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81.
皱纹盘鲍内脏酶的酶学性质及褐藻胶裂解酶的分离纯化 总被引:6,自引:0,他引:6
采用(NH4)2SO4分段盐析、透析、阴离子(DEAE-52)交换柱层析、SephadexG-200凝胶柱层析等分离纯化技术,通过SDS-PAGE电泳分析了皱纹盘鲍内脏酶的组成,结果表明鲍内脏酶主要含有两种褐藻胶裂解酶Ⅰ, Ⅱ,一种纤维素酶,一种琼脂酶。对酶的酶学性质分析结果表明两种褐藻胶裂解酶Ⅰ, Ⅱ的最适pH分别为8.6, 7.2,最适温度为35 ℃,分子量分别为35.2 ku, 67 ku;两种褐藻胶裂解酶的热稳定性比较差,且易受金属离子影响;纤维素酶的最适pH为5.0,最适温度为40 ℃。并确定了皱纹盘鲍内脏酶分离纯化的方法及参数,为进一步研究鲍内脏复合酶的性能提供了基础参数。图14表3参12
关键词:皱纹盘鲍; 褐藻胶裂解酶; 纤维素酶; 纯化
E-mail:wqk320@dlfu.edu.cn 相似文献
82.
利用DEAE-Sepharose FF离子交换和Sephacryl S-200 HR及Superdex 200 10/300 GL分子筛层析技术,从鳙鳃组织中分离纯化到一种岩藻糖专一的凝集素,命名为GANL.在还原SDS-PAGE电泳上显示单一蛋白染色带,其亚基相对分子质量为37 kD.经Superdex 200凝胶过滤层析测得其天然相对分子质量为220 kD.GANL的中性糖含量为13.4%.因此,GANL作为一种由相同亚基组成多亚基糖蛋白.GANL对兔红细胞有专一的凝集活性,其凝集活性不依赖Ca~(2+).在被测的单糖、双糖及糖蛋白中,仅岩藻糖能抑制其凝集活性.氨基酸分析表明GANL的Asp、Glu、Leu、Val、Lys的含量较高,Cys-S的含量为0.81%.GANL的最适pH为8~9;具有很高的热稳定性,最适温度为50 ℃. 相似文献
83.
通过(NH4)2SO4沉淀、Phenyl Sepharose FF疏水层析分离纯化香菇中的γ-谷氨酰转肽酶(γ-Glutamyltranspeptidase,GGT),纯化后的GGT的比活力到达了19.59 U/mg.SDS-PAGE分析表明,GGT由分子量分别为28 kDa和60 kDa的两个亚基组成.酶学性质试验结果表明,GGT反应的最适温度为37 ℃,最适pH 值为7.6;金属离子Na+、K+和Ca2+对酶有激活作用,而Ag+、Cu2+、Zn2+和Fe3+则有抑制作用;试验范围内,GGT水解γ-glutamyl-p-nitroanilide的米氏动力学参数Km 值为2.601 μmol/mL,Vmax值为0.0287 μmol/min;组成的氨基酸中,Glu和Asp含量较高,Met和Cys含量较低. 相似文献
84.
溴过氧化物酶(BrPOD)是具有特殊功能的过氧化物酶,海藻是其主要来源。对几种中国海域的红藻如角叉菜(Chondrus ocellatus)、龙须菜(Gracilaria sjoestedtii)、珊瑚藻(Corallina officinalis)进行了溴过氧化物酶的藻种筛选,并对酶活较高的珊瑚藻进行溴过氧化物酶分离纯化及性质的研究。通过硫酸铵沉淀、DEAE-cellulose 52离子交换层析、Sephadex G-100凝胶层析等方法,从珊瑚藻中分离得到溴过氧化物酶。对该酶性质研究表明,该酶分子量较大,表观分子量为64 kD;溴化单氯甲酮的最适pH值为6.0;pH在5.0-9.0时酶活性稳定;在30-70℃温度范围内酶活性稳定;Ca2 、Co2 、Cu2 、Mn2 、NaF和EDTA等化合物使溴过氧化物酶活性下降,钒酸盐能提高酶活性。反应动力学实验表明,该酶对Br-、H2O2的Km分别为7.40 mmol/L和96.09μmol/L。 相似文献
85.
