显微注射Ca^2＋激活小鼠M Ⅱ期卵母细胞

胞质内显微注入Ｃａ＾２＋可以激活小鼠Ｍ Ⅱ期卵母细胞，且随着卵龄的增加，激活率明显升高。卵龄小于１６ｈ（ｈＣＧ注射后）注射Ｃａ＾２＋引起的激活率很低，卵龄超过１８ｈ，激活率达到５０％以上。卵龄小于１６ｈ的卵母细胞，卵内注入超纯水未能激活卵母细胞，而在１８￣１９ｈ卵龄组，注射水的对照组激活率为３５％，但显著或极显著地低于注射Ｃａ＾２＋的试验组。激活前注射ＥＤＴＡ卵母细胞的激活率约为３０％，激活后注射     

哺乳动物卵母细胞玻璃化冷冻保存的研究进展

综述了近年来关于哺乳动物卵母细胞玻璃化冷冻保存的研究进展,并对这项技术的发展前景进行展望。重点讨论了影响哺乳动物卵母细胞玻璃化冷冻保存的几种因素,包括冷冻保护剂的种类和浓度、冷冻方法和卵母细胞所处的发育阶段等,以及冷冻过程中细胞膜、微丝、微管、皮质颗粒、纺锤体和线粒体等出现的损伤。目前,玻璃化冷冻法存在的最主要问题是冷冻过程中造成超微结构不可逆转的损伤影响胚胎发育,亟待解决。     

哺乳动物卵母细胞孤雌生殖激活的研究进展

介绍了哺乳动物孤雌激活的方式,阐述了孤雌激活的方式机制及提高孤雌激活的技术措施。     

牛卵母细胞体外培养成熟前后及体外受精卵Alpabe的电镜细胞化学研究

本研究用Adams的改良柠檬酸铅法,对牛卵巢2—5mm卵泡中的细胞及体外培养成熟卵和体外受精卵进行了碱性磷酸酶(AIpcse)的电镜细胞化学研究、其Alpase活性有一定的变化规律。培养前的卵母细胞酶活性较强,主要定位于质膜及质膜下颗粒细胞突起膨大部和透明带上。体外培养成熟卯质膜上的酶活性明显减弱颗粒细胞突起已抽回。但是在增宽的卵周隙中有较多的酶反应产物。体外受精卯的酶活性很强,不仅表现在质膜上的酶活性增强,而且还定位于线粒体及一些空泡的膜和细胞基质中。可见,Alpase的活性随牛卵母细胞的成热过程减弱,随受精过程增强。     

猪卵母细胞体外成熟技术研究进展

猪卵母细胞体外成熟(IVM)为猪胚胎的体外生产及相关胚胎工程技术如胚胎细胞和体细胞核移植、转基因和性别控制提供了廉价原料,是现代胚胎工程技术的研究热点之一。多年来科研人员为了进一步提高卵母细胞体外培养成熟率以及更深入地了解卵母细胞成熟机制,对影响卵母细胞体外成熟的因素进行了大量的研究。综述了影响猪卵母细胞体外成熟的相关因素。     

利用成年母兔耳部皮肤上皮细胞生产克隆胚胎的研究

本研究以成年母兔耳部皮肤上皮细胞为核供体，对兔体细胞核移植技术中融合、激活以及不同来源受体卵母细胞的选择等环节进行了研究，比较了不同电场强度对重构胚胎融合率、分裂率的影响。结果表明，细胞在培养10代后仍增殖旺盛，呈多角型，具典型的上皮细胞形态。     

牛卵巢的保存与卵巢内卵母细胞采集的研究

利用屠宰牛的卵巢,研究了卵巢内(Interior Ovary,IO)卵母细胞的回收方法与影响IO卵母细胞回收数量的因素,以及卵巢保存方法对卵母细胞体外受精后卵裂率与体外发育能力的影响.结果表明抽吸采取表面卵泡卵母细胞以后,用间隔1.6 mm的4个刀片平行排列构成的切割刀,纵横切割秦川牛卵泡期卵巢,其卵母细胞回收数量最高.两次回收平均每个卵巢可获得26.45个A、B级可用卵,较单纯抽吸采卵(5.15个)提高了约4倍.刀距增宽或缩小都会降低卵母细胞的回收数量.牛品种不同对IO卵母细胞的回收数量有显著影响,以中国荷斯坦牛最多(34.25个/卵巢),秦川牛次之(21.75个/卵巢),山丹牛最少(8.25个/卵巢).牛繁殖状态不同对IO卵母细胞的回收数量有显著影响,以卵泡期最多(21.75个/卵巢),黄体期和妊娠期次之(分别为11.75、10.75个/卵巢),老龄退化期最少(4.25个/卵巢).回收的IO卵母细胞直径和透明带外径分别达(126.9±9.98) μm和(151.85±10.39) μm,均较表面卵母细胞(分别为136.05±6.09 μm和160.80 μm±4.23 μm)要小的多(P＜0.01).卵巢保存温度25～29℃与30～37℃对IO卵母细胞体外受精后卵裂率与6～8细胞胚发育率无显著影响(P＞0.05),但保存时间则有显著影响,超过6 h会显著降低卵裂率和6～8细胞胚发育率(P＜0.05).     

培养条件对牛卵母细胞体外受精后胚胎发育的影响

以屠宰场牛卵巢为材料,采用体外成熟、体外受精、早期胚胎的体外培养等方法,研究了牛卵泡液(BFF)浓度、颗粒细胞单层(GCM)和培养微滴大小对牛卵母细胞体外发育潜力的影响。结果表明:(1)与未添加BFF的对照组相比,成熟培养液中分别加入10%,20%和40%的混合BFF,均可明显促进卵母细胞受精后的发育(P<0.05),但20%组和40%组出现卵母细胞或胚胎粘连。因此,成熟培养液中以添加10%的混合BFF较为适宜。(2)添加GCM对1级卵母细胞的卵裂率、6~8细胞发育率和囊胚率无显著影响(P>0.05);但添加GCM的2级、3级卵母细胞受精后的卵裂率、6~8细胞发育率和囊胚率分别显著高于未添加组(P<0.05)。(3)将取自每头牛的约20枚卵母细胞,分别置于不同大小的微滴(30,50,100和200μL)中培养、受精,结果表明,30和50μL组的囊胚发育率显著高于100和200μL组(P<0.05)。     

Histological Study on the Polyovular Folliclular Development of Chinese Prematural Lubei White Goat

The present study was conducted to investigate the histological characteristics of Polyovular follicles in Chinese Lubei white female goats with age 2-5 months. The results suggested that the healthy antral follicles with twin-oocyte could be observed. There were many multi-oocyte phenomena in primordial and primary follicles with a proportion of nearly 75% in primordial follicles. Primordial follicle was in the outer of cortex in ovaries and most of them remained active. The nest of multi-nuclear primordial follicle was developing into primordial follicle with 1 to 3 nuclei.     

猪卵母细胞体外成熟的影响因素

综述了猪卵母细胞体外成熟的影响因素,并探讨了猪卵母细胞体外成熟的最佳条件和培养体系。