分子生物学技术在猪瘟野毒与兔化弱毒鉴别诊断方法中的研究进展

综述了分子生物学技术在猪瘟野毒与兔化弱毒鉴别诊断的4种方法(RT-PCR方法、荧光定量RT-PCR方法、RT-PCR与RFLP相结合方法、环介导等温扩增方法)的研究进展,对猪瘟的净化和防控有一定的参考价值。     

发展生态农业,促进喀斯特地区农民增收

本文结合贵州的地理、生态和经济现状．阐述了贵州喀斯特地区农村、农民的现状及存在的主要问题，并提出了相应的解决措施和对策。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒SDZP P126株GP2基因序列分析及其对病毒增殖的影响

旨在研究1株连续传代的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) SDZP P126 GP2基因的变异情况,以及GP2对病毒增殖的影响。构建GP2基因全长真核载体pEGFP-N1-GP2,利用生物学软件对GP2基因进行核苷酸和氨基酸的同源性分析,并将重组质粒pEGFP-N1-GP2转染到Marc-145细胞上,接毒后检测对病毒增殖的影响。通过GP2基因核苷酸和氨基酸的同源性分析,发现9个碱基的突变,这9个碱基的突变导致了5个氨基酸的突变。其中氨基酸序列中的第10位由亮氨酸突变为苯丙氨酸,这一突变在多株致弱毒株中存在,在Marc-145细胞转染重组质粒pEGFP-N1-GP2对病毒的增殖无显著影响。初步推断SDZP P126 GP2基因的突变对病毒在Marc-145细胞上增殖没有影响。     

某猪场爆发高致病性猪繁殖与呼吸综合征的诊断

2007年6月份,某猪场爆发一起以高热、高发病率和高死亡率为特征的传染性疾病,临诊症状主要表现为高烧、皮肤发红、怀孕母猪流产,剖检主要特征是间质性肺炎。经过病原分离,获得一株能够引起Marc-145细胞发生病变的病毒。进一步通过血清中和试验、血凝试验、RT-PCR,确定此次分离的病毒为高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒。综合该病的流行病学特征、临床症状、剖检病理变化以及实验室检验,确诊该病为高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的猪繁殖与呼吸综合征。     

真空和面对面条面团谷蛋白大聚合体含量及粒度分布的影响

明确真空和面对低水分面条面团中谷蛋白大聚合体(glutenin macropolymer,GMP)特性的影响,有助于探讨真空和面改善面条质地的化学结构基础,该研究以3个小麦品种(郑麦366、宁春4号、济麦22)磨制的面粉为材料,在不同真空度(0、0.06、0.08 MPa)下和面,和面时间为8 min,测定面团中GMP含量及粒度分布,并采用Ellman试剂比色法分析蛋白质和GMP中游离巯基含量的变化。结果表明,与非真空和面相比,0.06 MPa制作的面团中GMP含量较高,而过高的真空度(0.08 MPa)会导致GMP含量降低。真空和面对面团中GMP粒度分布有显著影响,济麦22和宁春4号面团在0.06 MPa时大粒径GMP所占体积、表面积和数目百分比显著高于0和0.08 MPa(P0.05),而郑麦366在0.08 MPa时大粒径GMP所占体积百分比显著较高。真空度为0.06 MPa时,济麦22和宁春4号面团中的游离巯基含量显著低于0和0.08 MPa(P0.05);而对于郑麦366,0.08 MPa制作的面团中游离巯基含量显著低于非真空和面。对于2种中筋小麦粉(济麦22和宁春4号),适宜真空度和面会使GMP中更多的游离巯基参与二硫键交联。结论认为,适宜真空度和面可以提高面团中蛋白质聚合度;与蛋白质和湿面筋含量高、面团强度大的郑麦366相比,2种中筋小麦粉面团中GMP特性受真空度变化的影响更明显。研究结果为揭示真空和面的作用机制、深入认识面筋蛋白在面条加工中的作用提供参考。     

