间接酶免疫组化检测DPV在感染鸭体内细胞定位的研究和应用

以超速离心浓缩结合蔗糖密度梯度离心法提纯的鸭瘟病毒（DPV）作为抗原免疫家兔制备兔抗DPV血清,用饱和硫酸铵沉淀结合DEAE-Sephedax-A-50离子交换柱层析提纯兔抗DPV IgG,建立了检测甲醛固定鸭体组织石蜡切片上DPV抗原的间接酶免疫组化法。该法能特异地检测出DPV感染鸭组织中的DPV而对鸭疫里默氏菌、鸭源多杀性巴氏杆菌（5∶A）、鸭源大肠杆菌（O1）感染致死的鸭组织以及正常鸭组织呈阴性反应,检测DPV感染死亡鸭的肝、十二指肠、脑、脾和胸腺的结果与PCR检测结果相同。其敏感性高于原位杂交。对DPV CH强毒株人工感染致死鸭的检测结果表明,该法可特异检测到肝、肺、肾、脑、十二指肠、空肠、回肠、直肠、法氏囊、脾脏、腺胃以及食管中的DPV。DPV主要分布于这些器官的上皮细胞和巨噬细胞。对1992-2004年经10%福尔马林保存的鸭瘟临床病例的肝脏检测结果均为阳性。该法可用于DPV感染鸭的诊断和定位检测,也可用于对甲醛固定组织进行回顾性诊断检测。     

黄曲霉毒素及其检测方法的研究进展

黄曲霉毒素(aflatoxin,AFT)是一组具有强毒性和致癌性的次级真菌代谢产物,全球性污染粮食及其制品,给人类的健康造成严重的威胁.据世界粮农组织(FAO)报告,全球每年约有2%的农作物因污染严重而失去营养和经济价值.近年进出口商品中均有黄曲霉毒素超标现象,因此黄曲霉毒素已经成为出入境农产品安全卫生检验的重要对象.现就黄曲霉毒素及其检测方法的研究进展等加以讨论.     

分子伴侣在病毒感染中的作用

随着蛋白质研究技术的不断发展，数以百种的蛋白质三维结构已研究得较为清楚，但对于这些蛋白质折叠成天然构象的途径和机制所知甚少。通常认为蛋白质的一级结构决定了蛋白质的三级和四级结构，但近年来研究表明，在很多蛋白质的折叠与装配过程中，有其他蛋白质或酶的参与，其中分子伴侣就是目前研究得最多、最热的一种。病毒是细胞内寄生物，分子伴侣与病毒的增殖过程密切相关，从病毒基因组复制的起始、转录的进行、翻译的完成到病毒粒子的装配成熟．甚至病毒成分在宿主体内的转运都有分子伴侣的参与。随着病毒与分子伴侣相互关系研究的深入，产生了抗病毒的又一个可能的途径。     

麻鸭α干扰素基因的克隆与序列分析

根据GenBank文献，应用Oligo6．0分析软件设计合成了用于扩增鸭Ⅰ型干扰素（α—IFN）基因的2对引物。以麻鸭肝脏提取的基因组DNA为模板，采用Nest—PCR方法扩增获得了约600bp片段，经T载体克隆和测序分析证实，是麻鸭Ⅰ型干扰素基因（SDIFN—α）。生物信息学分析表明，SDIFN—α的开放阅读框架（ORF）由576个核苷酸所组成，预测蛋白质相对分子质量为21640，编码191个氨基酸。其中前28个氨基酸可能是信号肽部分，切割位点在28号氨基酸A和29号氨基酸S之间，序列中无内含子。成熟的多肽中含8个半胱氨酸和2个糖基化位点，2个蛋白激酶C磷酸化位点（protein kinase C phosphorylation site）和2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点（casein kinase Ⅱ phosphorylation site）。SDIFN—α与鸭α—IFN基因核苷酸同源性为99．3％。有4个碱基的差异；与北京鸭α—IFN基因的核苷酸同源性为99．1％，氨基酸同源性为98．96％；与鸡α—IFN的核苷酸同源性为71．8％。与鹅、狗、牛、马和人的α—IFN基因的核苷酸同源性分别为96．0％、45．8％、45．5％、44．6％和41．7％。遗传进化分析结果表明，IFN—α的这些同源性与其动物分类地位相一致。     

