副猪格拉瑟菌5型细胞致死性膨胀毒素CdtB破坏猪呼吸道上皮屏障的机制

旨在探究副猪格拉瑟菌(Glaesserella parasuis,GPS)突破猪呼吸道上皮屏障引起系统性感染的机制。通过超速离心和密度梯度离心提取副猪格拉瑟菌外膜囊泡(outer membrane vesicles, OMVs),OMVs经SDS-PAGE显示，蛋白质条带分布在55～100 ku,经透射电子显微镜(TEM)观察，OMVs的粒径在100～200 nm,纳米粒子直径分析(NTA)结果显示，样品在100～200 nm处的粒子数目最多。进而用制备的HbpA及OmpP2多克隆抗体对OMVs及不含OMVs的细菌上清进行Western blot验证，证实所提取的样品为外膜囊泡，且进一步结果证明细胞致死性膨胀毒素(CDT)在GPS培养物中主要以OMVs的形式存在。用OMVs或CdtB处理猪气管上皮细胞(swine tracheal epithelial cells, STEC)36 h,检测STEC中cleaved-caspase3、ZO-1和Occludin的蛋白表达水平，并用FITC-葡聚糖(FD-4)检测STEC单层细胞的细胞旁通透性。结果发现，OMVs与CdtB处理后凋亡相关蛋...     

鸡源A型产气荚膜梭菌致病性及药物疗效分析

本研究旨在调查规模化养鸡场内鸡源产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens，CP）的致病性和耐药性，并评价阿维拉霉素和磷酸泰乐菌素预防CP感染鸡群发生坏死性肠炎（necrotizing enteritis，NE）的效果，为鸡NE的防治提供指导。在河北、山西两地选择有CP引起NE发病史的规模化养鸡场，随机采集新鲜粪便，分离CP，并通过多重PCR测定其毒素型。选定3个不同养殖场分离到的A型CP，以10⁹CFU·只^-1的剂量，连续5 d经灌胃的方式感染14日龄SPF鸡，观察肠道病变和NE发生情况，评价分离菌株的致病力。使用微量肉汤稀释法测定分离到的CP对阿维拉霉素、林可霉素和磷酸泰乐菌素的最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration，MIC）。根据MIC结果，选择药物敏感性较好的两种药物对因CP引起NE发病的鸡群中未出现临床症状的鸡进行预防试验，观察精神食欲、腹泻症状、肠道病变情况，统计CP检出率和NE发生率，评价两种药物预防效果。结果显示：自753份鸡粪便样品分离到91株CP，且毒素型全部为A型。攻毒试验结果显示：A、B、C组攻毒组NE病变发生率均显著高于未攻毒组D组（P<0.05），攻毒组肠道病变评分均显著高于未攻毒组（P<0.05）。与未攻毒组相比，攻毒组出现明显的腹泻症状和肠道病变，差异显著（P<0.05），3株CP都可以引起鸡NE。MIC结果表明：阿维拉霉素、林可霉素和磷酸泰乐菌素的MIC范围分别是0.25～4、0.125～128和0.25～32 μg·mL^-1。药物疗效试验结果表明：通过拌料连续21 d给予阿维拉霉素预混剂，给药期间及停药后1周可保护鸡群，防止出现NE症状或防止病变恶化，显著降低NE发生率、NE病变评分以及CP检出率（P<0.05）。通过拌料连续7 d给予磷酸泰乐菌素预混剂，效果与阿维拉霉素预混剂相当，但停药14 d后，6只鸡（6/11）又出现NE症状。目前，河北、山西省部分规模化鸡养殖场内流行的CP多为A型，并且可以引起NE，同时，A型CP对阿维拉霉素和磷酸泰乐菌素仍较敏感，其预混剂用于发病鸡群的预防效果较好。     

江苏小麦赤霉病防控药剂有效性监测研究分析

通过田间试验,评价小麦赤霉病防控药剂的有效性,为植保部门提供药剂选择参考依据。采用‘镇麦12’、‘镇麦9号’为试验品种,以参试杀菌剂的登记最高剂量在小麦扬花期施药2次,最后一次施药25天后调查小麦赤霉病病情及籽粒中DON毒素含量,计算各杀菌剂对赤霉病防效。结果表明,当一个区域内小麦赤霉病菌对多菌灵抗性频率达50%以上时,多菌灵等药剂对赤霉病防效由90%下降到低于80%;当采用含有甲氧基丙烯酸脂类的药剂75%肟菌酯.戊唑醇SC防治赤霉病时,将会刺激DON毒素在小麦籽粒中的积累,毒素含量达到1.405 mg/L,高于对照处理0.598 mg/L。而且,通过有效性监测,初步明确了戊唑醇在本地区小麦赤霉病防治的最低有效用量为120 g/hm²。对防治农药进行有效性监测是小麦赤霉病有效防控的重要保障机制。     

羊梭菌病多联灭活疫苗生产用厌氧培养基的研究

通过多次培养试验,研制成功了新的厌氧培养基.该培养基用于羊梭菌病多联灭活疫苗中的产气荚膜梭菌(B型、D型)和腐败梭菌的培养,细菌的产毒能力和免疫原性均达到了<中华人民共和国兽用生物制品规程>(简称<规程>)的要求,配制的疫苗成品检验全部合格.该培养基与<规程>提供的肉肝胃酶消化汤培养基相比,配制方法简单,节约人力和时间,所用试剂均可从市场购买,所需原料成本低廉,仅为肉肝胃酶消化汤培养基的21%～27%.     

抗昆虫蝎毒素及其在植物遗传转化中的研究进展

本文对抗昆虫蝎毒素的来源、种类、作用机理及其在植物遗传转化方面的研究现状做一简要介绍,并对其在植物遗传转化方面所面临的主要问题进行了探讨,为更好地利用抗昆虫蝎毒素基因提高植物抗虫性提供参考。     

利用组织培养技术筛选辣椒抗疫病变异体

选用“2001”,“2056”,“2031”3个辣椒品种作为试材,以其子叶作为外植体诱导愈伤组织,以辣椒疫病病原菌培养滤液制取粗毒素作为筛选剂,筛选辣椒抗疫病细胞变异系。结果表明,辣椒疫病病原菌粗毒素对辣椒子叶愈伤组织的诱导、生长及不定芽的分化具有显著的抑制作用,抑制作用随着粗毒素浓度的增加而增加,且不同辣椒品种愈伤组织对毒素的忍耐力不同。     

致病性尖孢镰刀菌毒力因子的研究进展

致病性尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)侵染植物引发的植物枯萎病是世界范围内广泛存在的毁灭性土传真菌病害,目前该菌已被列为世界上第五大植物病原真菌。由于病原菌通过土壤传播,其致病机理尚未完全明确,而充分了解尖孢镰刀菌的致病机制是对抗这种疾病的先决条件。为了更好的研究和实施有效控制策略从而限制宿主植物感染,本文归纳了尖孢镰刀菌的致病机理,总结了毒力因子中的细胞壁降解酶、毒素、信号传导途径（MAPK通路）对致病进程的影响,分析了毒力基因及转录因子在感染过程中的调控机理。以期能为防控尖孢镰刀菌引起的枯萎病提供作用靶点和理论依据。