农杆菌介导油菜黑胫病菌遗传转化

为优化建立农杆菌介导的油菜黑胫病菌遗传转化技术体系，以携带潮霉素磷酸转移酶基因的pCH-sGFP 为载体，农杆菌LBA4404为介体，对油菜黑胫病菌的分生孢子进行转化。油菜黑胫病菌的最佳转化体系为:分生孢 子浓度106个/mL，农杆菌OD600值0.6，乙酰丁香酮浓度200 μmol/mL，pH 5.8，25℃，共培养4 d，获得120～161个转化 子。随机选取26个转化子连续培养5代能够稳定遗传，绿色荧光蛋白基因gfp 表达的菌丝和孢子可见绿色荧光。 PCR鉴定发现T-DNA 已整合进油菜黑胫病菌基因组中，Southern blot鉴定发现T-DNA以单拷贝的形式插入黑胫病 菌中,转化子均能够稳定遗传。建立油菜黑胫病菌遗传转化体系为该病菌的致病机制研究和功能基因分析奠定了 基础。     

中草药源杀菌剂“轮纹一扫光”对苹果枝干轮纹病防治作用研究

本文选苹果重要病害轮纹病作为研究对象，通过皿内抑菌试验、抑制孢子萌发试验、离体枝条及田间药效试验，研究中草药源杀菌剂“轮纹一扫光”对苹果枝干轮纹病的防治作用，以便为果农提供有效防治该病害的药剂。结果表明，在室内试验中，“轮纹一扫光”对菌丝生长、分生孢子器的产生、孢子的萌发有100%的抑制作用；在离体枝条的试验中，“轮纹一扫光”的保护效果为68.06%，治疗效果较好为87.26%；田间防治试验中，刮除病斑后“轮纹一扫光”的防治效果达到100%。该研究结果为苹果轮纹病的生物防治提供了新思路，对苹果病害的防治具有重要意义。     

基于割台升降系统电液比例多路阀特性研究

以负载敏感电液比例多路阀为研究对象,分析了应用于大型联合收割机割台升降控制的电液比例多路阀的工作原理和结构特点,设计了电液比例多路阀结构。通过AMESim的HCD模块对负载敏感多路阀及联合收割机割台升降液压系统进行了仿真分析,得到割台工作的基本动作曲线,使模型能够真实模拟大型联合收割机割台升降系统的实际工况,旨在验证负载敏感系统应用于割台升降液压系统的可行性和节能性。     

禽流感病毒H9N2亚型HA蛋白在水稻胚乳中的稳定、高效表达及活性鉴定

为了在体外获得表达量高、储存容易、成本低且免疫活性高的H9N2亚型HA蛋白,利用水稻胚乳表达系统表达HA蛋白。首先,将HA基因根据水稻偏好密码子进行优化,合成到pUC57载体上,通过双酶切、连接将HA基因先后构建到中间载体pMP3和植物表达载体pCAMBIA1300上;再通过电极法将pCAMBIA1300-HA导入到根癌农杆菌EHA105中;然后用农杆菌侵染TP309水稻愈伤组织;最后经潮霉素筛选、分化、生根、移栽至田间种植。利用CTAB法提取叶片基因组DNA,PCR鉴定T_0阳性植株;利用Dot Blot和Western Blot检测HA蛋白在水稻胚乳中的表达;提取阳性的T_1叶片DNA,通过荧光定量PCR方法筛选纯合植株;利用温汤杀雄剪颖授粉法,将含有HA蛋白的TP309与低谷蛋白水稻杂交;利用Western Blot检测杂交后的T_3植株蛋白表达量;利用双抗夹心ELISA方法比较水稻源和昆虫表达HA蛋白的活性。结果显示,成功构建了中间载体pMP3-HA和植物表达载体pCAMBIA1300-HA,且pCAMBIA1300-HA成功导入到根癌农杆菌EHA105中;PCR检测到有66株植株的HA基因成功整合到水稻基因组;Dot Blot和Western Blot检测结果表明,HA蛋白在水稻胚乳中成功表达;利用荧光定量PCR方法,107株T_1中筛选到31株纯合植株;Western Blot检测结果表明,杂交后的HA蛋白表达量大幅度提高;双抗夹心ELISA结果证实,水稻胚乳表达的HA蛋白的活性高于杆状病毒-昆虫细胞。     

