新西兰白兔超数排卵效果的研究

超数排卵简称\"超排\",是以各种外源性促性腺激素诱发动物卵巢的许多卵泡发育并排出具有受精能力的卵子的过程.通过对实验动物进行超数排卵,可以一次性获得比正常情况下排出多数倍的成熟卵母细胞,受精后获得处于不同发育阶段的胚胎,不仅能开发利用卵巢上的卵母细胞资源,而且能提高优良母畜的繁殖能力,对加速品种改良和提高动物繁殖率都具有重要意义.     

猪卵母细胞体外成熟技术研究进展

猪卵母细胞体外成熟(IVM)为猪胚胎的体外生产及相关胚胎工程技术如胚胎细胞和体细胞核移植、转基因和性别控制提供了廉价原料,是现代胚胎工程技术的研究热点之一。多年来科研人员为了进一步提高卵母细胞体外培养成熟率以及更深入地了解卵母细胞成熟机制,对影响卵母细胞体外成熟的因素进行了大量的研究。综述了影响猪卵母细胞体外成熟的相关因素。     

猪H1foo基因的克隆与真核表达载体的构建

卵特异性连接组蛋白(oocyte-specific linker histone H1,H1foo)是在哺乳动物卵母细胞与早期胚胎内特异表达的连接组蛋白,它在卵母细胞生长成熟、受精及胚胎发育中起关键性作用.本研究旨在克隆猪H1foo基因,并构建其真核表达载体.首先利用5'RACE和RT-PCR的方法获得猪H1foo基因的CDS区,并提交GenBank,登录号为HQ915640;然后将H1foo基因的CDS区连接到载体pMD19-T上,经酶切后定向克隆到表达载体pVenus上,从而构建pVenus-H1foo真核表达载体;用脂质体2000介导重组质粒pVenus-H1foo转染Hela细胞,荧光显微镜下观察、RT-PCR检测,确定重组质粒在Hela细胞内的表达和定位;最后通过体外转录试剂盒将H1foo-venus体外转录为mRNA,并显微注射至猪卵母细胞,荧光显微镜观察其表达和定位.序列分析表明猪Hlfoo基因CDS区全长1 041bp,编码346个氨基酸,蛋白分子量为36.45kD,在核苷酸水平上与牛、人和小鼠H1foo基因的相似度分别为75.7％、67.9％和54.3％;真核表达载体pVenus-H1foo转染后,能在He(l)a细胞中表达并可以准确的定位在细胞核;体外转录的H1foo-venusmRNA显微注射猪卵后其融合蛋白也能准确定位于细胞核.本研究克隆了猪H1foo基因并成功构建其真核表达载体;体外转录的H1foo-venusmRNA能在猪卵中正确表达和定位,为进一步研究H1foo在猪卵母细胞成熟以及核移植过程中的作用提供了基础资料.     

BPA不影响卵母细胞减数分裂相关基因Dazl的甲基化

为了探讨环境雌激素BPA对小鼠卵母细胞减数分裂相关基因Dazl甲基化的影响,本研究通过给孕鼠饮用含有BPA的水方式使胎鼠在发育过程中接触BPA,利用重亚硫酸盐测序法,分析了胎鼠生殖嵴卵母细胞不同发育时期Dazl甲基化水平的变化。结果显示:Dazl在减数分裂期间处于低甲基化水平,无论对照组或处理组均低于10%,说明Dazl的低甲基化对维持减数分裂的正常进行有重要作用;对照组与处理组的甲基化水平相当,差异不显著,说明本研究的BPA浓度不影响卵母细胞Dazl的甲基化水平。     

颗粒细胞对卵母细胞成熟和排卵影响研究进展

卵母细胞成熟和排卵的过程涉及多种细胞之间的相互作用和信号调控,颗粒细胞通过复杂的缝隙连接调节卵母细胞进行排卵.卵母细胞成熟与排卵的过程紧密相关,在黄体生成素(luteinizing hormone,LH)峰的作用下,颗粒细胞和卵母细胞通过双向调节诱导卵丘扩展,重塑卵泡结构并触发排卵.该文综述了颗粒细胞与卵母细胞的互作以...     

温度、无血清培养对山羊卵母细胞体外成熟的影响

在38℃和39℃不同温度条件下培养山羊卵母细胞,成熟率分别为63．6％和57．3％,差异不显著,说明只要培养温度在山羊正常体温的变动范围内,对其卵母细胞的成熟率没有影响。10 mg/mL BSA代替10％FCS培养山羊卵母细胞成熟率为58．7％,对照组为62．5％,差异不显著,说明无血清培养可以代替血清培养。     

卵母细胞成熟的调控机理

本文着重介绍卵母细胞成熟调控机理的研究进展,主要讨论成熟分裂阻滞、成熟分裂恢复和成熟促进因子与成熟分裂恢复的关系。     

特殊糖链调节精子与卵母细胞的结合

人类的受精起始于精子与卵母细胞胞外基质即卵鞘(ZP)的结合。哺乳动物精子和卵子的结合主要是由精子细胞质膜上的卵结合蛋白(EBP)与表达在ZP上的糖蛋白的相互作用调节的。这种糖类的相互识别在人类配子结合过程中起重要作用,但是由于人类卵子微小的体积和较少的数量使得研究ZP上的多糖结构和特征具有挑战性。近期英国,美国和中国香港大学的科研     

用FSH超排后屠宰与正常屠宰荷斯坦奶牛卵巢卵母细胞体外发育的研究

本试验是在加拿大Ｓａｓｋａｔｏｏｎｎ屠宰场,对屠宰前的荷斯坦奶牛用ＦＳＨ药物超排处理后,在第３天,５天,７天屠宰,抽取卵巢卵泡中卵母细胞,经体外成熟,体外受精,体外发育热后囊胚发育率与不超排处理屠宰奶牛囊胚发育率进行对比。     

家兔原始卵泡卵母细胞体外发育的培养体系研究

本研究根据家兔卵巢的发育特征初步探讨了家兔卵巢卵母细胞体外发育的培养体系。采集新生或30日龄家兔卵巢在不同培养液中培养,并分析家兔卵母细胞的体外发生与成熟情况与体内正常发育的兔卵巢卵母细胞之间的差异,来筛选和优化家兔卵巢卵母细胞的体外培养体系。本试验从高糖DMEM、FSH浓度、BSA/血清等3个方面来筛选较好的培养条件,结果表明:①不添加高糖DMEM的M199培养液与添加的相比,卵巢上卵母细胞数量要多,但随着培养时间的延长,组织块上卵母细胞的形态会变得不清楚;②家兔卵巢组织在FSH浓度为50和100m IU/m l、添加血清的DMEM/F12培养液中生长较好,体外培养24d后,卵母细胞数量多,直径增加到65μm;③与添加BSA的培养液相比,添加血清的培养液中的卵巢卵母细胞生长状态较好,体外培养28d后,卵母细胞数量多,并且直径可达65μm。