每日1次经口给予小鼠相应浓度的受试样品,连续给样1个月。检测对小鼠体重、胸腺、脾脏器官、ConA诱导的脾淋巴细胞转化、DNFB诱导的DTH、溶血空斑数、血清半数溶血值(HC50)、碳廓清能力、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞、NK细胞活性的影响。结果表明:细胞免疫功能、体液免疫功能、NK细胞活性均与对照组有显著差异,认为该乳铁蛋白牛初乳颗粒具有增强免疫力功能效果(P<0.05)。