鸡链球菌病病原分群鉴定

从河南省荥阳、淇县、武陟、修武、兰考、郑州等地送检鸡只的病料中分离到17株链球菌，经对其中13个典型菌株进行系统生化分群鉴定，结果表明，上述地区发生的鸡链球菌病主要是由C群兽疫链球菌（6／13）、D群鸟链球菌（4／13）和D群粪链球菌（2／13）引起，另有1株未能定群。     

感染仔猪粪肠球菌不同分离株的鉴定及毒力基因检测

从近年来河南省各地感染发病猪群的肠球菌分离株中,选取来源不同且具有代表性的5株分离菌进行了包括致病性和毒力基因测定在内的系统鉴定。结果表明,引起本次河南省仔猪感染发病的病原体为粪肠球菌。各地分离菌的形态、培养特性与以及对极端环境的耐受性上表现较为一致,而对各种糖的发酵上存在着的差异;对药物万古霉素、替考拉宁、利福平和氨苄西林敏感,而对临床常用药物红霉素、卡那霉素和四环素完全耐药;经16S rRNA测定,它们与粪肠球菌ATCC29212同源性在99.6%～99.8%之间,与GenBank公布的NC_004668、AJ301831的核苷酸同源性为99.7%～99.9%和99.5%～99.7%;通过对它们2种毒力表型和携带的6种主要毒力基因以及与对小鼠的LD50测定,发现5株粪肠球菌携带毒力基因不尽相同,携带全部6种毒力基因的HE1和HE5的致病力最强,而仅携带4种毒力基因的HE41致病力最小。用HE1和HE5分离菌对20日龄的断奶仔猪分别进行攻毒,2菌株均能引起仔猪的感染发病。     

猪细小病毒SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法的建立

利用PCR技术扩增出猪细小病毒VP2保守区基因194 bp片段,并克隆到pGEM T载体上,纯化质粒作为PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释质粒为标准模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了猪细小病毒的荧光定量PCR检测方法.该方法检测灵敏度可达1.0×102拷贝/μL,与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒、猪乙型脑炎病毒、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒和猪流感病毒不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性;对10份疑似病料和阴性病料进行了检测,发现10份均为荧光定量PCR阳性,而常规PCR只能检测出7份阳性.结果表明,建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床猪细小病毒(PPV)的检测.     

猪传染性胃肠炎病毒SYBR-Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立

为了建立猪传染性胃肠炎病毒SYBR-Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法,利用RT-PCR技术扩增出猪传染性胃肠炎病毒N基因中324 bp的片段,并克隆到pGEM-T Easy栽体上,纯化的质粒作为模板进行SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了猪传染性胃肠炎病毒的荧光定量PCR检测方法.该方法...     

猪传染性胃肠炎病毒SYBR-Green I荧光定量PCR检测方法的建立

为了建立猪传染性胃肠炎病毒SYBR-Green I荧光定量PCR检测方法,利用RT-PCR技术扩增出猪传染性胃肠炎病毒N基因中324 bp的片段,并克隆到pGEM-T Easy载体上,纯化的质粒作为模板进行SYBR Green I荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了猪传染性胃肠炎病毒的荧光定量PCR检测方法.该方法检测灵敏度可达5×101拷贝数.μL-1,与猪伪狂犬病毒、猪蓝耳病毒、猪圆环病毒、猪瘟病毒、猪细小病毒、猪乙型脑炎病毒均不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性.结果表明,建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床TGEVN基因的检测.     

某规模化奶牛场乳房炎发病规律的调查分析

为了解牛场奶牛乳房炎的发病情况及规律,2008年5月至2009年4月,采用SMT法对郑州市某奶牛场的424头奶牛进行乳房炎检测,并对检测结果进行分析。结果表明,乳房炎发病率与月份、乳区有一定的关系,气温偏高、多雨月份和季节转变月份发病率偏高,前乳区比后乳区偏高。同时,乳房炎发病率也与胎次、泌乳期和产奶量有显著的相关性,泌乳末期乳房炎发病率明显偏高;胎次增加,发病率增高;产奶量越高,发病率越低。通过对该奶牛场乳房炎发病规律的调查分析为本场预防乳房炎提供了依据。     

7种中草药提取物对猪链球菌的体外抑菌试验

为了观察中草药对猪链球菌的体外抑菌效果,将所选中草药按常规法制备水提取物、醇提取物,用试管2倍稀释法检测中草药水提物、醇提物对猪链球菌的体外抑菌作用。结果表明,所选7种中草药对猪链球菌均具有一定的抑菌作用,其中黄连醇提物的抗菌活性最强,仙鹤草、地锦草醇提物抗菌活性较强,板蓝根、马齿苋醇提物抗菌活性较弱。     

羊源链球菌的分离鉴定及致病性研究

从洛阳偃师某羊场单纯性流产羊的胎儿与羊水中分离到一株球菌，通过动物试验、细菌的形态特性、培养特性、生化特性等进行检测，确定为羊链球菌。同时对该细菌的耐药性进行检测，该菌对头孢噻肟、头孢唑啉极敏感，可作为治疗该病的首选药。     

零售鲜猪肉中肠球菌的鉴定与毒力基因检测

2007年～2008年间，分别从郑州市5个农贸市场鲜猪肉销售摊点采集了52份猪肉样品，经细菌分离得到30株疑似肠球菌，通过细菌形态学和培养特性的观察，并采用Vitek-32全自动细菌鉴定系统对其进行分析，最终鉴定为肠球菌，其中粪肠球菌(E. faecalis)16株、屎肠球菌(E. faecium)4株、铅黄肠球菌(E.casseliflavus)6株、鸟肠球菌(E.avium)2株、鹑鸡肠球菌(E. gallinarum )2株。药敏试验结果表明：肠球菌对呋喃妥因、万古霉素、替考拉宁和氨苄青霉素有较高的敏感性，对四环索、卡那霉素和红霉索的敏感性较低。经过对肠球菌6种公认的毒力基因cylA、gelE、efaA、ace、AS和esp的检测，发现分离株携带毒力基因不同，7号粪肠球菌携带6种，而12号屎肠球菌则全部为阴性，其它菌株则携带1～5种不等的毒力基因。     

氟乙酰胺中毒检验方法初步研究

以经口投服氟乙酰胺的健康鸡嗉囊和肌胃内容物为检材，以乙酸乙酯，二氯甲烷（１：２）为浸提剂对检材进行处理，用异羟肟酸－铁反应法初步进行快速检验，用硫靛反应及其产物的薄层层析法，可进一步提高其检出率，且不受杂质干扰，专一性强，定性可靠。