水稻着丝粒特异组蛋白CENH3抗体的制备与应用

【目的】着丝粒是真核生物染色体的基本功能元件之一,其功能是在细胞有丝分裂和减数分裂时期精确地调控染色体配对和分离并维持染色体的稳定。着丝粒结构是由DNA和蛋白质形成的一种复合体。着丝粒特异组蛋白(centromere-specific histone H3,CENH3)是功能着丝粒是否具有活性的最基本特征。所以制备CENH3的相关抗体是进行着丝粒结构与功能研究的前提条件之一。【方法】通过设计短肽进行兔免疫实验,制备了水稻着丝粒特异组蛋白CENH3兔源抗体,利用ELISA和蛋白免疫荧光(immunofluorescence,IF)等检测方法对抗体有效性进行了鉴定。【结果】ELISA检测显示制备的CENH3抗体有效稀释度为1:40万,并且蛋白免疫荧光信号在水稻体细胞每条染色体的着丝粒区域均能检测到。同时,该抗体也可以应用于玉米等其他物种。通过染色质免疫沉淀(ChIP)技术获得与CENH3相结合的DNA分子,并进行PCR扩增和FISH定位分析,结果显示相应的Ch IP-DNA位于水稻功能着丝粒区域。【结论】本研究制备的水稻CENH3兔源抗体能满足着丝粒研究中相关实验的要求,可进一步应用于着丝粒的结构与功能研究。     

优质抗病不育系陵风A及其杂交粳稻陵风优18的选育

BT型粳稻不育系陵风A及其所配制的杂交粳稻陵风优18由扬州大学选育,于2006年通过江苏省农作物品种审定委员会审定。陵风A具有不育性稳定和柱头外露率高、异交结实率高的特点。陵风优18具有分蘖早、前期繁茂性好,后期生长清秀、茎秆粗壮、抗倒性强、稳产性好的特点。两者品质均达国家优质稻谷标准。高抗条纹叶枯病。     

不同转化方法培育无抗性选择标记转基因水稻效率的比较

 为研究不同的转化方法培育无抗性选择标记转基因水稻的效果，以4个籼粳稻品种为受体材料，比较了用农杆菌介导的双菌双载体和双T DNA单载体两种共转化技术的共转化频率及随后获得的无抗性选择标记基因转化子的效率。结果表明，在双菌双载体介导的转化中，4个水稻品种的平均共转化频率为10.1%，其中55.6%的共转化植株自交后代中可筛选出无抗性选择标记的转基因水稻植株。在单载体双 T DNA介导的共转化中，平均共转化频率为45.0%，从其中600%的共转化植株自交后代中可获得无抗性选择标记的转基因植株，即双T DNA单载体法的去选择标记的效率（270%）要较双菌双载体法（5.6%）高。     

芍药栽培品种ISSR反应体系的优化和应用

以栽培芍药为材料,通过对ISSR-PCR反应体系中的Mg~(2 )、dNTP和Tag DNA聚合酶浓度的优化,以改进芍药的ISSR反应体系;从55对引物中筛选出4对有稳定扩增结果的引物;用这4对引物对22个芍药栽培品种的DNA进行扩增,其所得扩增产物与所选芍药性状经过数据处理后,用MATLAB软件分别进行聚类分析,结果表明供试芍药品种皆可分为3个类群,其分子标记与性状的聚类分析间有较强的相关性。     

高产稳产杂交粳稻新品种陵香优18的选育

1 选育思路 　　20世纪90年代初杂交晚粳泗优422的选育成功,使育种家得到这样的启示,即通过粳、爪(籼粳中间型)交可能是进一步提高杂交粳稻优势的重要途径之一.……     