三仁汤复方中药制剂对PRRSV体外抑制作用的研究

为了寻找有效预防和治疗猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）的中草药,以 Marc 145细胞为模型,采用细胞病变（CPE）抑制试验和MTT法测定细胞活力,评价三仁汤复方中药制剂的活性成分在体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的作用,并通过改变药物作用方式,初步探讨复方中药制剂的抗病毒机制。结果显示,三仁汤复方中药制剂对 Marc 145细胞的最大安全质量浓度为125 g／L,在体外对PRRSV直接灭活的最小质量浓度为15．625 g／L,抑制作用的最小质量浓度为31．25 g／L,吸附阻断作用的最小质量浓度为125 g／L,其对PRRSV的灭活作用明显优于抑制作用和吸附阻断作用,吸附阻断作用最弱。表明,在安全质量浓度范围内,三仁汤中药复方制剂在体外有显著的抗PRRSV作用,可以作为预防及治疗PRRS的药物。     

PRRSV HN25株ORF5基因的克隆和重组腺病毒的构建

克隆PRRSV HN25株ORF5基因,测序并进行序列分析。结果显示ORF5基因编码区长603bp,编码200个氨基酸,与国内外VR-2332株、LV株和CH-1a株ORF5基因的核酸序列同源性分别为99.0%,63.8%和91.4%,而推导的氨基酸序列同源性分别为98.0%,58.8%和90.5%。构建含ORF5基因的重组腺病毒穿梭质粒,PmeI酶切线性化后,转化含有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,同源重组后筛选重组腺病毒质粒,经PacI酶切后转染293A细胞进行包装,获得重组腺病毒。通过PCR鉴定重组腺病毒含有ORF5基因,Western blot检测的结果表明PRRSV ORF5基因在293A细胞内获得表达。     

冀南地区小麦籽粒品质现状及利用潜力分析

为了明确冀南地区大田小麦籽粒质量现状及食品加工利用潜力,本研究以2013-2016年冀南地区10个小麦主产县抽取的360份农户大田小麦籽粒样品为试验材料,参照国家标准,分析了小麦籽粒质量性状。结果表明, 2013-2016年冀南地区大田小麦籽粒容重平均值为817±20 g·L^-1,籽粒蛋白含量平均值为14.4%±1.0%,籽粒湿面筋含量平均值为29.3%±2.5%,稳定时间平均值为7.0±9.4 min。冀南地区大田小麦整体水平达到中强筋小麦水平。除气候、栽培条件以外,小麦品种年际变化是造成该区域小麦籽粒质量变化的主要原因。湿面筋含量较低、稳定时间较短是冀南地区大田强筋小麦优质率较低的主要因素。冀南地区大田小麦可以较好地满足传统中式食品（面条、馒头、饺子）的生产需求。     

家兔与BALB/c小鼠对猪瘟病毒E2蛋白靶向化树突状细胞疫苗敏感性的比较

为比较家兔与BALB/c小鼠对猪瘟病毒E2蛋白靶向化树突状细胞疫苗的敏感性,本研究首先根据小鼠与家兔体重比,分别免疫糖基化E2蛋白与E2蛋白（家兔2 mg/只,小鼠20 μg/只）,在不同时间采血制备血清,通过ELISA方法测定血清中IgG水平。结果显示,接种后BALB/c小鼠出现了轻度的免疫应答,而家兔产生了强而持久的免疫保护。本研究对BALB/c小鼠的接种量进行了进一步摸索,结果表明,50与100 μg/只免疫效果明显优于20 μg/只;其中50 μg/只E2蛋白与糖基化E2蛋白免疫后,血清IgG水平较高且稳定;而100 μg/只糖基化E2蛋白免疫后,免疫初期,糖基化E2蛋白组产生了免疫抑制,至21 d抗体水平逐渐升高且达极高水平;但100 μg/只E2蛋白免疫后,整个免疫期内抗体水平均较低,只有轻微波动。以上结果表明,家兔对糖基化E2蛋白与E2蛋白的敏感性均显著高于BALB/c小鼠,且糖基化E2蛋白免疫效果明显好于E2蛋白,BALB/c小鼠的糖基化E2蛋白最佳免疫剂量为50 μg/只。     

土壤水分和植株密度互作对紫花苜蓿植株性状和叶片特征的影响

适宜的土壤含水量和植株密度是栽培草地管理的关键因子.本研究采用盆栽试验分析了不同土壤水分(85％～90％、75％～80％、60％～65％、35％～40％的土壤饱和含水量)和植株密度(10、15、20株·盆?1)互作对紫花苜蓿(Medicago sativa)植株性状和叶片特征的影响.结果表明,紫花苜蓿株高、分枝数、根颈...