基于ITS序列的菟丝子PCR鉴定

提取了7个药用菟丝子种样品的DNA，采用ITS序列扩增通用引物对其进行PCR扩增，并对PCR产物进行克隆和测序．根据所测得菟丝子ITS全长序列与其常见易混品所在属的代表植物ITS序列比对，设计了一对特异性引物并进行了PCR检测．结果表明，此对引物能将药用菟丝子种子与4种易混品区分开来，可以用于药用菟丝子的真伪鉴定．     

植物病原细菌DNA分子检测技术

在DNA检测技术建立之前,种子上的病菌及未显症的病害的快速检测和鉴定几乎是不可能的.随着DNA检测技术的发展,在隐症植物材料上的病害检测变得快速可靠.本文主要介绍DNA检测技术在植物病原细菌检测中的应用.     

苹果茎沟病毒KRL-1分离物外壳蛋白基因序列测定

以KRL-1(库尔勒香梨分离物)总RNA为模板,采用RT-PCR技术,扩增外壳蛋白(CP)基因的cDNA片段,将其克隆到pMD18-T载体上。通过序列测定,分析结果表明:KRL-1CP基因由714个核苷酸组成,编码237个氨基酸。KRL-1与ASGV其它分离物CP基因的核苷酸同源性为90%-93%,氨基酸同源性为94%-98%。根据KRL-1与其他分离物CP基因序列和生物学症状上的差异,可推断KRL-1存在较大的分子变异。     

一种改进的水稻总DNA的快速提取方法

植物总DNA的提取质量是植物分子生物学操作成败的关键,一个优秀的总DNA提取方法往往可以达到事半功倍的效果.本文以水稻叶片为材料,提出了一种改进的植物叶片总DNA快速提取方法,该方法能在35min之内提取到水稻总DNA.电泳结果表明此改进方法提取的总DNA产量与传统CTAB法相当,PCR扩增结果表明其质量可靠,完全可以满足分子生物学操作的要求.     

玉米细菌性枯萎病菌TaqMan探针实时荧光PCR检测方法的建立

成功建立了玉米细菌性枯萎病菌快速检测鉴定的实时荧光PCR方法.该方法根据细菌16S rDNA序列的特异性,设计出对玉米细菌性枯萎病菌具有稳定性点突变特异性探针,并对10种细菌菌株和5种植原体进行了实时荧光PCR.结果表明,只有玉米细菌性枯萎病菌产生荧光信号,而其它参考菌不产生荧光信号,检测的绝对灵敏度是14.2 fg/μl质粒DNA,比常规的PCR电泳检测高约100倍.整个检测过程只需2h,完全闭管,降低了污染的机会,无须PCR后处理.     

侵染菊花和风信子的番茄不孕病毒的鉴定

1986年7—12月在北京北海公园和紫竹院公园采集到菊花表现退绿花叶病样4个。1986年北京动植检所送检风信子有褐色病斑的球茎病样一个。以上五毒株经人工接种茄科、豆科、藜科、菊科、葫芦科、苋科、番杏科、旋花科等10科36种植物上多产生系统花叶,严霓斑驳、叶畸形或有耳突等症状,番茄果实小,畸形,籽少或无籽。豇豆、蚕豆、番杏,昆诺阿藜、苋色藜、黄瓜等表现局部侵染。不侵染菜豆,裂叶花葵和补骨脂。     

侵染唐菖蒲的烟草环斑病毒鉴定简报

1987年3月大连动植物检疫所送我所病毒室检验的唐菖蒲 Saxany 品种上,选取症状表现为斑驳的1病株,进行了鉴定,现简报如下。1.寄主范围及鉴别寄主反应:该病毒的寄主范围较广,汁液接种侵染6科10多种植物。在菜豆“Pinto”、家雀蛋、“Moroe”,豇豆“黑种三尺”、“黑眼”上,接种叶表现局部坏死环斑,系统生长点坏死;大豆“猴子毛”、“晋豆84”接种叶表现局部坏死斑,系统顶枯,昆诺阿藜、苋色藜、千日红、矮牵牛、克利夫兰烟接种叶表现为局部坏死斑;普通烟接     

谷斑皮蠹分子检测方法

根据Simon(1994)发表的COI基因的通用引物,扩增了谷斑皮蠹、黑斑皮蠹、条斑皮蠹和花斑皮蠹不同地理种群的COI基因片段.经序列比对后,依据多态位点,设计了检测谷斑皮蠹的特异引物.PCR结果表明:引物可成功扩增出谷斑皮蠹样品的基因片段.而其他斑皮蠹属种类基因片段不能被扩增.     

棉花皱叶病毒LAMP检测方法的建立

棉花皱叶病毒(Cotton leaf crumple virus,CLCrV)是危害棉花的重要病毒之一,属中国进境检疫性植物病毒,本研究根据其DNA-B基因序列设计LAMP特异性引物,通过试验建立CLCrV的LAMP检测方法。该方法检测快速,15min即可检测到扩增曲线;特异性强,可有效区分同属的CLCrV、棉花曲叶病毒(CLCuV)、非洲木薯花叶病毒(ACMV)及番茄黄化曲叶病毒(TYLCV);灵敏度高,可检测到约43fg/μL的总DNA,比普通PCR灵敏度高1 000倍;并可通过肉眼观察浊度或颜色反应进行结果判断。该方法适用于现场CLCrV的快速检测。