锦鲤疱疹病毒TaqMan荧光定量PCR快速检测方法的建立及应用

为建立快速有效的锦鲤疱疹病毒病检疫方法,根据锦鲤疱疹病毒(KHV)聚合酶基因(Sph)的保守序列设计1对引物和相应的TaqMan探针,建立了一种快速检测锦鲤疱疹病毒病荧光PCR方法。用建立的检测方法对细胞培养物进行检测,并与常规PCR对比,结果荧光PCR灵敏度高于普通PCR,能检出的最低拷贝数为1.6×102/μL。应用该方法对样品进行检测,结果表明:所建立的荧光PCR检测方法4 h内可报告检测结果。该方法具有快速、灵敏、特异及重复性好等特点,适用于锦鲤疱疹病毒的快速检疫。     

美人鱼发光杆菌溶血素Hly_(ch)基因的原核表达及免疫血清制备

为研究美人鱼发光杆菌溶血素的携带情况及溶血素的免疫原性,对前期分离的美人鱼发光杆菌的溶血素基因进行了分析,同时进行了原核表达和免疫原性分析。结果显示,该菌携带溶血素Hlych基因,生物信息学分析,该基因与美人鱼发光杆菌溶血素基因同源性达到99%以上,细胞定位预测为胞外蛋白,且具有良好的免疫原性。研究结果提示该菌携带Hlych基因,细菌毒力增强,同时Hlych蛋白有一定的免疫原性,有望用于建立ELISA诊断方法。     

布鲁菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白的研究进展

布鲁菌是一种严重危害家畜和人类健康的人兽共患致病菌,近几年国内牛羊养殖场和人的感染率急速攀升,造成了一定程度的社会恐慌。研究认为,布鲁菌在细胞内可以利用Ⅳ型分泌系统(typeⅣsecretion system,T4SS)分泌多种效应蛋白进入宿主细胞,这些效应蛋白能够改变病原菌在感染细胞内的转运,避免最终被杀死;也能逃避感染细胞的免疫监视功能,维持其在细胞内的持续存在。本文将主要从Ⅳ型分泌系统的基本功能、效应蛋白筛选的方法、以及效应蛋白的功能研究作一简要总结,以期为后续研究提供一定的参考。     

乌鳢细菌类疾病的研究进展

正乌鳢生命力极强,其自身具备较强的抗病能力,但随着集约化养殖密度的增加,带来各种细菌性相关病害,严重阻碍了乌鳢在水产养殖业中的发展与应用。一、细菌性败血症1.流行特点细菌性败血症俗称暴发性出血病,也称细菌性出血病。该病流行范围广、周期性长,严重时可引起乌鳢短时间内大面积死亡。乌鳢各个生长阶段均可感染此病,死亡率均较高。发病时间为     

猪源生物被膜乳酸菌的筛选、鉴定与体外益生特性评价

将分离自健康猪新鲜粪便的乳酸菌进行功能性和安全性评价,旨在筛选出有利于猪健康生长的优良乳酸菌菌株。结果显示,共分离到2株对猪源大肠杆菌等病原菌具有抑制作用的乳酸菌菌株,并从中成功筛选出1株生物被膜形成能力较强的分离菌株L-8。经鉴定,分离菌株L-8为约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii),具有一定的产酸能力,能够耐受胃内pH值4.0～10.0和肠道1%胰蛋白酶环境,对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)具有一定的黏附性,其生存能力和生长性能均较好。此外,分离菌株L-8对小鼠无致病性,具有安全性。综上,分离菌株L-8具有作为猪用益生菌的潜在益生特性和开发前景。     

不同动物源性维氏气单胞菌气溶素基因的克隆及比较分析

为系统研究维氏气单胞菌毒力因子气溶素,对不同动物源性的维氏气单胞菌气溶素基因（aerA）进行了克隆,获得了1500 bp左右的目的基因,并对其序列进行了分析比较。结果显示,不同动物源性维氏气单胞菌aerA基因的核苷酸序列均具有APT Superfamily与Aerolysin Superfamily保守结构域,其核苷酸序列的同源性在95.8%以上,编码的氨基酸序列同源性在89.8%以上,说明不同源性维氏气单胞菌气溶素具有一定的保守性。该研究结果可为维氏气单胞菌的检测及疫苗制备提供一定的理论依据。     

獭兔葡萄球菌病的诊治

葡萄球菌对家兔最为敏感,不同年龄、性别的兔均可感染,在机体抵抗力降低时更易发病.哺乳母兔的乳头口是本菌侵入机体的重要门户,仔兔吸吮病母兔乳汁即可发病.笔者将一起獭兔葡萄球菌病的病例诊治情况报告如下.     

三味中药水煎液单用及联用对鲫鱼免疫保护作用的研究

试验旨在探讨黄芪、地榆、五倍子三味中药水煎液单用及联用对鲫鱼的免疫保护作用.选取200尾鲫鱼,随机为5组,每组40尾.对照组鲫鱼饲喂基础饵料,试验组鲫鱼饲喂中药包被的饵料,黄芪、地榆、五倍子、联用浓度分别为2.500、2.500、1.250、0.625 g/mL,中药水煎液与饵料按1∶1比例混合,对鲫鱼进行定时定量饲喂...     

家兔胚胎胃肠道细菌分离及16S rRNA基因序列分析

为研究家兔胚胎胃肠道细菌菌群的种类,对常规饲养、正常妊娠的家兔胚胎后期胃肠道细菌进行分离,基于分离细菌的生理生化特性、16S rRNA基因序列的同源性比较及系统发育分析,初步确定家兔胚胎后期胃肠道中存在的微生物菌群有微球菌属(Micrococcus)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、棒杆菌属(Corynebacterium)以及蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)等细菌,其序列同源性均为97%～99%。分离细菌均为G+细菌,家兔胚胎胃肠道中细菌的平均数量达到0.8×102cfu/g～1.2×102cfu/g,本研究为哺乳动物胚胎时期存在于胃肠道中细菌的深入研究奠定了基础。     

黏质沙雷菌——实验教学用良好菌种

黏质沙雷菌在医药、环境污染的治理、化工等领域均具有一定的应用价值,适合在很多专业的微生物学实验课中应用;它所具备的菌体小、分布广、生长快、营养要求低等生物学特性又使其可应用于很多实验项目中;它独特的菌落＂饰变＂性质更能丰富微生物遗传学实验的教学内容。对黏质沙雷菌的独特性质及其在医药、环境污染治理、化工和其他领域的应用作一阐述。