鸡传染性支气管炎诊断方法研究进展

一、血清学诊断方法 国际动物卫生组织（OIE）指定的IBV诊断方法包括：病毒分离鉴定、鸡胚中和试验、琼脂免疫扩散试验、HI和常规ELISA。鸡胚中和试验，费时较长，操作复杂；琼脂免疫扩散试验敏感性较低；因IBV不能直接凝集红细胞，经处理的抗原制备的川诊断液检测结果不稳定；     

不同传支病毒的免疫交叉保护试验

用传支病毒不同毒株M4 1SAIB3 的油乳剂灭活苗进行免疫交叉保护试验 ,结果表明M4 1与SAIB3 混合疫苗的免疫效果优于M4 1SAIB3 单价疫苗。鸡传染性支气管炎不同毒株之间存在一定差异 ,单价苗对其它毒株不能达到 10 0 %保护 ,从而出现免疫失败。     

84株仔猪黄、白痢E.coli的体外药敏试验

从四川省不同规模化猪场临诊发生典型仔猪黄、白痢猪只的肛试粪样及死亡猪只的心血和肝脏中分离出致病性大肠杆菌８４株。用１２种常用抗菌药物对分离菌株进行了体外药敏测定，结果表明：大肠杆菌存在广泛的耐药性，以多重耐药性为主。庆大霉素、链霉素、痢特灵和喹诺酮类（环丙沙星、蒽诺沙星、诺氟沙星）等药物较为敏感。药敏试验结果为规模化猪场合理用药提供了科学依据     

浅谈猪繁殖和呼吸综合征的综合防制

猪繁殖和呼吸综合征（简称猪蓝耳病），是８０年代后期于美国发现的一种新的有高度传染性的猪综合征，以母猪发热、厌食和流产、木乃伊胎、死产、弱仔等繁殖障碍以及仔猪的呼吸症状和高死亡率为特征。１９９０年后在欧洲大多数国家和亚洲一些地区也相继发现本病。该病给养...     

应用不连续密度梯度离心纯化禽传染性支气管炎冠状病毒

病毒的纯化是进行病毒的物理特性、化学组成、免疫特性及分子生物学等研究的前提和基础。目前提纯病毒的方法主要有沉淀法、离心法、层析过柱法等几大类。病毒提纯是一个比较复杂的过程，通常使用一种方法很难得到高纯度的病毒粒子，在实际应用中可以根据试验目的选取切实可行的操作方法。     

鹧鸪沙门氏菌病的病理诊断

四川省某珍禽养殖场饲养的一批育成鹧鸪 (约 40 0只 )发生沙门氏菌病 ,发病率、死亡率分别为 5 0 %和 75 %。作者在发病现场观察、诊断、防治及作病原分离鉴定的同时 ,对本病作了病理观察与病理诊断 ,现将结果报告如下 ,供参考。1　材料与方法1 .1　发病死亡鹧鸪　取自四川省某珍禽养殖场。1 .2　病变观察　发病死亡期间随机抽取死亡和濒死期鹧鸪 5 0只进行系统尸体剖检 ,选择其中 8例重点采集小肠、盲肠、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏等器官组织 1～ 2块 ,5例采集大脑、小脑、肌胃、腺胃、胰腺 1～ 2块 ,1 0 %中性福尔马林固定 ,石蜡包埋 …     

IBV M基因与IL-18基因共表达DNA疫苗的免疫原性

将禽传染性支气管炎病毒(IBV)的M基因和禽白介素18(IL-18)基因分别插入双顺反子质粒pIRES-EGFP/DsRed中,构建IBV M和IL-18基因的共表达质粒pIRES-M/IL18及表达M基因的pIRES-M质粒。通过脂质体转染Vero细胞,利用RT-PCR及间接免疫荧光检测质粒在体外的表达。将构建的质粒用脂质体包裹后,通过腿部肌肉多点注射免疫7日龄雏鸡,28日龄加强免疫1次;免疫前后均采血检测ELISA抗体效价和外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞的数量;二免后2周用IBV肾型强毒进行攻毒。结果显示,pIRES-M/IL18、pIRES-M质粒均在Vero细胞中有效地转录并表达目的蛋白。从免疫后7 d起,pIRES-M/IL18免疫组产生的抗体水平及外周血T淋巴细胞亚群数量均高于pIRES-M组。pIRES-M/IL18、pIRES-M组对强毒的攻击保护率分别为65%和40%。以上结果表明,禽源IL-18基因与IBV M基因共表达可增强鸡体对DNA疫苗的免疫应答,提高对IBV强毒的抵抗力。     