运用PBL四步教学法进行心内科护理带教的体会

目的 探讨PBL教学法在护理临床带教中的应用效果.方法 将96名护理实习生随机分为对照组和实验组,各48名,实验组采用PBL四步教学法带教,对照组采用临床路径式带教方法,采用出科前考核和问卷调查形式进行教学效果的评估.结果 实验组实习生的理论、操作及综合成绩均明显高于对照组(p<0.05),实验组的100%同学认为PBL教学法能提高自学能力、护理操作水平以及分析解决问题的能力:97.9%的同学认为PBL教学法有助于培养评判性思维能力.结论 在护理临床带教中应用PBL教学法,有利于培养护理实习生的自学能力、评判性思维能力、沟通能力、健康教育的主动性和技巧,可显著提高临床护理带教质量,深受护生们欢迎,可在临床护理带教中进一步推广应用.     

“对分课堂”在农科遗传学实验课程教学中的应用

从"对分课堂"的特点以及高等院校遗传学实验课程教学中存在的问题出发,对"对分课堂"教学模式在遗传学实验高等教育教学中的应用进行了探讨,旨在将传统讲授式课堂教学的优点与讨论式课堂的优点有机结合,激发学生学习积极性。     

CRISPR/Cas9系统在水稻中的发展和利用

基因组学的快速发展和多种基因组编辑技术的出现,对植物科学以及农业领域中的基因功能研究和遗传改良产生了巨大影响。其中,CRISPR/Cas9系统介导的基因组编辑技术能够快速编辑各种生物体中的基因组,以其简单稳定高效等优点,成为目前最先进且被广泛运用的系统。水稻是我国最重要的粮食作物之一,其遗传资源丰富且基因组小,适合用于基因组编辑技术的研究。讨论水稻改良的基因组编辑策略,重点介绍CRISPR/Cas9系统在水稻抗病性、抗逆性、杂种优势等方面的应用和进展,强调CRISPR/Cas9在水稻改良中的主要挑战和发展意义。     

水稻非整倍体无性繁殖过程中的遗传稳定性

无性繁殖是保存非整倍体的一个有效手段。为研究该过程中非整倍体的遗传稳定性, 从水稻第8染色体短臂端三体(2n+·8S)自交后代中筛选出相应端四体(2n+·8S+·8S), 其田间性状表现为植株矮小, 叶片非常窄且内卷, 结实率差。在多年无性繁殖过程中, 该端四体所添加的其中1条·8S容易丢失使无性系产生性状变异。通过FISH分析发现该无性变异系的原始系中所添加的2条·8S, 其中1条·8S在着丝粒区域检测不到水稻着丝粒的基本组分CentO序列, 但可以检测到水稻着丝粒的另一基本组分CRR序列, 该染色体可以稳定遗传; 另外1条·8S在着丝粒区域同时检测不到CentO和CRR序列, 该染色体不能稳定遗传。而在最初保存的相应端三体亲本材料的·8S中, 同时包含CentO和CRR序列。说明·8S上的CentO和CRR在多年的组织培养过程中会随机丢失, 导致含有·8S的非整倍体在无性繁殖过程中的遗传不稳定性。     

无抗性选择标记转基因软米和糯稻新品系的选育及中间试验

直链淀粉含量是影响稻米品质的最重要因素之一。为培育直链淀粉含量较低的软米和糯稻新品系,在经共转化法获得的转反义Wx基因水稻自交后代中筛选获得国不含抗性选择标记基因的纯合体.对这些纯合转基因水稻的分析表明,其未成熟种子胚乳中Wx基因表达水平和成熟种子中Wx蛋白量较未转化对照有不同程度的降低。转基因水稻成熟种子中直链淀粉含量较未转化对照有不同程度的下降，2个转基因系降低至10%左右，相当于软米的直链淀粉含量，1个转基因系降到了2%以下，形成了糯稻新品系。转基因稻米中直链淀粉含量降低后，其胶稠度相应变软，而糊化温度未发生明显改变。田间试验结果表明，转基因水稻的大部分农艺性状与受体品种武香粳9号无显著差异。因此，本研究成功培育了无抗性选择标记且淀粉品质改良的转反义Wx基因水稻新品系。