单抗捕捉ELISA检测猪附红细胞体血清抗体方法的建立

在制备针对猪附红细胞体病的特异性单克隆抗体的基础上,建立了单抗捕捉快速检测猪附红细胞体病抗体的ELISA方法,并对影响ELISA结果的各项反应条件进行了优化.结果表明,猪附红细胞体腹水单抗的最佳稀释度为1:20 000,猪附红细胞体病抗原工作质量浓度为4.088 mg/L,血清稀释度为1:40,HRP标记的兔抗猪IgG的工作浓度为1:5 000.待检血清和酶标二抗的反应时间均为37℃1 h;底物在室温显色时间为10 min.已建立的ELISA方法与PCR平行检测50份样本,总符合率为92%,表明该方法特异性强、快速、敏感性高.用该法检测了各地采集的171份血清,阳性率为40.4%,与镜检的符合率为59.2%;阴性率为47.4%,与镜检的符合率为66.7%,总符合率为67.3%.     

杜泊羊冷冻胚胎批量移植试验

杜泊羊(Dorper Sheep)是在南非由有角陶赛特羊(Homed Dorset)和波斯黑头羊(Persian Blackhead)杂交育成的肉用绵羊品种，最初在较干旱的地区进行繁殖和饲养，现广泛分布在津巴布韦、肯尼亚、博茨瓦纳。具有生产力高、增重速度快、胴体品质好、适应性强、母性好、皮质优秀、抗逆性良好、食性广等综合优点，被称为“钻石级”肉用绵羊。近年来，中东地区、美国、南美洲、澳大利亚、新西兰和中国都引进了杜泊羊。     

围绕农字做文章,兴十四村带领村民在"四化"路上建设新农村

有"龙江第一村"美誉的兴十四村位于黑龙江省西北部甘南县城东南17公里处,西临内蒙古自治区,是1956年由山东临沂地区移民组建起来的移民村.     

基于ODBC绑定远程网Oracle数据库的VC++6.0程序设计

简要介绍了ODBC(OpenDatabaseConnectivity开放数据库连接的工作原理、VC++6.0工作室及MFC数据库类。重点阐述通过ODBC实现VC++6.0应用程序与远程网Oracle数据库绑定的技术、方法及具体步骤。     

计算机主从控制人工生态环境监控系统的研究

介绍了多对象,多参量和多环节人工生态环境监控系统计算机主从控制方案。系统机（上位机）完成数据采样处理。流程状态监控及历史信息再现等任务,可编程控制器（ＰＬＣ,下位机）执行直接数字控制（ＤＤＣ）。由ＰＰＩ电缆承担通讯联系。已成功地应用于某林木强化育种人工生态环境控制,并获得了良好效果。     

埕东油田西区强化泡沫驱试验研究

针对埕东油田西区强化泡沫驱先导试验区的油藏特点及水驱开发现状,利用加拿大的CMG数值模拟软件,对强化泡沫驱注入主段塞大小、注入泡沫剂浓度、聚合物浓度、前置段塞大小、注入方式等参数进行了优化研究,并依此制定了开发方案。优化的注入前置段塞0.02PV（1800mg/L聚合物＋0.75%泡沫剂）＋主段塞0.3PV（氮气＋1600mg/L聚合物＋0.5%泡沫剂）,注入方式采用气液交替注入,交替周期10d。矿场实施后,注水波及体积扩大,驱油效率提高,采收率提高1.18%,累积增产原油1.4×104t。     

水牛朊蛋白成熟片段基因的克隆与原核表达

【目的】克隆、分析水牛朊蛋白（prion protein，PrP）成熟片段基因，并获取纯化的表达产物。【方法】将应用PCR技术扩增的水牛成熟PrP的核酸序列克隆到表达载体pET-32a，并分析其序列；把阳性克隆质粒pET-32a-BPrP转化表达菌BL21(DE3)，鉴定纯化的表达产物。【结果】水牛朊蛋白成熟片段核酸序列及其推导的氨基酸序列与已知其他牛科动物的成熟PrP核酸、氨基酸序列间的相似性分别在97.1%和97.2%以上，并且发现水牛成熟PrP有5个重复序列，编码的氨基酸序列其中有2个九肽和3个八肽重复序列。具有较高的表达水平的PrP融合蛋白被纯化后，用Western印迹实验证明该蛋白具有PrP抗原活性。【结论】首次报道了克隆、分析水牛朊蛋白成熟片段基因，发现水牛成熟PrP有5个重复序列，并获得了具PrP抗原活性的水牛成熟PrP融合蛋白。     

PRRSV血清抗体间接ELISA检测方法的建立

用亲和层析纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组核衣壳蛋白GST-N作为诊断抗原,建立检测PRRS血清抗体的间接ELISA方法。抗原最佳包被量为每孔400 ng,待检血清最佳稀释度为1∶100,待检血清样品的D_(490 nm)≥0．43D_(po■) 0．57D_(neg)判为阳性,反之判为阴性。对采自14个猪场的364份猪血清样品进行检测,PRRS阳性率为51．4%,略高于HerdChek ELISA的阳性检出率49．7%。与HerdChek ELISA相比,间接ELISA的敏感性为94．5%,特异性为91．3%,总符合率为92．9%,Youden指数为0．86。同时还证明该方法具有良好的批间和批内重复性,并且不与猪瘟、猪伪狂犬病等阳性血清发生反应。该方法的成功建立将为我国PRRS的防制工作作出贡献。     

三类常用消毒剂对非洲猪瘟病毒灭活效果的评价

为评价戊二醛类、酚类、含氯类常用消毒剂对非洲猪瘟病毒(ASFV)的灭活效果,参考OIE参考实验室相关操作流程,基于畜禽栏舍、运载工具、器具消毒的目的,根据说明书标明的浓度范围选择低、中、高3个工作浓度,在选定工作浓度下将消毒剂与ASFV分别在4℃和20℃条件下作用30 min,10倍连续稀释后接种猪肺泡巨噬细胞,同时加入猪红细胞,培养观察红细胞吸附现象。结果显示,这三类消毒剂对ASFV均具有灭活作用,但效果因消毒剂种类和工作浓度不同有所差异。相同工作浓度的同一消毒剂产品,在4℃和20℃这两种条件下的灭活效果基本一致。戊二醛类和酚类消毒剂,在说明书推荐的工作浓度下均可有效灭活ASFV;含氯类消毒剂需在其说明书标明浓度范围的较高工作浓度时才可有效灭活ASFV。本研究评价了三类常用消毒剂对ASFV的灭活效果,可为生猪养殖、运输调运、屠宰加工、检验检疫等工作中消毒剂的选择和使用提供参考。     

新疆野生北山羊小反刍兽疫病毒分子特征

为了解新疆野生北山羊小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)的分子特征,根据GenBank公布的PPRV基因组序列设计并合成引物,采用RT-PCR方法和基因测序技术获得病毒全基因序列,应用分子生物学分析软件,对分离的PPRV毒株进行序列分析。结果显示,本次分离的PPRV毒株(China/XJAKS/2017)属于基因IV型,基因组全长15 954 nt,编码6种结构蛋白和2种非结构蛋白;在系统进化上,与国内新疆分离株China/XJBZ/2015、China/XJYL/2013同源率分别高达99.0%、99.6%,与国外的巴基斯坦和塔吉克斯坦分离株亲缘关系最近。结果表明,PPRV已经在家养动物与野生动物之间传播。结果提示,PPRV传入野生动物群为我国消除PPR带来极大困难,需加强我国边疆地区PPR免疫隔离带建设,并对野生动物PPRV分子流行病学特点进行追踪监测。