硅藻土吸附固定化Bacillus sp.DL-2胞内蛋白酶拆分制备(S)-乙酸苏合香酯

[目的](S)-乙酸苏合香酯是手性药物合成的关键手性砌块,其在多种手性化合物的合成及医药、香料的工业生产中具有重要的作用.传统的化学合成手性化合物的方法需要有毒有机溶剂及重金属的参与,对环境及人类具有严重的危害,同时得到的手性化合物的光学纯度较低.与传统的化学合成相比,酶法选择性拆分消旋体化合物,具有高立体专一性和区域选择性、副反应少、产率高、产物光学纯度好以及反应条件温和的优点,是一种被广泛认可的拆分方法.实验表明,Bacillus sp.DL-2胞内蛋白游离酶可拆分制备(S)-乙酸苏合香酯,然而游离酶不易回收且稳定性差,将Bacillus sp.DL-2胞内蛋白游离酶制备成固定化制剂,克服了游离酶对环境敏感,稳定性不高的缺点,为工业化生产(S)-乙酸苏合香酯奠定了基础.[方法]酶的固定化方法主要有物理吸附法、离子结合法、共价结合法、交联法和包埋法.以吸附法固定酶,酶的构象很少改变,因此,酶的催化活力损失较少;且吸附法固定化操作过程简单,因此吸附法在经济上是最具吸引力的固定化方法.硅藻土由硅藻的细胞壁沉积而成,硅藻土表面的多孔性与负电性使其呈现明显表面吸附性,因而被常用做吸附载体.以硅藻土作为固定化载体,对Bacillus sp.DL-2胞内蛋白酶进行固定化,用以拆分制备高光学纯的(S)-乙酸苏合香酯.利用单因素实验优化,确定制备固定化酶的最佳固定化条件及制备(S)-乙酸苏合香酯的最佳拆分条件,并测定了制备的固定化酶对金属离子的敏感度及储存稳定性.[结果]最佳固定化条件为:温度40℃,pH为7,固定化时间10 h,载体添加量100 g/L.在最佳固定化条件下制备了固定化酶,优化确定了制备(S)-乙酸苏合香酯的最佳拆分条件为:固定化酶用量为160 mg/mL,拆分时间7 h,拆分温度30℃,缓冲液pH为7.[结论]在最佳固定化及拆分条件下,制备的(S)-乙酸苏合香酯e.e.值可达到96.8％,转化率为73.9％,且固定化酶对金属离子敏感度较低,对反应环境要求较低,适用于工业化生产.固定化酶在4℃条件下储存,随保存周数的增加,e.e.值及转化率均逐渐降低,但4周后e.e.值仍能达到90.1％,转化率保持在66.6％左右,具备较高的储存稳定性,为工业化生产(S)-乙酸苏合香酯提供了参考.     

漆树酶在漆酚树脂上的固定化研究

介绍了漆酚树脂吸附金属离子后对漆树酶的固定化方法，比较了Ｆｅ＾３＋和Ａｌ＾３＋、漆酚树脂和漆酚－水杨酸接枝树脂对漆树酶的固定化结果显示，漆酚－水杨酸－Ａｌ螯合树脂对漆树酶的固定化活力最高，测定了溶液ＰＨ，环境温度对固定化漆树酶活性的航固定化漆酶的重作用性。另外，测定了固定化漆树酶的米氏常数，Ｋｍ＝４．９×１０＾－３，并讨论了Ｋｍ小于天然漆树酶的米氏常数的原因。     

聚乙烯醇包埋微生物技术及其在废水处理中的应用

聚乙烯醇(PVA)是由日本学者首先开发的一种新型微生物固定化包埋剂,具有强度高、抗微生物分解、对微生物无毒及价格低廉等特点。在国外已广泛应用于微生物发酵工业和有机废水处理等领域,国内也正探索这一新兴技术的研究和应用。但常遇到的PVA固定化微生物成球难、易发胀上浮、破碎、包埋微生物活性下降等问题亟待解     

蚕丝新用途研究进展

随着对蚕丝物理化学性质研究的深入，蚕丝新用途的研究得到较快的发展。本文在介绍了蚕丝新用途利用原理，介绍了蚕丝在化妆品，医药，固定化酶载体材料，食品以及再生丝和涂膜化纤表面等方面的应用和研究进展。     

挪威外贸法律制度:对我国与挪威自贸区谈判的启示

<正>外贸法律制度是固定化和具体化的外贸政策,是外贸活动的法律依据。当前中国与挪威已经启动自由贸易区(FTA)谈判工作。关税、质检、贸易救济等外贸法律问题是自由贸易区货物贸易谈判的基础和重要内容,在此,笔者试图通过研究挪威外贸法律制度,为我国与挪威FTA谈判提供几点参考建议。     

海藻酸钠-聚乙烯醇交联微球制备参数优化研究

采用海藻酸钠和聚乙烯醇为包埋剂，选取交联时间、海藻酸钠和聚乙烯醇用量比（SA ∶ PVA）以及海藻酸钠和聚乙烯醇的总浓度为影响因素设计L49（52×7）正交实验，探讨包埋的最佳理化条件。以包埋材料的成球效果，包埋小球的硬度、弹性及微观结构为考察指标，比较包埋小球性能，探讨包埋条件。结果发现当SA ∶ PVA为7 ∶ 3，总浓度为4％，交联时间为24 h时包埋效果最佳。     

废弃物厌氧生物处理工艺的研究进展

近年来，国内厌氧工艺技术的发展主要体现在固定化细胞技术的应用、三相分离器的优化设计和UASB AF的快速启动及设备防腐机理的研究等方面。为此，总结了厌氧工艺与其它工艺相结合的应用以及厌氧工艺的发展方向。     

高效脱色菌的特性及其在染化废水厌氧处理中的生物强化作用

从活性污泥等微生物源中分离、筛选获得10株高效脱色菌，经鉴定其属于Pseudomonas,Bacillus，Xanthomonas，Erwinia，Alealigenes，Plesiomonas。对艳红染料生产废水脱色试验表明最适温度30℃，pH6.6～8.0，湿细胞浓度20～30!g*L-1;静置培养（兼氧）脱色率高于振荡培养；外加NADH、NADPH、易降解有机物和有机废水可强化脱色菌的脱色性能。为实现脱色菌的资源化应用，试验将PseudomonasD18,ErwiniaD17,AlcaligenesD19andPlesiomonasD124株脱色菌制成混合培养物和固定化细胞，分别投加于处理染化废水的厌氧反应器，结果发现在相同COD负荷、水力负荷条件下，投加固定化细胞的反应器，其脱色率可提高5!%～10!%，出水苯胺浓度提高40!%～65!%。电镜观察发现脱色菌在胶团内外持留、增殖。厌氧反应器性能的改善主要通过功能性微生物生物量和相关基因库量的增加而实现。