【目的】纯化获取卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)JAK3(TroJAK3)重组蛋白,为了解TroJAK3蛋白功能、相互作用及抗体制备奠定基础。【方法】应用分子生物学技术构建重组质粒pET-32a-TroJAK3,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot检测TroJAK3重组蛋白表达情况。【结果】PCR扩增片段长度为3 333 bp,经双酶切鉴定、测序确认序列和开放阅读框正确,结果显示成功构建重组质粒pET-32a-TroJAK3。经终浓度为1 mmol/L IPTG 37℃诱导4 h后进行SDS-PAGE检测,结果表明TroJAK3重组蛋白以包涵体形式大量表达,分子量约为140 ku。经Ni-IDA树脂柱纯化,获得纯化的重组蛋白。Western blot检测结果显示有140 ku的条带,表明TroJAK3重组蛋白能被抗His抗体识别。【结论】成功构建了重组质粒pET-32a-TroJAK3,纯化得到高纯度的TroJAK3融合蛋白。 相似文献
86.
87.
Purification and characterization of two anionic trypsins from the hepatopancreas of carp 总被引:8,自引:0,他引:8
Min-Jie Cao Kiyoshi Osatomi Miho Suzuki Kenji Hara Katsuyasu Tachibana and Tadashi Ishihara 《Fisheries Science》2000,66(6):1172-1179
SUMMARY: Two trypsins, designated as trypsin A and trypsin B, have been purified from the hepatopancreas of carp. The purification procedures consisted of ammonium sulfate fractionation, and chromatographies on DEAE-Sephacel, Ultrogel AcA54 and Q-Sepharose. Trypsin A was purified to homogeneity with the molecular mass of approximately 28 kDa, while trypsin B gave two close bands of 28.5 kDa and 28 kDa on sodium dodecylsulfate polyacrylamide gel electrophoresis both under reducing and non-reducing conditions. On native-PAGE, both trypsin A and trypsin B showed a single band. Trypsin A and trypsin B revealed optimum temperature of 40°C and 45°C, respectively, and shared the same optimum pH 9.0 using Boc-Phe-Ser-Arg-MCA as substrate. Both enzymes were effectively inhibited by trypsin inhibitors and their susceptibilities were similar. The NH2 -terminal amino acid sequences of trypsin A and trypsin B were determined to 37th and 40th amino acid residue, respectively. Their sequences were very homologous, but not identical to that of a trypsin-type serine proteinase from carp muscle and these of other trypsins. Immunoblotting test using the antibody raised against trypsin A cross-reacted with trypsin B positively. 相似文献
88.
草鱼干扰素的分离纯化及某些理化和生物学特性 总被引:3,自引:0,他引:3
通过DEAE-Sepharose阴离子交换层析、Sephacryl S-200凝胶层析、高效液相层析和梯度聚丙烯酰张胶电泳等技术,对病毒诱生的草鱼血清干扰素进行了分离纯化。纯化的草鱼干扰素在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中呈现单一组份,分子量为38kD,等电点为5.25,过碘酸-Schiff试剂反应表现为典型的糖蛋白染色特征。理化和生物学特性研究表明,草鱼干扰素具有100000g(2h)离心不沉降、耐 相似文献
89.
介绍了用 89C2 0 51单片机系统对水处理设备工作的控制 ,使水处理设备能全面、可靠、无人值守地工作 ,达到智能的档次 .文中描述了水处理设备控制器的软件设计和硬件设计 相似文献
90.
茶多糖的提取纯化及组成研究综述 总被引:2,自引:0,他引:2
夏新奎 《信阳农业高等专科学校学报》2004,14(2):45-47
综述了茶多糖的提取纯化方法、纯度及测定方法、化学组成、结构分析方法。 相似文献