猪干扰素-α表达质粒和多聚左旋氨基酸共聚物对PRRSV弱毒疫苗诱导产生中和抗体的影响

研究非病毒载体多聚左旋赖氨酸(PLL)与猪干扰素α(PIFNα)重组质粒的聚合物PLL-pVAX1-PIFNα对PRRSV弱毒疫苗诱导产生中和抗体的影响。本文首先构建了猪干扰素α真核表达质粒pVAX1-PIFNα,并将此重组质粒在293T细胞中转染,经Western blot验证PIFNα在细胞上清中分泌表达;将pVAX1-PIFNα与PLL以适当的比例聚合后,联合PRRSV弱毒疫苗免疫动物,应用ELISA抗体试剂盒检测PRRSV抗体的水平。结果表明:联合聚合物PLL-pVAX1-PIFNα注射免疫组的抗体水平明显高于其他各组,说明PLL与pVAX1-PIFNα表达质粒的聚合,显著提高了pVAX1-PIFNα表达质粒联合PRRSV弱毒疫苗免疫后诱导机体产生抗体的能力。     

猪α-干扰素表达系统及其应用的研究进展

就猪α-干扰素的分子特征、生物学特性、表达系统和猪基因工程α-干扰素的应用进行综述,以期为猪α-干扰素在广谱抗病毒活性、抗肿瘤以及免疫调节的临床应用提供参考。     

浅谈奶牛结核病净化关键技术的创新

正为促进奶牛结核病净化工作的开展,我们结合工作实践,针对一些净化关键技术进行了创新性研究。探索应用尾根注射结核菌素法、电推剪毛法和数显游标卡尺技术改进牛结核分枝杆菌变态反应的试验方法。通过引进先进的γ-干扰素试验技术,提高监测工作的特异性和时效性。同时,在阳性牛的扑杀和病死畜无害化处理方面进行了研究与探讨。上述措施不但有力地促进了奶牛结核病净化工作的开展,而且可以为其他地区净化工作的开展提供技术参考。牛结核病是一种由结核分枝杆菌引起的人畜共患慢性传染病。奶牛最易感,其次是水牛和黄牛。人也可     

贵州白香猪γ-干扰素真核表达质粒的构建

为了构建贵州白香猪γ-干扰素真核表达载体,试验以已构建的含有γ-干扰素基因的pMD-GZ-IFN-γ质粒为模版,利用特异性引物进行PCR扩增,得到大小为501 bp的γ-干扰素基因的开放阅读框,将所得IFN-γ基因克隆至经相同双酶切处理后的pcDNA3.1（＋）真核表达载体中,构建重组质粒pcDNA3.1（＋）-IFN-γ。测序结果表明：克隆至pcDNA3.1（＋）的基因序列为γ-干扰素序列,说明γ-干扰素基因真核表达载体构建成功。     

草鱼IFNa和IFNd重组蛋白表达、纯化及单克隆抗体制备

为系统研究草鱼I型干扰素的合成、分泌和免疫功能,本研究在大肠杆菌中表达并提纯了草鱼IFNa（CiIFNa）和IFNd（CiIFNd）重组蛋白。将CiIFNa和CiIFNd成熟肽分别克隆到pET-21d或pEHISTEVb表达载体上,并转化到大肠杆菌中;IPTG诱导表达得到CiIFNa和CiIFNd成熟肽的包涵体,经过盐酸胍变性、蛋白复性和浓缩后,利用AKTA分子筛层析获得了纯度较高的重组蛋白。用重组蛋白免疫小鼠,通过PEG法诱导得到杂交瘤细胞;将稳定分泌抗体的阳性细胞株的细胞悬液注射入小鼠腹腔,制备腹水抗体并进行纯化。本研究纯化了草鱼CiIFNa和CiIFNd各2株抗体,并采用SDS-PAGE、ELISA、Western blot和免疫荧光法对其进行了较全面的鉴定。研究结果表明CiIFNa和CiIFNd单克隆抗体特异性好、效价高,能够特异识别在大肠杆菌和真核细胞中表达的重组蛋白,且不存在CiIFNa和CiIFNd分子间的交叉识别。本研究制备的单克隆抗体为深入研究草鱼干扰素的细胞来源和蛋白表达规律奠定基础。     

乳猪专用猪白细胞干扰素（冻干型）防治乳猪疾病临床试验

采用四川世红生物技术有限公司研制的“乳猪专用猪白细胞干扰素”预防乳猪57头，无1头发病，而对照组乳猪56头，其中发病34头，死亡10头，预防给药可以降低乳猪发病率60．71％，死亡率降低17．86％。用“乳猪专用猪白细胞干扰素”治疗发病乳猪86头，治愈83头，治愈率达96．5％。结果表明，“乳猪专用猪白细胞干扰素”可有效预防和治疗乳猪疾病。     

禽类干扰素基因序列研究进展

干扰素是由培养的细胞或动物因病毒感染其他诱生剂作用下所产生的一类非特异性抗病毒物质.干扰素分为I型干扰素和Ⅱ型干扰素两类,I型干扰素包括IFN-α和IFN-β等,Ⅱ型干扰素又称免疫干扰素IFN-γ.干扰素是1957年Issacs首先发现、     

鸡γ-干扰素基因的克隆与鉴定

干扰素是动物机体内复杂的免疫网络中起调节作用的重要细胞因子之一.在体内广泛参与免疫调节及炎症反应等生物过程,具有十分重要的生理功能.目前已有一大批人和动物的干扰素基因被克隆.以重组干扰素作为免疫调节剂及基因治疗剂已显示出广泛的应用前景,成为重要的学科增长点之一.     

干扰素治疗婴幼儿秋季腹泻104例

目的:观察干扰素治疗秋季腹泻的临床疗效。方法:将医院儿科收治的儿童秋季腹泻患儿104例,随机分为治疗组和对照组各52例,两组除给予常规对症支持治疗外,治疗组加用α干扰素5万u/kg肌注,1次/d,连用3~4d,对照组给予利巴韦林治疗。结果:治疗组在发热、呕吐及止泻时间上与对照组比较,差异均有统计学意义(P0.05),治疗期间治疗组未见明显不良反应。结论:干扰素肌注治疗秋季腹泻疗效明显。     

外源性IFN-γ对植入前期妊娠大鼠下丘脑内IL-4阳性细胞的影响

为了解外源性IFN-γ对植入前期大鼠下丘脑内IL-4表达的影响,通过阴道口肌肉注射不同剂量IFN-γ后观察植入前期大鼠下丘脑内IL-4表达的变化,并且用免疫组织化学SP法对其检测。结果表明:在下丘脑的视前大细胞核(POMA)、视前内侧核(POM)、交叉上核(SO)、视上核(SC)、室旁核内侧部(PVM)和室周核(HPV)等处均有IL-4阳性细胞的表达分布;试验1组(注射IFN-γ25 000 IU)和试验2组(注射IFN-γ75 000 IU)各个核团中阳性细胞数与对照组相比较少而且差异显著(P<0.05),2个试验组相比,在部分核团中阳性细胞数试验1组高于试验2组,差异显著(P<0.05)。结果说明下丘脑内IL-4阳性细胞随着外源性IFN-γ剂量的增加而减少,从而说明外源性IFN-γ有可能会影响下丘脑中IL-4蛋白的表达分布。