禽用减毒沙门菌活载体疫苗的研究进展

疫苗主要通过激发机体的免疫系统来达到防治疾病的目的。目前,疫苗主要有灭活疫苗、减毒疫苗及基因工程疫苗等。基因工程疫苗包括基因缺失苗、基因重组苗等。活载体疫苗是将胞内感染性的细菌直接用来运载目的基因进入体内,而产生相应的免疫应答反应。目前沙门菌的预防与治疗通常使用药物,但沙门疫苗研究正迅速发展,如减毒沙门菌活载体疫苗则是将减毒后的沙门菌作为载体,     

禽传染性支气管炎病毒S1基因玉米表达载体的构建

禽传染性支气管炎病毒主要编码3种结构蛋白,其中S蛋白的S1蛋白是宿主的主要保护性抗原,能诱导机体产生中和抗体和血凝抑制抗体,并与病毒的组织嗜有关.本研究选取具有代表性的禽传染性支气管炎病毒分离株SAIB14和SAIB4,以其S1基因克隆质粒pUCSAIB14和pUCSAIB4为模板,用具有高保真度的pfu酶分别扩增,得到含先导序列的S1基因片段.把扩增产物分别通过ClaⅠ和BamHⅠ酶切纯化,替换中间载体pUGFPocs的GFPm1基因,构建中间表达载本pUSAIB14和pUSAIB4.用KpnⅠ和HindⅢ双酶切重组质粒pUSAIB14和pUSAIB4,回收Ubi-S1-Tocs片段,定向插入到pCAMBIA 300载体的多克隆位点.经酶切和PCR鉴定,证明获得了S1基因的玉米表达载体pCUSAIB14和pCUSAIB4.外源基因导入受体植物能否有效表达,表达载体构建是关键因素,构建时选用表达载体的类型、启动子和终止子、目的基因插入位点等都有影响.本研究用BarHⅠ和ClaⅠ双酶切载体pUGFPocs,用S1基因扩增片段替换GFPm1基因,将S1基因置于Ubi启动子和T-ocs终止子的控制之下,有助于S1蛋白的高效表达,最后将Ubi-S1-Tocs单元HindⅢ和KpnⅠ双酶切下来,插入到pCAMBIA1300的多克隆位点,得到可用于农杆菌介导的转化或直接转化的植物表达载体pCUSAIB4和pCUSAIB14. Ubi启动子来自玉米,属组成型启动子,内含有一个内含子和外显子,是已知的最强的单子叶植物启动子,外源基因在Ubi启动子的控制下,在转基因植物的所有部位和所有的发育阶段都会表达.pCAMBIA1300是中国农业科学院作物遗传育种中心构建的植物表达载体,可用于农杆菌介导的转化或直接转化,载体中T-DNA左右边界内带有多克隆位点和筛选标记Hyg基因,Hyg基因是玉米和水稻转化试验中广泛使用的标记基因,编码潮霉素磷酸转移酶,适于玉米和水稻转化后用化学试剂潮霉素进行筛选转化体.多克隆位点处可插入外源基因,在农杆菌介导的转化中,由于卸甲载体的作用,植物表达载体T-DNA左右边界内的序列,包括外源基因和筛选标记基因部分,发生转移并进入植物细胞内,用筛选试剂潮霉素可有效筛选出整合有外源基因的转化体.转基因植物疫苗生产技术是利用分子生物学技术把重组的疫苗基因导入植物,并使植物能够大量表达重组蛋白的一类生物技术.与常规疫苗及其它新技术疫苗相比,转基因植物疫苗具有生产简单、安全、廉价及保存和运输方便等优点,由于其应用前景可观,已引起免疫学家、分子生物学家和植物学家的极大兴趣与关注.利用该技术国外至今已获得成功的有乙型肝炎表面抗原、不耐热的肠毒素B亚单位(LT-B)、诺沃克病毒外壳蛋白、流感病毒血凝素和艾滋病病毒抗原、口蹄疫病毒抗原和鼻病毒抗原、痢疾抗原等10多种疫苗,国内在利用转基因植物生产疫苗的研究方面还远远滞后于其他国家.本研究利用含先导序列的禽传染性支气管炎病毒S1基因,构建了玉米表达载体系统,为进一步在玉米中表达IBV S1基因提供了基础材料.     

细菌耐药机理及控制对策研究进展

随着抗菌药物的广泛应用，越来越多的细菌出现耐药性，而且耐药水平也越来越高。耐药性呈全球发展趋势，极大地影响着食品安全，危害着人类身体健康，本文就近年来国内外对细菌的耐药机理，耐药性的传播及对耐药性的控制对策等方面的研究进展作了阐述和综述。