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无包埋体对虾病毒(NOSV)的纯化和随机文库构建 总被引:5,自引:0,他引:5
通过超薄切片和负染电镜观察,从患暴发性传染病死亡的中国对虾体组织中,发现一种无包埋体对虾病毒(NOSV)或称中国对虾类杆状病毒(PcBLV)。对其用不连续蔗糖梯度离心纯化,观察了其核衣壳的负染结构:核衣壳平均大小为62nm×314nm,由蛋白壳粒环堆砌而成,每3层环形成1个重复单位,重复单位之间有较大空隙;核衣壳一端较平,另一端近于帽状。提取纯化病毒的核酸,电泳后用低熔点琼脂糖回收,用EcoRI酶切,克隆于pUC18质粒中,共获得16个阳性克隆质粒,克隆片段总长度约53.45kb。 相似文献
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高致病性禽流感穴H5N1雪是由正粘病毒科流感病毒属病毒引起的急性接触性传染病,被国际兽疫局(OIE)定为一类传染病,可表现出临诊症状、呼吸道疾病、消化道症状、产蛋率下降、致死率高的急性出血性疾病。低致病性禽流感可表现为亚临诊症状,轻的呼吸道感染到无症状带毒(隐性感染)等多种流行形式。疾病严重程度取决于病毒毒株的毒力、被感染的禽种、有无并发症、禽群整体的体质及免疫力等。目前中国还未发现高致病性禽流感。根据流感病毒核蛋白(NP)和基质蛋白(MS)抗原性的不同,可将病毒分为A、B、C三个血清型,A型流感病毒… 相似文献
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用ELISA检测猪细小病毒(PPV)血清抗体 总被引:7,自引:0,他引:7
采用差速离心、透析、聚乙二醇(PEG)浓缩方法纯化猪细小病毒(PPVDK7113)制备抗原。用纯化的PPV抗原包被聚苯乙烯微量反应板,建立了检测PPV血清抗体的间接ELISA。抗原最佳包被浓度为6.3μg/ml,被检血清最佳稀释度为1:200。用建立的ELISA检测山东、东北、广东等地的426份血清,结果阳性率为36.2%。与华中农大病毒室提供的猪细小病毒乳胶凝集试验试剂盒相比,其结果符合率为98.6%。通过阻断试验、交叉试验,说明本方法在特异性上达到了较为满意的结果,且易于操作,适用于血清学定性诊断、检疫和大规模的血清流行病学调查。 相似文献
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竞争ELISA检测猪呼吸与繁殖综合征病毒抗体研究 总被引:5,自引:0,他引:5
应用抗PRRSN蛋的单克隆抗体建立了竞争ELISA检测技术,与美国IDEXX公司的间接ELISA检测试剂盒对比检测了30份SPF猪血清,29头SPF猪人工接种呼吸与繁殖综合征病毒后于5d、12d、29d采集的猪血清共87份,临床血清95份,以及其他相关病毒的阳性血清。实验证明,竞争ELISA的检测阴阳性限值为30%,检测特异性为100%,在人工攻PRRSV病毒第五天的猪血清中,可检测到抗PRRSVN蛋白抗体,12dpi,阳性检出率为93%,29dpi,阳性检出率为100%,与IDEXXPRRSVELISA试剂盒进行比对,结果表明,二种检测方法检测美洲株PRRSV抗体的符合率为90%以上,但检测欧洲株抗体符合率较低。建立的竞争ELISA检测技术对于PRRSV美洲株抗体的早期诊断有非常重要的意义。 相似文献