| 猪传染性胃肠炎病毒SYBR-Green I荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 李金磊,王亚宾,崔保安,陈丽颖,张红英,李珂珂,魏战勇.猪传染性胃肠炎病毒SYBR-Green I荧光定量PCR检测方法的建立[J].河南农业大学学报,2011(3). |
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| 作者姓名： | 李金磊 王亚宾 崔保安 陈丽颖 张红英 李珂珂 魏战勇 |
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| 作者单位： | 河南农业大学牧医工程学院; |
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| 基金项目： | 教育部博士点新教师基金项目(20104105120005); 河南省教育厅自然科学基金项目(2010A230007) |
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| 摘 要： | 为了建立猪传染性胃肠炎病毒SYBR-Green I荧光定量PCR检测方法,利用RT-PCR技术扩增出猪传染性胃肠炎病毒N基因中324 bp的片段,并克隆到pGEM-T Easy载体上,纯化的质粒作为模板进行SYBR Green I荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了猪传染性胃肠炎病毒的荧光定量PCR检测方法.该方法检测灵敏度可达5×101拷贝数.μL-1,与猪伪狂犬病毒、猪蓝耳病毒、猪圆环病毒、猪瘟病毒、猪细小病毒、猪乙型脑炎病毒均不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性.结果表明,建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床TGEVN基因的检测.
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| 关 键 词： | 猪传染性胃肠炎病毒 N基因 SYBR-Green I 荧光定量PCR |
Development of SYBR-Green I real-time quantitative PCR assay for detection of transmissible gastroenteritis virus |
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| LI Jin-lei,WANG Ya-bing,CUI Bao-an,CHEN Li-ying,ZHANG Hong-ying,LI Ke-ke,WEI Zhan-yong.Development of SYBR-Green I real-time quantitative PCR assay for detection of transmissible gastroenteritis virus[J].Journal of Henan Agricultural University,2011(3). |
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| Authors: | LI Jin-lei WANG Ya-bing CUI Bao-an CHEN Li-ying ZHANG Hong-ying LI Ke-ke WEI Zhan-yong |
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| Institution: | LI Jin-lei,WANG Ya-bing,CUI Bao-an,CHEN Li-ying,ZHANG Hong-ying,LI Ke-ke,WEI Zhan-yong(Engineering College of Animal Husbandry and Veterinary Science,Henan Argricultural University,Zhengzhou 450002,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | transmissible gastroenteritis virus N gene SYBR-Green I real-time quantitative PCR assay |
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