土壤中有益放线菌的高效分离、筛选和生物测定技术

结合他人经验和近年作者的实际工作,本文系统介绍了土壤标本的采集、处理,放线菌的分离、纯化。放线菌分离物及其代谢产物对病原菌(真菌、细菌)、害虫和杂草的生物测定、评价,为研发微生物农药打下基础。     

安徽省水稻纹枯病菌致病力分化与遗传多样性

对分离自安徽省7个县(市)的32株水稻纹枯病立枯丝核菌在5个鉴别寄主上进行了致病力测定,分析了其遗传多样性。结果表明,水稻纹枯病菌各菌株间的致病力存在显著差异,安徽省水稻纹枯病菌中大多数为中等致病力。对这些菌株进行RAPD分析,结果显示,DNA多态率达98.2%,遗传相似性系数在0.62～0.84之间,表明水稻纹枯病菌遗传分化较大,群体结构多样性较丰富。在相似系数为0.653时,所有菌株可聚合为4类,聚合类型与菌株的地理来源相一致,菌株的致病力与RAPD聚类分析结果无相关性。     

新霉素磷酸转移酶基因nptⅡ的原核表达、蛋白纯化及其活性鉴定

 通过PCR方法从pCAMBIA1305载体上克隆了新霉素磷酸转移酶基因nptⅡ的全编码序列,并插入到原核表达载体pET30a（+）中,构建了重组质粒pET30a nptⅡ。将重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）宿主菌,经IPTG诱导,获得了相对分子量为35 kD的表达蛋白,约占全菌总蛋白的45％。表达蛋白以可溶性和包涵体两种形式存在。用5 mmol/L 二硫苏糖醇和1％十二烷基肌氨酸钠变性溶解包涵体,经透析后复性获得了可溶性重组蛋白。将可溶的表达蛋白用Ni2+ NTA亲和层析纯化,获得纯化的NPTⅡ蛋白,电泳谱带扫描分析表明蛋白纯度达95％以上。体外活性检测显示,NPTⅡ蛋白具有良好的生物活性,在浓度30 μg/mL以上时可使卡拉霉素失去抑菌活性。     

抗褐飞虱和抗除草剂转基因粳稻新品系的选育及其中间试验

利用根癌农杆菌介导法,将位于同一双元载体pCUGNA-BAR上的GNA基因和Bar基因导入粳稻品种广陵香粳,获得了转基因品系.经PCR扩增检测和Southern杂交分析证明GNA基因已整合到转化植株的基因组中.在转化后代中选育了一个表现优异的转基因水稻新品系3015-1-1进行中间试验,田间农艺性状调查发现该品系3015-1-1基本保持了未转化对照优良的农艺特性.抗虫和抗除草剂试验表明, 3015-1-1对褐飞虱的蜜露排泄量和繁殖率具有显著的抑制作用,对除草剂Basta有明显抗性.     

植物生长素对水稻叶片衰老及抗氧化酶活性的影响

通过植物生长素707-02（水稻专用,为由光合菌、固氮菌、溶磷菌和解磷菌等8属80余种有益菌复合而成的微生物生长调节剂）在水稻大田上的施用试验,研究了其对水稻叶片衰老和抗氧化酶活性的影响。结果表明,植物生长素707．02能增加水稻植株倒1～3叶叶绿素含量和剑叶的净光合速率,对提高产量和籽粒中多种氨基酸的含量有明显效果,提高了水稻接种纹枯病菌后剑叶中抗氧化酶SOD和POD的活性。     

氮肥施用量和施用方法对超级杂交稻纹枯病发生的影响

 The experiments of resistance of different super hybrid rice (SHR) combinations to sheath blight (ShB) (Rhizoctonia solani Kühn) and effect of nitrogen fertilizer (NF) dosage and fertilization methods on ShB occurrence were conducted in Hangzhou during 2005-2006. The results indicated that the resistance level of different SHR combinations to ShB were significantly different. For the same combination, the severity of ShB depends on the seeding and transplanting period. The disease index showed a positive correlation with the nitrogen dosage, but depended on resistance level of combination. The ShB severity of susceptible combination showed high positive correlation with NF dosage. At the flowering stage, there were no effect of nitrogen fertilization method on the occurrence of ShB, but the fertilization method showed significantly effect at dough stage. The occurrence of ShB was significantly affected by the supply rate of nitrogen at different rice growing stage. When the total NF supply was 165 kg per hectare, the occurrence of ShB with high NF rate (80%) at early stage (as basal and tillering fertilizer) and low rate (20%) at late stage (as panicle fertilizer) was more serious than that of low NF rate (60%) in early and high NF rate (40%) as panicle fertilizer. The result was the reverse of conventional viewpoint about that high NF supply at rice late growing stage might lead to severe occurrence of ShB.     

纹枯病菌对不同水稻品种叶片中抗病性相关酶活性的影响

对优质抗纹枯病水稻品种ZH5、较抗纹枯病品种特青、感纹枯病品种Lemont及恢复系泸恢17、多系1号和GB8等水稻材料进行纹枯病菌接种,测定了水稻叶片中与抗病性相关的超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化物酶 (POD) 的活性和丙二醛 (MDA) 的含量。不论纹枯病菌接种与否,ZH5和特青叶片中SOD活性均明显高于Lemont;纹枯病菌接种后,抗性品种ZH5和特青叶片中POD活性升高,感病品种Lemont 叶片中POD活性降低;不论是抗病还是感病的水稻材料,纹枯病菌接种后叶片中MDA含量均有所增加,但ZH5叶片中MDA含量明显低于其他参试材料。     

外源施硅对水稻抗纹枯病相关酶及酚类物质的影响

研究了纹枯菌胁迫后,外源施硅对纹枯病感病品种Lemont体内防御相关酶及酚类物质的影响。结果表明,接种水稻纹枯病菌后,施硅接种处理与不施硅接种处理相比,植株体内H2O2含量、MDA含量有减少的趋势,而CAT活性、LOX活性、总可溶性酚含量和木质素含量有增加的趋势;不接种纹枯病菌时,施硅与不施硅处理之间上述物质的含量差异不大,但总体上低于接种纹枯病菌处理。     

生防潜力菌H158与杀菌剂混配对水稻纹枯病菌毒力增效作用

采用菌丝生长速率法,分别测定了井冈霉素A、啶酰菌胺及两者间混配的毒力系数,及对生防潜力菌H158繁殖、生长的影响。结果表明,啶酰菌胺+井冈霉素A按1∶100、1∶200、1∶300和1∶400比例混配,对水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)的EC50分别为5.5814、6.8186、5.2672、2.7772 mg/L,共毒系数分别为0.9716、1.5182、2.8210、6.8325,除1∶100表现为协同作用外,其他混合比例对纹枯病菌均表现为增效作用。啶酰菌胺对生防潜力菌H158的生长抑制作用不大,低浓度井冈霉素A对H158表现为相容性,较高浓度时有一定抑制作用。但两者混配药剂中加入H158,对其抑制情况与啶酰菌胺相似。混配剂中加入H158后对纹枯病菌的抑制率比未加H158时有所提高,均高于90.00%。     

水稻纹枯病立枯丝核菌的分类及遗传多样性研究进展

水稻纹枯病是一种世界性病害,目前该病已成为限制水稻高产、稳产的主要障碍之一。本文简述了引起水稻纹枯病的病原菌立枯丝核菌的形态特征,概述了依据菌丝形态特征和融合群进行分类的概况,阐述了同工酶、RAPDI、SSR和AFLP等分子生物学技术在水稻纹枯病菌遗传多样性研究中的应用。