八仙花萼片有色原生质体游离及应用

为建立八仙花（Hydrangea macrophylla）有色原生质体游离体系,以八仙花萼片为试验材料,分别对材料的预处理方式、酶液组分、酶解时间、纯化离心力等影响酶解的关键因素进行研究。结果表明, 预处理方式选择分离花萼片上下表皮法,纤维素酶和离析酶水平分别为4%和0.4%（质量体积分数）,甘露醇0.6 mol·L^-1,酶解液加热冷却后加入 0.1%（质量体积分数）BSA和10 mmol·L^-1 CaCl₂,酶解2 h,低温离心机4 ℃、1 426 r·min^-1离心5 min,为最优的八仙花萼片原生质体游离条件。利用所建的原生质体游离体系对4个不同品种的八仙花萼片进行有色原生质体游离,200× 镜下单视野内可获得13~35个有色的原生质体;对有色原生质体进行液泡的H⁺流测定,发现蓝色液泡较粉色液泡H⁺流的外排趋势明显,说明同一八仙花品种蓝色液泡的pH高于粉色液泡。     

胞外ATP、H2O2、Ca2+与NO调控木榄根系离子平衡机理研究

运用非损伤微测技术(NMT),研究了短期盐胁迫下胞外ATP(eATP)、H2 O2 、Ca2 + 与NO 对非泌盐红树木榄根 系K+/Na+ 平衡的调控作用。NaCl(100 mmol/L,24 h)与等渗甘露醇处理的实验表明,木榄根尖对盐胁迫的响应具 有高度的离子特异性。盐胁迫增强了木榄根尖的Na+ 外流,但Na+ 外流被Na+ /H+ 逆向转运蛋白抑制剂Amiloride 和质膜H+ -ATPase 抑制剂Vanadate 抑制,表明Na+ 外流源于根尖表皮细胞质膜Na+ /H+ 逆向转运系统驱动的Na+ 外排。短期盐胁迫处理能诱导木榄根尖K+ 外流,但被氯化四乙胺(TEA,外向K+ 通道抑制剂)明显抑制,证明K+ 外流是由激活的去极化外向型离子通道KORCs 介导。胞外ATP(300 mol/L)、H2 O2 (10 mmol/L)、Ca2 + (10 mmol/ L)与SNP(NO 供体,100 mol/L)均能增加短期盐胁迫下的Na+ 外流,同时抑制K+ 外流。其中,促进Na+ 外流效果 较强的是H2 O2 和Ca2 + ,而Ca2 + 和NO 抑制K+ 外流的效果突出。这些实验结果表明,胞外ATP、H2 O2 、Ca2 + 与NO 这4 种盐胁迫信使是通过上调木榄根系细胞质膜Na+ /H+ 逆向转运体系(Na+ /H+ 逆向转运体和H+ 泵)活性,在促 进Na+ 和H+ 逆向跨膜转运的同时,抑制去极化激活的K+ 离子通道来减少盐诱导的K+ 外流。      

绵羊催产素在渗透泵中稳定性的研究

试验旨在评价39.1℃恒温下绵羊催产素在渗透泵（ALZET^®）中的稳定性。试验分为3个组,分别为渗透泵组、微量离心管组和对照组。除对照组始终冻存于-80℃以外,另外两组置于39.1℃培养箱中进行孵育,分不同时间点采集样品。所有样品经超高效液相色谱串联四级杆/飞行时间质谱（ultra-performance liquid chromatography tandem quadrupole/flight time mass spectrometry,UPLC-Q-TOF MS）方法获得氧化产物提取离子流色谱图,通过比较各产物的峰面积,分析催产素在39.1℃缓释泵中的氧化过程。结果表明,催产素在39.1℃缓释泵及微量离心管中均表现出氧化程度随时间逐渐增加的趋势,两试验组之间差异不显著（P＞0.05）。渗透泵组和微量离心管组不同时间点采集样品中催产素原型占对照组原型的百分比分别为83.6%~117.8%和83.2%~116.2%,说明在渗透泵植入绵羊体内试验中需要考虑因催产素氧化引起的含量变化对试验结果的影响。     

