犬和北极狐白细胞介素-2基因的克隆及序列分析

为了给制备犬和狐白细胞介素-2相关免疫治疗剂、免疫增强剂提供材料,并且为构建插入犬和狐白细胞介素-2基因表达盒的新型基因工程疫苗提供物质基础,从犬、北极狐两种犬科动物基因组中克隆白细胞介素-2,经测序验证扩增片断长度为580 bp,包含全部编码序列和两侧非翻译区。序列分析表明犬与狐核苷酸序列同源性都超过99%,氨基酸序列完全一致。     

水貂肠炎病毒VP2基因的原核表达及间接ELISA方法的建立

为了对水貂肠炎病毒(MEV)疫苗免疫后抗体水平的监测和疫苗免疫效力的评价,本研究在分析MEV VP2蛋白抗原性的基础上,设计1对特异性引物克隆VP2蛋白抗原性较好的基因片段,将克隆的基因片段定向插入到pProEXHTb原核表达载体中,构建了VP2基因原核表达重组质粒pProEXHTb-VP2A,并实现在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,经鉴定表达的重组蛋白以包涵体形式存在,免疫印迹试验表明获得的重组蛋白具有与抗体较好的反应原性.应用His-Bind亲和层析柱纯化重组蛋白VP2A,以纯化后的重组蛋白作为ELISA诊断抗原,并对反应条件进行优化,初步建立了检测MEV抗体的VP2A-ELISA方法.确定了抗原最佳包被浓度为9.65 μg/mL,血清最佳稀释倍数为1:10.判定标准为S/P值≥0.312为阳性,S/P值≤0.243为阴性,介于两者之间为疑似.该抗原不与犬瘟热病毒、阿留申病毒阳性血清反应,具有良好的特异性.采用VP2A-ELISA对180份水貂血清样品进行检测,结果显示VP2A-ELISA与HI试验的符合率达到87.8%,表明建立的间接ELISA方法具有较高的敏感性和特异性,为现地免疫貂群抗体检测和MEV流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法.     

不同生物药剂对烟青虫的室内药效作用研究

为筛选高效、低毒的烟青虫生物杀虫剂,采用浸渍法,在室内测定6种生物杀虫剂的防治效果。结果表明,球孢白僵菌和苦参碱的防治效果较好,其防效明显高于辛硫磷,施用这两种药剂后7 d和10 d发现,烟青虫幼虫的虫口减退率和防治效果均在90%以上;其次为氰虫酰胺;而除虫脲、苏云金杆菌、印楝素3种药剂的防治效果相对较差,其防效明显低于辛硫磷。     

秤锤树嫩枝扦插繁殖研究

秤锤树作为珍稀植物已被列入中国植物保护红皮书,需要采取苗木繁殖扩大其种群数量。试验通过采取不同植物激素种类、植物激素浓度、处理时间对比扦插,结果表明:采用河沙扦插基质和塑料小拱棚保湿,NAA+IBA(1∶1)1 000倍液处理60 s,扦插生根率为79%,生根数量16条,平均根长10.01 cm,实践操作简便易行,可在秤锤树扦插繁殖中偿试应用。     

狐IFN-α、IL-6、IL-10及貉IFN-α基因首次扩增成功

2007年4月中国农业科学院特产研究所人兽共患病研究室应用RT-PCR方法扩增出北极狐IFN-α、IL-6、IL-10及貉IFN-α基因序列,其中狐IFN-α、貉IFN-α基因为世界首次扩增序列,狐IL-6、IL-10基因为国内首次扩增序列.     

核酸水平检测犬副流感病毒方法的建立

根据GenBank中与犬副流感(CPIV)同源性较近的SV5病毒N基因保守序列,利用DNAStar软件设计了一对特异性引物,能扩增265bp大小的片段,并以此建立了检测CPIV的RT-PCR方法,实验证明该对引物特异扩增CPIV;不扩增犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬腺病毒和狂犬病病毒犬的四种病原的核酸。检测临床病料20份,其中2分为CPIV阳性。此法敏感性较高。是检测犬急性传染性呼吸道疾病(CIRD)中CPIV的有效的方法。     

淳化苹果园土壤肥力与施肥调查

正土壤是苹果树赖以生存的基础,土壤理化性状和肥力水平高低决定了苹果树的生长状况,而施肥种类和肥料质量又深刻影响土壤性状及土壤肥力。了解苹果园土壤养分情况与施肥现状,对指导果农科学合理施肥、生产优质苹果意义重大。为此,对陕西淳化县20户果农进行了入户调查,结合淳化县农技中心土肥站对果园土壤的测定分析,对如何改进当地苹果园施肥、提高苹果园肥力提出建议。1土壤养分和施肥现状     

犬细小病毒的分离鉴定及VP2基因的克隆分析

2006年从南京疑似细小病毒感染的病犬中分离犬细小病毒一株,分离的病毒培养物能凝集猪红细胞,凝集效价达到128倍,并能被已知的犬细小病毒阳性血清所抑制。其衣壳蛋白基因VP2被克隆并测序,核酸、氨基酸序列同源性分析表明:血清型为CPV-2b。通过软件对其氨基酸序列分析,预测VP2区域可能的B细胞表位分别为:5-30,300-320,360-380,380-400,400-420区段,这为犬细小病毒基因工程疫苗的研制奠定了基础。     

紫外可见分光光度法同时测定水中铬（Ⅵ）和锰（Ⅶ）的含量

[目的]同时测定水中铬（Ⅵ）和锰（Ⅶ）的含量。[方法]在波长为440和545 nm下,以硫酸作为参比测定水的吸光度,根据吸光度的加和性,用紫外可见分光光度法同时测定水中铬（Ⅵ）和锰（Ⅶ）的含量。[结果]在440和545 nm适宜波长下测定铬（Ⅵ）和锰（Ⅶ）的吸光度,对数据进行回归处理,得线性回归方程和相关系数,表明线性关系均良好。[结论]此方法反应灵敏,操作简单,适合天然水或工业废水中铬（Ⅵ）和锰（Ⅶ）含量的同时测定。     

应用电位滴定法测定海带中碘的含量

本试验采用电位滴定法测定海带中碘含量,该方法反应灵敏,操作简单,专一性强,符合测定结果和分析的技术要求.本试验同时讨论了由E-V曲线、△E/△V-V曲线、△2E/△V2 -V曲线确定电位滴定终点的方法.