三仁汤复方中药制剂对PRRSV体外抑制作用的研究

为了寻找有效预防和治疗猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）的中草药,以 Marc 145细胞为模型,采用细胞病变（CPE）抑制试验和MTT法测定细胞活力,评价三仁汤复方中药制剂的活性成分在体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的作用,并通过改变药物作用方式,初步探讨复方中药制剂的抗病毒机制。结果显示,三仁汤复方中药制剂对 Marc 145细胞的最大安全质量浓度为125 g／L,在体外对PRRSV直接灭活的最小质量浓度为15．625 g／L,抑制作用的最小质量浓度为31．25 g／L,吸附阻断作用的最小质量浓度为125 g／L,其对PRRSV的灭活作用明显优于抑制作用和吸附阻断作用,吸附阻断作用最弱。表明,在安全质量浓度范围内,三仁汤中药复方制剂在体外有显著的抗PRRSV作用,可以作为预防及治疗PRRS的药物。     

绵羊肺腺瘤病毒SYBRGreenI实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

根据GenBank登录的绵羊肺腺瘤病毒gag基因序列设计1对特异性引物，经RT—PCR扩增出了276bp的片段。产物经回收与pMD18-TVector连接后转化到基因工程菌DH5a中，提取重组质粒，经PCR及测序鉴定后，作为阳性模板建立SYBRGreenI荧光定量PCR标准曲线，并做敏感性试验、特异性试验、重复性试验和临床检测应用。结果表明，标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系，产物Tm在82～82．5℃之间，灵敏度为2．22个拷贝／μL，特异性和重复性较好，较常规RT—PCR方法提前1h出检测结果。本试验建立了检测JSRV的SYBR—GreenI荧光定量PCR方法，为该病的早期快速诊断，并定量分析JSRV感染程度奠定了基础。     

胞内劳森氏菌PCR检测方法的建立与应用

为建立一种适用于临床检测胞内劳森氏茵(Lawsonia intracellularis,LI)的检测方法,本研究通过比较提取粪便样品基因组DNA的不同方法,结合PCR方法特异性扩增aspA基因检测临床样品中的LI.敏感性试验表明,阳性样本最低检出量为1.7×102 copie/μL;特异性试验表明,该方法对大肠杆菌、沙...     

PRRSV经典与高致病性毒株RT-PCR鉴别检测方法的建立

根据GenBank登录的经典与高致病性PRRSVNsp2序列,设计了1对引物,所扩增的序列包含高致病性毒株缺失部分,用于区分经典与高致病性毒株,并对扩增条件进行了优化。结果表明,应用该方法,能从经典与高致病性PRRSV基因组中分别扩增出573,483bp的特异性片段,病毒基因组混合后能够同时扩增;并可以检测出1.8TCID50/100μL经典毒株及0.6TCID50/100μL高致病毒株的病毒RNA;对CSFV,JPV,PEDV,TGEV,RV,PPV,PRV,PCV-2等常见猪病毒病病原的鉴别诊断均为阴性;对分离的8株PRRSV进行检测,3株为经典毒株,5株为高致病毒株;对采集的59份确诊病料进行了检测,21份为经典毒株感染,38份为高致病毒株感染。本研究建立的RT-PCR诊断方法,具有特异、灵敏、快速等特点,可用于区分PRRSV经典与高致病毒株。     

10例犬乳头状瘤的临床诊断与治疗体会

犬乳头状瘤在临床中并不多见,但近年来有增多的趋势.其发生经常引起动物的不适与躁动不安,同时也给主人带来一定的心理压力,本病多是由犬乳头状瘤病毒引起的接触性传染病,是一种良性肿瘤性疾病.     

“中粮系”蒙牛触动了国际巨头的痛处？

7月7日，中国最大的粮油食品企业中粮集团联手厚朴基金以港币每股17．6元的价格投资61亿港币收购了蒙牛乳业20%的股权。这笔迄今中国食品行业最大宗交易的落幕，标志着蒙牛乳业从此融入国资家族。     

国外猪增生性肠炎诊断方法研究进展

猪增生性肠炎（Porcine Proliferative Enteritis，PPE）在全球大部分国家的养猪地区均有分布，是影响养猪业的世界性疾病之一。感染猪发病时临床表现大多不明显或缺乏特异性，使得该病的诊断出现一定难度。国外曾先后建立多种检测技术，用病理剖检、组织染色、免疫组化等方法检测肠损伤情况，用酶联免疫吸附试验（ELISA）、间接免疫荧光抗体试验、免疫过氧化物酶单层试验等方法检测血清中胞内劳森菌抗体水平，用PCR等方法直接检测粪便中病原。以上方法根据其不同特点适用干不同场合的诊断。目前对ELISA和PCR方法的研究有较大进展，已有大量临床应用方面的报道。     

发展生态农业,促进喀斯特地区农民增收

本文结合贵州的地理、生态和经济现状．阐述了贵州喀斯特地区农村、农民的现状及存在的主要问题，并提出了相应的解决措施和对策。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒SDZP P126株GP2基因序列分析及其对病毒增殖的影响

旨在研究1株连续传代的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) SDZP P126 GP2基因的变异情况,以及GP2对病毒增殖的影响。构建GP2基因全长真核载体pEGFP-N1-GP2,利用生物学软件对GP2基因进行核苷酸和氨基酸的同源性分析,并将重组质粒pEGFP-N1-GP2转染到Marc-145细胞上,接毒后检测对病毒增殖的影响。通过GP2基因核苷酸和氨基酸的同源性分析,发现9个碱基的突变,这9个碱基的突变导致了5个氨基酸的突变。其中氨基酸序列中的第10位由亮氨酸突变为苯丙氨酸,这一突变在多株致弱毒株中存在,在Marc-145细胞转染重组质粒pEGFP-N1-GP2对病毒的增殖无显著影响。初步推断SDZP P126 GP2基因的突变对病毒在Marc-145细胞上增殖没有影响。