独龙牛生长发育规律的研究*

 通过对3月龄到132月龄87头独龙牛体重及主要体尺指标进行观测,构建了不同体尺性状与体重间的回归关系,分析了不同类型牛的体尺指数。结果显示,独龙牛的早期生长速率最快,随着年龄增加,生长速率下降,到40～60月龄后生长基本停止,达到体成熟,整个生长期体重增长速率比其它指标快,成年公牛体重可达400kg,母牛可达350kg;成年公、母牛体高、十字高、体斜长、胸宽、胸围、髋宽、坐骨宽差异不显著（P>0.05）,额大宽、管围差异极显著（P<0.01）;早期独龙牛的体高较大,随着年龄的增加,体长的生长速度超过了体高,成年时体长大于体高;独龙牛具有较为典型的肉用和役用特征。     

烤烟品种、部位及生态环境对烟叶致香物质的影响*

 通过对不同烤烟品种、部位及海拔、土壤类型的烟叶样品进行致香物质化验,将检出的83种化合物按官能团归为6类,应用因子分析、灰色关联分析等方法,初步探究了品种、部位及海拔、土壤类型对6类致香物质的影响。结果表明：（1）检出的83种化合物中,有73种可以归属于对烟叶香气有较大影响的6类致香物质。其中,醛、酮34种,醇8种,酯、类酯7种,酚6种,呋喃8种,氮杂环10种。（2）6类致香物质在烟叶中的含量排序为：醛、酮＞醇＞酯、类酯＞酚＞呋喃＞氮杂环。（3）不同品种烟叶致香物质含量由高到低排序是：红花大金元（红大）＞云烟87＞云烟85＞K326;不同土壤类型烟叶排序是：红壤＞黄壤＞紫色土＞棕壤＞水稻土;部位间的排序为：上部＞中部;海拔1600m以下烟叶致香物质含量低于1600m以上区域;在海拔1600~2200m的区域内,致香物质含量随海拔的升高呈上升趋势。     

当归病原根结线虫的鉴定

2008年在云南省曲靖市沾益县的当归[Angelica Sinensis(Qliv.)Diels]田中发现有植株感染根结线虫病。感病植株地上部叶片发黄,叶尖表现出焦枯症状,植株矮小。地下部根畸形,部分肿大,有根结。根据各虫态形态观察,雌虫会阴花纹及酯酶和苹果酸脱氢酶电泳,病原线虫鉴定为为南方根结线虫[Meloidogyneincognita(Kofoid and White,1919)Chitwood,1949]。这是国内首次报道在当归上发现根结线虫病。     

利用微卫星DNA标记进行黄牛的亲子鉴定*

 亲子鉴定在畜牧业生产中具有重要实际应用价值,常见其用于建立准确的系谱档案和家畜归属的诉讼案件。其中标准的三联体（即在母子关系是已知的情况下,鉴定假设父亲与子畜是否有亲生关系）和单亲［即父子（女）或母子（女）亲生关系的确定］两种情况下的亲子鉴定在畜牧生产中具有普遍意义。以云南文山黄牛为试验材料,采用10对常染色体微卫星DNA标记对这两种情况下的亲子关系进行了检测分析。结果表明,常染色体微卫星DNA标记在标准的三联体和单亲两种情况下都能用来进行亲子鉴定,结果较准确,但标准三联体情况下的亲子鉴定更准确。确定的不同模式下亲子鉴定的方法,可为家养动物亲子鉴定标准方法和流程的建立提供依据。     

仔猪繁殖与呼吸综合征病毒和血凝性脑脊髓炎病毒混合感染的诊断

对辽宁省某规模化猪场发病的哺乳仔猪,通过临床症状、血清学、病理学、动物试验和反转录多聚酶链式反应(PCR)方法进行综合诊断,确诊为猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrone virus,PRRSV)与猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)混合感染。RT-PCR检测结果证明,所感染的PRRSV为美洲型毒株,猪血凝性脑脊髓炎病毒多呈隐性感染,本猪场哺乳仔猪发生二者混合感染,可能与PRRSV感染猪免疫力降低,容易感染HEV而混合发病有关。     

家兔GAPDH基因实时荧光定量RT-PCR方法的建立

根据GenBank登录的家兔GAPDH基因保守区域CDS序列设计1对引物,通过反应体系及反应条件优化,成功建立了检测家兔GAPDH基因的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法。结果表明,该方法检测GAPDH的最低拷贝数为32拷贝/μL,在较广的范围内(3.2×101~3.2×107拷贝/μL)有良好的线性关系(r=0.999);熔解曲线分析显示扩增产物的特异性单峰,其Tm为(87±0.2)℃;5个不同浓度标准品组内试验变异系数为1.67%~4.73%,组间试验变异系数为2.66%~8.74%。该方法具有快速、灵敏、高通量及可重复性强等优点,为GAPDH基因作为内参基因进行家兔功能基因与病原基因表达的定量分析提供了方法学基础。     