有机肥替代化肥对土壤养分动态及甜玉米生产的影响

有机肥替代化肥在甜玉米生产中是一项重要举措,明确其对土壤养分供应和甜玉米产量与品质的影响具有重要意义,本研究旨在通过田间试验为甜玉米生产中实施有机肥替代化肥行动提供实验依据。试验共设4个处理,分别为①100%化肥(代号N10)、②70%化肥N+30%有机肥N(代号N7)、③40%化肥N+60%有机肥N(代号N4)和④100%有机肥N(代号N0),测定指标包括2次表层土壤养分(无机N、有效P、速效K、土壤微生物量C、N)、植株生长状况(株高、叶绿素值、干物质量)和收获期甜玉米产量与品质指标,分析讨论有机肥替代对土壤N素供应、甜玉米产量和品质及甜玉米茎叶作为青储饲料的影响,得到以下结果:(1)在大喇叭口期,60%～100%有机肥替代显著降低表层土壤无机N的供应水平,提高土壤微生物量C、N水平和旗叶N含量;(2)在收获期,60%～100%有机肥替代显著提高土壤微生物量C和C/N,显著提高旗叶叶绿素和N含量及整株N含量;(3)有机肥替代对甜玉米果穗产量有所影响,但对果穗品质无显著影响;(4)60%有机肥替代显著提高甜玉米植株的N含量,其茎叶品质符合青储饲料的质量要求。对于生长期短、N素需求强度大的甜玉米而言,有机肥替代化肥如何影响土壤N素的供应过程,尚需进一步研究。     

乐至县森林资源现状分析与对策

以乐至县2016年森林资源规划设计调查为依托,阐释了乐至县森林资源的现状、特点。针对当前森林资源中存在或可能发生的问题,提出了加强森林管护、实施林业综合开发,强化森林防护能力和提高信息化建设水平等科学管理的对策措施,旨在为乐至县森林资源高质量发展提供参考依据。     

上海市狂犬病调查与分析

为了解上海市人间和畜间狂犬病流行状况以及犬免疫情况,探查感染来源和防控漏洞,采用摸底调查和数据分析方法开展调查,并分析流行原因。调查显示,自2009年以来,上海市几乎每年都有人间狂犬病病例出现;2019年5—6月发生的3起犬咬伤事件中,有2起确定感染来源为流浪犬;2011—2018年上海市免疫犬的狂犬病免疫合格率一直保持在75%以上,但2019年1—5月流浪犬猫的抗体阳性率仅为11.32%,远低70%的国际要求。结果表明,上海市流浪犬中存在狂犬病流行,并导致了人的发病死亡,它是上海市狂犬病流行的主要风险源。因此,要加强流浪犬的管理、监测和免疫,降低流浪犬的数量,提高流浪犬的免疫密度和免疫质量;加强防控技术培训和防治知识宣传,提高公众防范意识;完善相关法规,进一步明确相关部门的工作职责。本调查探明了上海市狂犬病流行的主要原因,并提出了可行性建议,为上海市控制和消灭狂犬病提供了参考。     

水溶性木质素对纤维原料酶水解的影响研究进展

木质纤维素具有储量大、可再生等特点,是生物质精炼的重要原料。通过酶水解将高聚糖转化为葡萄糖、木糖等单糖,是目前木质纤维素生物质精炼的重要途径。传统观点认为,酶水解体系中的底物木质素和溶解木质素都会阻碍木质纤维原料中纤维素的酶水解,主要表现为木质素阻碍了纤维素酶对纤维素的可及性、木质素对纤维素酶的非生产性吸附和溶解的木质素或类木质素结构(木质素衍生的酚类分子)对纤维素酶的抑制作用。但是近几年的研究表明,在酶水解体系中加入适量的水溶性木质素可有效促进含木质素底物中纤维素的酶水解。笔者总结了近年来水溶性木质素对木质纤维素生物质酶水解的研究进展,从纤维素酶-木质素相互作用的角度探讨了水溶性木质素对纤维素酶水解的促进作用,提出了水溶性木质素与纤维素酶之间的作用机理,即水溶性木质素与底物木质素对纤维素酶存在竞争吸附,水溶性木质素与纤维素酶的吸附域结合形成木质素-纤维素酶复合物,可有效减少底物木质素对纤维素酶的非生产性吸附,从而提高木质纤维素生物质的酶水解转化效率。     

基于模糊-PID复合控制的变量喷药除草系统设计

为了提高农药的利用率、消除模糊控制在平衡点附近的控制盲区,以及实现杂草变量喷药功能,设计了一套基于模糊-PID复合控制的变量喷药除草系统。该系统利用机器视觉技术实现杂草密度信息的采集,采用模糊控制与PID控制相结合的方法来实现电磁阀开度的控制,从而实现对杂草的变量喷施。仿真试验结果表明:该系统阶跃响应效果良好、无超调量,可实现喷药量随杂草密度变化而实时变化的目的,能够有效地消除响应误差。田间试验结果表明:在作业速度为2km/h时,系统的相对控制误差小于4.5%,满足设计要求。