我国目前禽病动态和防制对策（上）

自我国改革开放以来,养禽业连续 20年持续稳步增长,取得举世瞩目的成就,成为世界养禽大国。据联合国粮农组织提供的统计数据, 1980－ 1988年禽 (鸡 )肉产量由 1980年的 112万吨增加到 1998年的 774万吨,占世界产量的 15％,仅次于美国,居世界第二位。年平均递增 11％。禽 (鸡 )肉人均占有量由 1kg增加到 6kg,已接近 8.6kg的世界平均水平。 　　1980－ 1998年我国禽蛋总产从 293万吨增加到 2220万吨,占世界总产量的 42％,居世界首位;年平均递增 12％,远高于世界禽蛋 4％的增长速度;人均禽蛋占有量由 3kg增加到 18kg,已超过 9kg…     

囊膜糖蛋白gE对α疱疹病毒毒力的影响

近年来，α疱疹病毒的囊膜糖蛋白gE在病毒细胞间传递、神经系统入侵、免疫逃避等方面的研究取得新的进展。gE能促进合胞体形成，影响病毒的顺行、逆行神经传导，也是第一个报道可以抑制浆细胞样树突状细胞产生Ⅰ型干扰素的病毒蛋白。本文对α疱疹病毒囊膜糖蛋白gE与毒力之间的关系进行阐述，以期为α疱疹病毒gE的功能研究提供参考。     

鸭源致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛pilA基因序列测定及生物信息学分析

据GenBank中人源大肠杆菌pilA基因序列,由Oligo 6.0设计一对引物,以提取的鸭源致病性大肠杆菌基因组为模板,进行PCR扩增,获得了5株鸭源致病性大肠杆菌的pilA基因,序列测定和生物信息学分析表明:鸭源致病性大肠杆菌pilA基因核苷酸序列长度为549 bp,编码182aa,与人源、鸡源及猪源大肠杆菌pilA基因之间核苷酸同源性为87.3%~100.0%,氨基酸同源性为87.5%~100.0%。对不同宿主来源大肠杆菌pilA基因所编码蛋白的二级结构、亲水性、抗原性、抗原表位进行预测分析比较,结果显示Ⅰ型菌毛间具有一定的结构相似性,并存在一定的共同抗原位点;系统进化分析表明,各菌株之间的pilA基因遗传相关性与其宿主来源及血清型之间没有严格的相关性。     

绵阳地区猪源致病性大肠杆菌的耐药性监测

从四川省绵阳地区12个猪场患病仔猪病料中共分离到28株细菌。经生化鉴定和动物试验确定其中12株为致病性埃希氏大肠杆菌。药物敏感性试验表明,分离的大肠杆菌对氧氟沙星、头孢噻肟、环丙沙星、头孢拉定等敏感,对青霉素、链霉素、四环素、红霉素、庆大霉素、氨苄西林等出现不同程度的耐药性,其中耐药率较高的是青霉素(100%)、红霉素(100%)、四环素(100%)、庆大霉素(91.67%)、氨苄西林(91.67%)、链霉素(83.33%),而敏感性较高的有氧氟沙星(58.33%)、头孢噻肟(50.00%)。且菌株普遍呈多重耐药性,以7~9耐为主。     

病毒的锌指蛋白在病毒感染中的作用

锌指（zinc fingers,ZF）结构是一种广泛存在于动植物、微生物包括许多病毒中的蛋白结构,肽链中氨基酸残基的特征基团与Zn²⁺结合从而稳定形成一种很短的、可自我折叠成“手指”形状的多肽空间构型。具有ZF结构的蛋白被称为锌指蛋白（zinc-finger protein,ZNF）,研究发现,部分病毒可以编码具有ZF结构的蛋白且该蛋白会影响到病毒的复制、成熟病毒粒子的包装释放、调节激活病毒转录和裂解性感染及协助病毒的先天免疫逃逸等。本文就目前病毒的ZNF在病毒感染过程中发挥作用的研究进展作一综述,为ZNF的深入研究及以ZNF为靶位点的抗病毒药物研制提供参考。     

天府肉鸭IFN-α基因的密码子使用法特征分析

密码子简并性特征造成了不同物种密码子使用的偏好性不同,这对外源基因的表达强度有着较大的影响。运用软件对选取的16种IFN-α和天府肉鸭IFN-α基因（EU925650）进行了密码子偏爱性分析。通过进化树的构建结果显示天府肉鸭IFN-α,与北京鸭、河南肉鸭以及绍兴鸭IFN-α的亲缘关系最为接近。通过CAI,ENC,GC3S等数据分析进行了密码子偏爱性特征的分析。结果显示,天府肉鸭IFN-α系统保守基因,与禽类IFN-α基因的密码子使用类似。