牛传染性鼻气管炎病毒截短gB基因原核表达与间接ELISA诊断方法建立

用DNAstar-Protean分析牛传染性鼻气管炎病毒gB蛋白的亲水性、抗原性和表面展示概率,据IBRVgB全基因序列设计引物,PCR扩增编码385-550位氨基酸的基因序列。将目的片段克隆,酶切鉴定并测序鉴定后,定向连接到pET-28b载体上,转化表达菌DE3并诱导表达。经SDS-PAGE分析,获得大小约为21.4 ku的目的蛋白,与预测值相符。纯化后的蛋白浓度约为2.0 mg/mL,纯度为95.27%。间接ELISA及Western blotting证明,表达的目的蛋白具有抗原性。以该蛋白作为诊断抗原建立的间接ELISA诊断方法,确定的抗原包被量为50μg/mL,血清的最佳稀释倍数为50。与进口IBRV全毒ELISA抗体诊断试剂盒比较,特异性为92.3%、敏感性为93.8%、符合率为93.3%;试验结果表明该诊断方法具有良好的特异性和敏感性。     

卵泡直径对辽宁绒山羊卵母细胞体外培养的影响

本试验以屠宰场绒山羊卵巢为材料,采用抽吸法收集不同直径卵泡卵母细胞,研究卵泡直径对卵母细胞回收效果和体外成熟、体外受精的影响。结果表明,卵泡直径直接影响卵母细胞的回收效果及随后的体外成熟、体外受精;卵母细胞的回收率和可用卵的比率及成熟率与卵泡直径呈正相关;直径2.1～5 mm卵泡的卵母细胞由于处于生长旺盛期,受精率和卵裂率分别为59.15%和42.50%,显著高于直径5 mm卵泡和≤2 mm卵泡,适合体外胚胎的生产,而直径≤2 mm卵泡的卵母细胞因未发育充分体外发育潜能最差;直径5 mm卵泡的卵母细胞可能因体外培养成熟过度而老化导致受精率和卵裂率降低,缩短其体外成熟时间可能会提高其体外发育潜能。     

氯胺酮与速眠新Ⅱ复合应用对小型猪麻醉的观察

为探讨氯胺酮与速眠新Ⅱ复合应用对实验小型猪的麻醉效果。将氯胺酮与速眠新Ⅱ等量混合,采用肌肉注射法(0.28mL/kg)对12头实验小型猪(11.33kg±0.83kg)进行复合麻醉,观察麻醉起效时间、麻醉持续时间及镇痛效果,并监测麻醉过程中体温、呼吸、心率等生理指标及有无呕吐、流涎等不良反应。小型猪成功麻醉12例,占100%,肌肉注射后(4.2±1.6)min进入麻醉状态,麻醉状态维持(87.3±15.4)min以上,麻醉期间肌肉松弛效果好,动物呼吸和心率平稳,无不良反应。结果表明,采用氯胺酮与速眠新Ⅱ复合麻醉效果好,麻醉过程平稳,生命体征稳定。氯胺酮与速眠新Ⅱ复合应用是较为简便、安全的小型猪麻醉方法,适合于耗时较长的手术或试验的开展。     

培养时间和表皮生长因子对兔卵母细胞体外成熟的影响

本试验旨在探讨培养时间和表皮生长因子(EGF)对兔卵母细胞体外成熟及受精的影响。分别用切割法和针刺挤压法取经超排后母兔卵巢表面的卵母细胞颗粒细胞复合体(COCs),将COCs分别在不同时间(24、30、36及40h)和在基础培养液中添加不同浓度表皮生长因子(0、50、100ng/mL)进行体外成熟培养并观察其第一极体排出率。结果表明:①针刺挤压法获得COCs数明显高于切割法(P0.05);②体外成熟培养时间30(36)h的第一极体排出率高于24(40)h(P0.05);③添加50和100ng/mLEGF组卵母细胞第一极体排出率明显高于对照组(P0.05)。因此,①兔卵巢卵母细胞的获得方法以针刺挤压法较好;②兔卵母细胞成熟时间以30～36h为宜;③EGF对兔卵母细胞体外成熟有促进作用,在基础培养液中添加100ng/mLEGF为宜。