猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF6基因在毕赤酵母中的表达

根据酵母表达系统的密码子偏爱性、poly(A)信号以及外源基因mRNA5’端的二级结构等特性 ,对猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)ORF6基因进行简并改造和人工合成 ,然后以正确的读码框架插入到分泌型酵母高效表达载体pPICZαA的α因子信号肽编码序列 3’端 ,构建成酵母转移载体 ,用化学方法转化受体酵母菌GS115 ,经PCR和酶切鉴定证实 ,目的基因已整合到重组酵母菌染色体中。对重组酵母进行诱导表达 ,并通过SDS_PAGE和Westernblot分析进行筛选 ,获得了一株高效表达目的蛋白的重组酵母菌 ,该重组蛋白具有免疫学活性 ,其表达水平可达 2 .0g/L ,而未经改造的ORF6基因则不表达     

苗圃机械通用底盘的研制

当前,全国各林区的苗圃机械化作业程度都有所提高,但单一作业比较严重,如旋耕做床、播种、起苗、切根及移栽等等。每一种机械都有机架及地轮等重复现象,如果能用一种机械取代它们,就可以节约大量材料,达到降低机械加工成本的目的。“苗圃通     

长白松天然更新幼林生长的研究

长白松(Pinus sylveshris var·sylveshriformis(Takenouehi)Cheng ehC.D.Chu)又叫美人松,为我国长白山特有的珍贵针叶树种。原产长白山北侧,在海拔690—1000米分布较多,并有纯林分布,面积不广;海拔1000—1300米与红松、鱼鳞云杉,长白落叶松和岳桦等树种混生,随海拔增高而显著减少;海拔1500米以上几乎绝迹。长白松是常绿高大的乔木,具有干形园满通直,树枝弯曲俊俏,单位面积产量高和木材用途广等优点。此外,在天然更新方面具有明显的两个世代分布特点。在残留的散生高大母树附近都有繁茂的天然幼树,而无其它树种侵入和更替的迹象。     

猪互咬现象发生及防止方法

猪的互咬癖是规模化养猪生产中较常见的现象,具体表现有咬尾、咬耳、咬身,或全栏猪群起追咬其中一头,常至遍体鳞伤甚至死亡,造成经济损失较大。 一、猪互咬现象发生的分析 1.品种的差异:互咬现象在大群中表现出明显的品种和个体差异。长白、大约克、杜洛克等的杂交后代互咬现象严重,本地猪较轻。但各品种猪均有发生。 2.气候因素:经长期观察,互咬现象的发生与气候因素密切相关。一般多发生在夏日的晴天,下     

应用重组N蛋白—ELISA检测猪繁殖与呼吸综合征抗体的研究

利用昆虫杆状病毒表达系统表达的猪繁殖与呼吸综合征重组N蛋白作为抗原，包被聚苯乙烯微量反应板，建立了猪繁殖与呼吸综合征重组N蛋白-ELISA诊断方法。试验证明，该方法对其他8种猪疫病阳性血清均无交叉反应，对标准阳性样品的检出率为100%。具有敏感性高、特异性强的特点。     

禽脑脊髓炎病毒VP3基因的克隆与序列测定

根据已发表的禽脑脊髓炎病毒(AEV)序列设计了1对引物，利用RT-PCR技术，从AEVVR株感染的SPF鸡胚脑以及内脏器官组织中成功扩增出了VP3基因，回收、纯化后克隆到T载体中，用常规方法转化JM109感受态细胞。阳性重组质粒经酶切及PCR鉴定后测定核酸序列。结果表明，VR株VP3基因全长735bp，共编码245个氨基酸，与AEV-1143标准毒株相应片段的核苷酸和氨基酸同源性分别为93．0％和97．0％；并将其与其他小RNA病毒进行了比较。     

单抗—ELISA一步法检测兔粪样中的轮状病毒

用单抗２Ｂ４包被ＥＬＩＳＡ微孔反应板，将处理后的粪样和酶标兔抗ＬａＲＶＩｇＧ同时加入包被孔内孵育，置微型振荡器上振摇，建立了检测粪样中兔轮状病毒抗原的单抗－ＥＬＩＳＡ一步法快速诊断技术，与常规ＥＬＩＳＡ，病毒分离培养，电镜，荧光抗体等作了实验室和临床应用比较，结果证明单抗－ＥＬＩＳＡ－一步法第三特异，快速，简便１，适于基层临床推广应用。     

表达传染性喉气管炎病毒gB基因重组鸡痘病毒疫苗的安全性试验与最小免疫剂量测定

将表达鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白gB基因的重组鸡痘病毒(rFPV-ILTVgB)通过鸡胚成纤维细胞培养,加入适当的保护剂制成冻干疫苗.取3批冻干疫苗,生理盐水稀释后分别经翅内侧无血管处皮下接种14日龄和50日龄SPF鸡,接种剂量为5 × 106PFU,接种后3天出现局部反应,5天局部肿胀达到最大,接种鸡无其它全身反应,精神、食欲以及发育等均不受影响,说明重组病毒对试验鸡是安全的.取其中的200003批疫苗,用生理盐水作210-2～210-5稀释后,翅内侧无血管处皮下接种40日龄SPF鸡,免疫后4周分别攻击传染性喉气管炎病毒WG株和鸡痘病毒102株,结果表明,重组病毒对试验鸡翅内侧皮下接种能产生良好的免疫力,在接种剂量为210-2～210-40.1ml/鸡的范围内可以使全部试验鸡产生局部反应,当接种剂量为210-50.2ml/鸡时可以使部分试验鸡(5/15)产生局部反应,鸡体对重组疫苗的最小反应剂量为210-40.1ml(相当于1000PFU).攻毒试验结果进一步证明,当接种剂量为210-40.1ml(相当于1000 PFU)时可以使免疫鸡产生可靠免疫力,抵抗传染性喉气管炎病毒WG株强毒和鸡痘病毒102株的攻击,降低鸡群的发病率和病死率.这些结果说明,疫苗接种后的局部反应与重组疫苗的免疫效力之间具有相关性,疫苗对接种鸡的局部作用反应了疫苗的免疫效力,我们研制的重组疫苗的最小免疫剂量为1000 PFU,这就为我们进一步考察疫苗的免疫效力试验奠定了基础.     

蚕用塑料薄膜的消毒

<正> 塑料薄膜在家蚕饲育过程中有着广泛的应用,与此同时塑料膜的消毒便是不可忽视的一个重要环节。如果消毒不彻底或者消毒方法欠妥,将会给家蚕饲养造成不良后果,现将操作方法介绍如下: 一、常用消毒药剂及配比浓度: 漂白粉——1%,石灰浆——1%,甲醛——2%。二、消毒方式:1、喷洒消毒;2、浸渍消毒。三、操作方法: (一)喷洒消毒:1、将塑料薄膜按