重组酵母菌N6076代谢产物中红色组分的制备及其GC-MS检测

[目的]探讨重组异常汉逊酵母菌N6076次生代谢产物中红色组分的制备及其GC-MS检测方法。[方法]应用薄层层析色谱方法大量制备重组异常汉逊酵母菌N6076次生代谢产物中的红色组分,通过无水乙醇溶解、GC-MS检测以及化合物结构比对,分析其类别。[结果]该红色组分为醌类化合物,在WILEY、Nist和Nbs化合物库中均未发现与其结构完全相同的化合物。[结论]该研究为所得红色组分的NMR结构鉴定及结构与生物学效应关系的研究奠定了基础。     

中草药饲料添加剂中阿魏酸的薄层色谱鉴别

用薄层色谱法分离并鉴别了中草药饲料添加剂中阿魏酸,建立了该制剂中阿魏酸分离及定性的色谱方法。该方法简单快速,灵敏度高,重现性好,结果可靠,可作为该制剂的质量控制标准。     

Asia Ⅰ型口蹄疫病毒VP1基因和牛α-干扰素基因的融合表达

将Asia Ⅰ型口蹄疫病毒YNBS／58株VP1基因和去信号肽的牛α-干扰素基因共同亚克隆于原核表达载体pET-28a中，转化BL21后经IPTG诱导，实现了重组融合蛋白VP1-BoIFN—α-在大肠埃希氏茵BL21中的高效表达，表达产物经SDS—PAGE和western-blotting分析，重组的VP1-BoIFN—α蛋白分子质量约为46ku，与预期大小相符。薄层扫描分析显示，重组蛋白VP1-BoIFN—α的表达量占茵体总蛋白的30％，且以包涵体的形式存在。包涵体提取物用8mol／L尿素溶解后，在变性条件下利用Ni—NTA柱对VP1-BoIFN—α-融合蛋白进行了纯化。     

饲料中磺胺类药物的薄层色谱检测方法

建立饲料中磺胺类药物(磺胺二甲基嘧啶和磺胺间甲氧嘧啶)多残留检测的薄层色谱法。用二氯甲烷提取饲料样品中的药物,离心后将提取液蒸干。采用高效硅胶G板为固定相,以氯仿与叔丁醇比例85∶15为展开剂,喷以0.01%荧光胺,置紫外灯(365nm)下检视。2种药物分离良好,斑点显色清晰且无干扰。回收率约为60%,检出限为0.05μg/mL。     

磺胺甲恶唑单克隆抗体的研制

常用的磺胺类药物有十几种，磺胺甲恶唑（Sulfamethoxazole，SMX）是其中一种。近年来磺胺类药物不合理应用带来其不良后果，造成耐药菌株增加，动物性食品中磺胺类药物的残留，以及可能对人们的健康造成潜在的危害等，由此已引起了国内外的高度重视。因此对磺胺类药物残留的检测日显其重要。目前检测磺胺类药物残留的化学方法有高效液相色谱法、薄层色谱法和气相色谱法等，这些方法虽然灵敏、准确，但检测时间长、耗资大、对人员要求高，不适合大量样品的筛选测定。     

出血性大肠杆菌O157eae-stx1/2B融合基因的构建和表达

构建表达eae和stx1／2B的融合基因，克隆eae基因的C端280个氨基酸残基(Int280)基因部分，以正确地阅读框定向插入到含有stx1／2B融合基因的质粒，构建重组质粒，将其转化于BL21(DE3)，用IPTG进行诱导表达，经SDS—PAGE电泳检测，该融合蛋白获得了高效表达。薄层扫描分析表明：目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的50．67％。由于该融合蛋白由eae、stx1B、stx2B等三部分抗原组成，可刺激机体产生针对紧密素和StxB的抗体，在EHEC O157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值。     

稻谷动平衡含水率试验研究

针对华南地区高湿稻谷，试验研究了稻谷的薄层干燥特性，根据薄层干燥特性曲线，得到稻谷的动平衡含水率，并用Bala模型较好地拟合了试验数据。     

佛手的薄层色谱鉴别

为鉴别福建、广东、四川、浙江金华4种不同产地佛手果化学成分的异同，应用薄层色谱分别对其佛手醇的提取物和挥发油进行了定性分析。结果表明，在环己烷－乙酸乙酯（75：25）的展开系统，4种佛手醇的薄层色谱显示斑点不相一致；在苯－乙酸乙酯（9．6：0．4）的展开系统，佛手挥发油的薄层色谱显示4种佛手挥发油的成发也不相一致。     

野生果蔬罐头中微生物污染的薄层色谱法测定

用薄层色谱法（TLC）测定已受到微生物污染的野生果蔬罐头，并与常规的微生物镜检测定法、微生物菌种培养法和pH值定法进行了比较。结果表明，用TLC测定比常规测定法的结果准确。同时，比微生物菌种培养法快速，在2h内即可测得结果；比pH值测定和微生物镜检测定法简便。     

利用薄层细胞培养技术建立‘铺地金’等菊花高效再生体系的研究

以菊花品种‘铺地金’和‘七月桃花’的幼嫩茎段为外植体，从基部至茎尖依次横向切成0．3～O．5mm的薄层，放在添加不同浓度6-BA、NAA的MS培养基上，进行不定芽的诱导，研究不同激素组合和不同薄层部位对不定芽再生的影响，分别以蔗糖和果糖为碳源，考察碳源种类和浓度对玻璃化的影响。结果表明，适宜于‘铺地金’诱导不定芽再生的最佳培养基为MS＋2mg／LBA＋0．5mg／LNAA，再生率达到96．4％，适合于‘七月桃花’诱导不定芽再生的培养基为MS＋2mg／LBA＋0．1mg／LNAA时，不定芽再生率可高达97．9％，适当提高蔗糖浓度可以有效减少薄层组培中的玻璃化现象，而高浓度的果糖会对外植体产生毒害作用。