干旱胁迫下旱稻和水稻对K＋和Ca2＋的动态吸收研究

利用动态离子流检测技术,通过比较干旱作用下旱稻与水稻对K＋和Ca＋离子的动态吸收规律,探讨无机离子对旱稻和水稻的抵御干旱胁迫的作用机理,有助于筛选抗旱水稻材料。结果显示,PEG处理条件下巴西旱稻对F和ca2＋的吸收能力强于日本晴水稻,可能是由于巴西旱稻通过吸收无机离子作为渗透调节剂抵御干旱胁迫,因此具有较强的抗干旱能力。同时研究也说明,利用动态离子流检测技术比较不同材料的无机离子吸收能力,可以筛抗抗旱水稻新品种．     

急性心肌缺血大鼠左心室流出道自发性慢反应电位去极离子流变化分析

目的探讨急性心肌缺血大鼠左室流出道自发性慢反应电位去极离子流的变化。方法常规玻璃微电极细胞内方法观测急性心肌缺血大鼠的离体心脏最大舒张电位(MDP)、0相除极幅度(APA)、0相最大除极速度(Vmax)、4相自动除极速度(VDD)、复极50%(APD50)和90%(APD90)的时间以及自发放电频率(RPF)。结果与给药前相比①1.2mmol.L-1河豚毒(TTX)使APA和Vmax有所减小(P<0.05),VDD和RPF明显减慢(P<0.01);②1.0μmol.L-1维拉帕米(VER)可使该慢电位的APA、Vmax、VDD明显减小,RPF减慢(P<0.01);APD、APD90延长(P<0.05);③2mmol.L-1 4-氨基吡啶(4-AP)使该慢电位的MDP的绝对值、APA、Vmax减小,VDD和RPF加快(P<0.01);④1.5mmol.L-1 CsCl作用6min时,VDD和RPF明显降低(P<0.05),10min时恢复。结论①左心室流出道的自发慢电位0相主要去极离子流除Ca2+内流外,还有少量Na+内流。②4相去极离子流中,除Ca2+、Na+的内流和Ik衰减外,If电流可能也起部分作用。     

水稻白化突变体根部离子动态吸收规律的研究

利用植物微观动态离子流检测技术研究水稻正常幼苗和白化突变体根部对K＋、Ca2＋、NH4＋、H＋离子的吸收规律,探讨叶色突变对离子吸收的直接影响。结果表明,水稻白化突变体光合作用丧失,导致质子梯度降低（H＋外排减弱）,次级主动运输受阻,根系吸收离子（K＋、Ca2＋、NH4＋）的能力降低、造成细胞代谢功能紊乱,生长发育停滞。     

激发子诱导下合作杨细胞钙、氢离子流的振荡

利用非损伤微测技术研究合作杨细胞受到水杨酸甲酯和茉莉酸甲酯2种激发子诱导后，细胞H+、Ca2+流的变化。结果表明，2种激发子均诱导合作杨细胞H+、Ca2+流变化、并呈现震荡的特征，在细胞整体水平上2种激发子诱导H+净外流，Ca2+净内流；2种激发子诱导的H+、Ca2+流的振荡周期基本一致。     

Study on the Stability of Sheep Oxytocin in the Osmotic Pump

The experiment was aimed to evaluate the stability of oxytocin in osmotic pump (ALZET^®) at 39.1℃. The experiment was divided into 3 groups, i.e. the osmotic pump group, microcentrifugal tube group and control group. The control group remained frozen at -80℃, the other two groups were incubated in 39.1℃ incubator, and the samples were collected at different time points. All samples were analyzed by ultra-performance liquid chromatography tandem quadrupole/flight time mass spectrometry (UPLC-Q-TOF MS) method. The oxidation process of oxytocin in osmotic pump at 39.1℃ was analyzed by comparing the peak area of main oxidized products extracted ion chromatogram. The results showed that the degree of oxidation increased with time in osmotic pump and microcentrifugal tube at 39.1℃, and there was no significant difference between the two groups (P >0.05). The percentage of oxytocin prototype of samples which collected at different time points of osmotic pump group and microcentrifugal tube group versus control group were 83.6% to 117.8% and 83.2% to 116.2%, respectively, suggested that the trials involved in the osmotic pump implantation of oxytocin in sheep need to consider the effect of content changes caused by oxytocin oxidation on the test results.     

