一种棉花DNA快速高效简便的提取方法

探索了一种提取棉花DNA的简便方法,利用该方法提取的棉花总DNA经过分光光度计、琼脂糖凝胶电泳和随机SSR引物PCR扩增检测,结果表明,利用本方法提取的棉花总DNA纯度高,无降解现象,适用于进行常规PCR扩增以及高精度要求的SSR扩增。     

我国玉米品种标准DNA指纹库构建研究及应用进展

介绍了我国玉米品种标准DNA指纹库构建的进展及应用情况。我国玉米品种标准DNA指纹库规模已达到22 089份,经与国内外作物品种DNA指纹库比较,是全球品种数量和建库规模最大的DNA指纹库,并且在区域试验、品种权保护及种子质量管理等方面都得到了广泛应用。至今已开展玉米品种真实性鉴定等达40 000多份次。同时,对DNA指纹库构建未来发展进行预测,建议继续发挥SSR标记的作用、加快推进SNP标记的研发、发掘In Del标记的应用潜力并持续关注测序技术的发展。     

大樱桃基因组DNA提取及RAPD分析

以大樱桃8个品种为研究对象,利用改进CTAB法进行DNA提取,使用10碱基随机引物,通过PCR进行RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)扩增,建立了鉴定大樱桃品种的分子鉴定图谱。结果表明:较高质量的DNA和理想的RAPD反应体系能够保证RAPD技术具有较好的稳定性;筛选出的不同引物的RAPD扩增谱带组合可用于大樱桃栽培品种的分子鉴定,具有在生产应用的潜在性。     

上海动物园非洲企鹅种群线粒体DNA序列分析及遗传管理建议

非洲企鹅(Spheniscus demersus)是一种濒危海鸟,也是动物园展出的重要物种。上海动物园从日本和荷兰引进非洲企鹅,种群不断扩大,并成为国内种群发展的基础。但对其遗传多样性和结构了解很少,无法开展有效的遗传管理。本研究分析了上海动物园39只非洲企鹅的mtDNA D-loop区430 bp序列,并与已发表的日本种群的数据进行比较。结果表明,该片段存在15个变异位点,占分析位点的3.5%;共定义了10个单倍型,其遗传距离为0.002~0.019。日本种群包含A、B两个mtDNA D-loop单倍型世系,上海种群的10个单倍型均属于A世系,且与日本种群有5个共享单倍型,其遗传多样性水平略低于日本种群。上海种群可以进一步分为3个小的世系,但置信度偏低(54%~87%)。上述结果提示,上海种群相对于日本种群的A世系而言有较好涵盖度,但仍有必要进一步引进建群个体,尤其是含有B世系单倍型的个体。     

用于构建双价禽流感DNA疫苗的双目的基因表达质粒的构建及鉴定

为探索构建禽流感双价或多价DNA疫苗的可行性,本研究以本实验室前期研制的禽流感DNA疫苗p CAGGopti HA5为基础[其中含有禽流感病毒(AIV)A/Goose/Guang Dong/1/96(H5N1)的HA基因],将增强型绿色荧光蛋白(eGFP)报告基因作为第二个目的基因,利用双启动子启动、内部核糖体进入位点(IRES)介导以及通过蛋白Linker编码序列连接融合表达两个目的基因的形式,构建了双启动子重组表达质粒pH5-eGFP、IRES介导的重组表达质粒pHIE以及融合表达重组质粒pH6E。并采用脂质体介导将这3种重组质粒分别转染293T细胞,通过间接免疫荧光试验和western blot方法检测HA和eGFP这两种目的蛋白的瞬时表达情况。结果显示,这3种重组质粒均能够正确表达AIV的HA蛋白和eGFP。其中pH5-eGFP表达出两个独立的目的蛋白,而且互相不影响各自的表达和细胞定位;pH6E则以融合形式表达两种目的蛋白,由于HA蛋白具有膜定位信号,所以融合蛋白主要定位于细胞膜上。本研究结果表明,双启动子表达质粒和双目的蛋白融合表达质粒适合用于构建AIV以及其他相关病原的双价DNA疫苗。     

棉花SSR-PCR过程中聚丙烯酰胺凝胶电泳操作常见问题的解决与优化

在大批量聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中,难免会出现条带空白、弯曲或者拖尾等各种异常现象。本文以棉花DNA为例,综述了多年实验操作中遇到的突发情况及解决方法,为广大科研工作者提供参考。     

海南中蜂微卫星DNA遗传多样性研究

本研究利用微卫星DNA方法对海南中蜂蜜蜂群体多态性进行研究,评估品种内的遗传变异。结果共检测到55个等位基因,平均每个位点的等位基因数为11,单个位点的等位基因数从8到13不等。所有位点的平均PIC值与平均期望杂合度分别为0.7569(0.0330)与0.8577(0.0267)。表明海南中蜂群体具有较高的多态性,显示出丰富的遗传多样性和较高的选择潜力,可为分析遗传多样性提供充分的信息。     

黄瓜种子DNA快速提取新方法及其在SSR检测种子纯度中的应用

研究快速提取黄瓜种子DNA的新方法,目的在于解决多年来无法快速提取黄瓜种子DNA进行种子纯度鉴定这一困扰业界的难题。结果表明:使用该法提取黄瓜种子DNA操作简便,只需简单捣碎,不需研磨,不用离心、沉淀,耗费低;同时不使用有毒试剂,对人体危害较小;提取速度较快。SSR分析结果表明,该法提取的DNA能够满足利用SSR进行种子纯度检测的目的,值得大力推广。     

SSR分子标记实验操作注意事项

SSR分子标记已经得到普遍应用,初学者如不能很好地掌握实验操作要点,就难以在较短时间内成功地获得试验结果.本文分别介绍了DNA提取、PCR扩增和电泳检测PCR扩增产物等实验过程中容易被忽视的注意事项,以期为普及SSR分子标记实验技术服务.     

规模猪场猪圆环病、蓝耳病和副猪嗜血杆菌病混合感染的综合控制措施

猪圆环病毒病（PCV）是圆环病毒科圆环病毒属成员，是迄今发现最小的动物DNA病毒，该病毒基因组为单股环状DNA，无囊膜，粒子呈20面体，对称，直径17～20nm。根据PCV的致病性、抗原性及核苷酸序列，PCV可分为PCVI（无致病性）和PCV2（有致病性）两种基因型。