利用体外受精技术产业化生产奶牛胚胎--长距离运送卵巢的保存温度的影响

实验 1,利用 9187枚荷斯坦母牛卵巢 ,进行 71批次的胚胎体外产业化生产 ,结果表明 ,母牛卵巢在离体后约 14 h的长时间运输保存条件下 ,控制其保存温度从最初的 30～ 35℃缓慢下降至到达实验室时的 15～ 2 0℃时胚胎体外生产效果最好 ,其卵母细胞体外受精卵裂率 (75 .6 % )、囊胚率 (2 5 .0 % )和冻胚率 (10 .0 % )均显著地高于其他各组 (10～14℃ ,2 1～ 2 8℃ ,P<0 .0 1)。实验 2 ,在相同的保存温度下 ,保存 7h的肉牛卵巢产胚效果要显著地好于保存 14 h的奶牛卵巢组。结果说明 ,在当前牛胚胎产业化生产的条件下 ,牛卵巢在收集和运输期间的保存温度变化对其后卵母细胞体外受精及胚胎体外发育有很大的影响 ;母牛卵巢在适当的温度下保存 14 h后 ,仍可获得较好的体外产胚效果     

钙离子载体对猪去透明带卵孤雌发育的影响

比较了不同浓度(0.625～10.0μmol/L)的钙离子载体(A23187)结合DMAP(2 mmol/L)处理对经体外成熟培养后去除透明带的猪卵母细胞孤雌激活效果.孤雌激活卵采用微穴法(WOWs)体外培养至第7 d.试验结果表明,使用2.5 μmol/L的A23187激活猪去透明带卵效果最好,其第7 d的发育囊胚率(24.6%)显著高于0.625～1.25 μmol/L组(8.1%～12.8%,P＜0.05).当A23187激活浓度增加到10.0 μmol/L时,去透明带卵激活处理后的死亡率(29.5%)明显高于其它各组(0%～4.9%).采用钙离子载体A23187激活体外成熟猪去透明带卵,其最佳推荐浓度为2.5μmol/L.     

动物克隆技术的研究进展、存在问题及应用前景

本文全面综述了动物克隆技术及其原理、研究进展以及存在的问题,并对克隆技术在相关领域蕴藏的巨大应用价值及发展前景进行了展望。     

水牛体细胞核移植相关影响因素的研究

主要是探讨水牛卵母细胞的体外成熟与供体的年龄和性别对其核移植效果的影响。体外成熟培养22～24h的水牛卵母细胞,在含有5μg／mL细胞松弛素的操作液中进行去核,然后将经0．1μg／mL蚜栖菌素（Aphidicolin,APD）培养处理24h,再用0．5％胎牛血清（FBS）培养2d的水牛耳皮成纤维细胞注射到去核的卵母细胞卵周隙中,再经电融合形成重构胚。重构胚经5μmol／L离子霉素激活处理5min并在2mmol／L的二甲氨基嘌呤（6-DMAP）中培养3h后,在含有颗粒细胞单层细胞的微滴中（30μL）培养7d,观察其卵裂和胚胎发育情况。结果显示：在添加有10ng／mL上皮生长因子（EGF）成熟液中培养的受体水牛卵母细胞的融合率和重组胚卵裂率与对照组无显著差异（P〉0．05）,但其囊胚发育率明显高于对照组（18．53％vs．7．56％,P〈0．05）。来自胎儿（3个月）或成年（一头5～6岁,另一头22岁）水牛的耳皮成纤维细胞核移植后重组胚的卵裂率差异不显著（P〉0．05）,但水牛胎儿体细胞构建的重组胚囊胚率显著高于成年体细胞（22．55％vs．10．77％和8．09％,P〈0．05）。雌性水牛成纤维细胞构建的重组胚的囊胚发育率（20．23％）显著高于雄性水牛体细胞的囊胚率（10．16％,P〈0．05）。以上结果表明：（1）成熟液中添加EGF能提高受体卵母细胞核移植后的胚胎发育率;（2）水牛体细胞核移植效果受供体的个体年龄和性别的影响：胎儿成纤维细胞的核移植效果优于成年的成纤维细胞,而且以雌性的效果较好。     

猪卵丘细胞和胎儿成纤维细胞的分离培养及传代

对猪卵丘细胞和胎儿成纤维细胞的分离、培养和传代进行了系统研究。结果显示，猪的卵丘细胞生长形成单层需要5～6d；运用组织块法和酶消化法获得胎儿成纤维细胞单层的生长时间分别为10～11d和8～9d。猪的卵丘细胞和胎儿成纤维细胞均可以建立并获得稳定的细胞系，这些方法的应用可为猪体细胞核移植研究提供丰富的供体细胞。     

精子性别分离技术及其应用

编者按受广西大学动物繁殖研究所卢克焕教授的邀请, 美国科学院院士、美国克罗拉多大学教授George seidel博士,于1999年11月25日在广西大学作学术报告.该报告由该所副研究员谭世俭先生据录音翻译成文,经研究员石德顺博士审阅,现发表该文的第二篇以飨读者.