高盐胁迫下小麦幼苗离子吸收动态及耐盐性筛选

耐盐能力评价是小麦引种、筛选和育种的研究基础。为利用离子流检测技术快速筛选耐盐小麦品种提供依据,本文以普通小麦耐盐品种‘德抗961’和‘薛早’、中度耐盐材料3D232、盐敏感品种‘辽春10号’和‘京411'为试验材料,利用动态离子流检测技术对250 mmol·L~(-1) NaCl胁迫下小麦苗期根部对K~+、Na~+、C~-的吸收情况进行检测,并对小麦生长性状及离子浓度变化进行测定,以确立离子吸收与小麦耐盐性的关系。研究结果表明:1)与无盐胁迫(CK)相比,250 mmol·L~(-1) NaCl胁迫24 h后,盐敏感小麦品种‘辽春10’和‘京411’的K~+由内流转变为外流,中等耐盐材料3D232表现出K~+外流速度减少,耐盐品种‘德抗961’和‘薛早’则表现出维持K~+的内流或K~+外流变为内流;Na~+均表现为胁迫后外排速度增大,速度值区间由13.86～46.88 pmol·cm~(-2)·s~(-1)变为61～150 pmol·cm~(-2)·s~(-1):相较Na~+,Cl~-外排速度升高幅度较大,其中‘辽春10号’外排量变化最大,外排速度是胁迫前的10倍,Na~+、Cl~-外排速度变化与品种耐盐性无明显相关性。2)高盐胁迫下,盐敏感小麦的根苗比降低,耐盐小麦根苗比升高;盐敏感小麦品种鲜重较CK显著下降,耐盐小麦品种变化不显著。3)盐胁迫条件下,耐盐及中等耐盐小麦品种,根部及地上部K~+含量较CK分别增加57%～88%和18%～112%,盐敏感小麦则分别降低40%～44%和24%～42%;耐盐小麦地上部Na~+增加倍数小于盐敏感材料,将更多的Na~+阻隔在根部,表现出了较好的区隔Na~+能力。4)盐胁迫后k~+流速与耐盐性评价指标根冠比变化量、鲜重变化率均呈高度的相关,其拟合度分别为0.972和0.832。250 mmol·L~(-1) NaCl胁迫24 h后小麦根部成熟区K~+流速可以作为小麦耐盐性筛选的重要生物标记。     

NaCl对泌盐红树和非泌盐红树Cd吸收和积累的影响

为研究NaCl对红树植物Cd吸收和转运的影响,本文以非泌盐红树秋茄和泌盐红树桐花树幼苗为实验材料,研究了不同浓度NaCl和CdCl2处理下地上和地下各器官中Na+、Ca2+、Cd2+离子浓度的变化,并利用非损伤微测技术测定植物根尖在不同处理下对Cd2+和Ca2+的动态吸收。结果表明,随着CdCl2处理浓度的增加,2种红树的根、胚轴、茎和叶4器官中的Cd2+含量均明显增加。而泌盐红树桐花树各器官中Cd2+含量均高于非泌盐红树秋茄,分别达到65%(根)、19%(胚轴)、203%(茎)和96%(叶)。利用非损伤微测技术测定Cd2+流,发现Cd2+内流能被Ca2+通道抑制剂LaCl3抑制,表明Cd2+主要通过Ca2+通道实现内流。在NaCl对Cd2+吸收的影响方面,低浓度NaCl(100~200 mmol/L)能促进秋茄对Cd2+的积累,但高浓度NaCl(400 mmol/L)抑制了桐花树和秋茄对Cd2+的吸收。这是由于:1)红树根系对Na+吸收增加,而Na+能与Cd2+竞争膜上转运蛋白上的金属离子结合位点从而减少Cd2+的吸收,2)NaCl促进了植物根尖对Ca2+的吸收,从而竞争性的抑制了Cd2+通过Ca2+通道的内流,最终减少了2种红树根系对Cd2+的吸收和积累。泌盐红树桐花树Cd2+含量高于非泌盐红树秋茄,表明桐花树根细胞质膜上的转运蛋白与Ca2+通道对Cd2+的吸收能力高于秋茄。