家兔氟乙酰胺中毒的试验研究

采用茶氏反应，硫靛反应和硫靛反应产物的薄层层析法对家兔进行氟乙酰胺中毒的试验研究。结果表明，家兔的最小中毒量在０．５－１．０ｍｇ．ｋｇ＾－１最小致死量为１０ｍｇ．ｋｇ＾－１一氟乙酰胺的最低检出量为２０ｍｇ．ｋｇ＾－１，在所采用的３种方法中，以硫靛反应产物薄层层析法检出率最高。     

携肠球菌Ace抗原的铁蛋白纳米粒制备与免疫效果检测

为制备携肠球菌胶原蛋白黏附素Ace抗原表位的铁蛋白纳米颗粒,并评价其免疫效果,利用生物信息学软件预测Ace抗原表位,合成相应的基因片段,分别构建含有相应抗原表位基因与铁蛋白H亚基基因的融合表达载体,同时构建融合表达Ace蛋白和H亚基的质粒pET-32a-ace-H,分别转入大肠杆菌中进行融合表达。利用Western blot鉴定各重组融合蛋白的反应原性,并利用透射电镜观察目的蛋白表征。用重组铁蛋白纳米颗粒分别制备免疫原进行家兔接种试验,并定期检测家兔血清特异性抗体水平。结果显示,正确构建了6个Ace蛋白抗原表位基因与H亚基基因的融合表达载体pET-32a-ace1-H～pET-32a-ace6-H,其中pET-32a-ace1-H、pET-32a-ace3-H、pET-32a-ace5-H和pET-32a-ace6-H为可溶性表达载体。Western blot检测显示可溶性表达的4种融合蛋白均具有较好的反应原性。透射电镜图像显示,4种融合蛋白均形成了具有中空结构的铁蛋白纳米笼,其直径与天然铁蛋白类似;而融合蛋白Ace-H纳米笼没有中空结构,且直径比天然铁蛋白大。家兔免疫试验结果显示,6种融合蛋白均在家兔体内诱导产生了特异性抗体,而且,携带单个Ace表位的铁蛋白纳米颗粒Ace1-H、Ace3-H、 Ace5-H与携带多表位的Ace重组蛋白以及Ace-H纳米颗粒相比,其诱导的抗体效价和消长规律均一致,其中以铁蛋白纳米粒Ace5-H的免疫效果为最佳。本研究结果表明铁蛋白纳米颗粒能有效增强蛋白质抗原的免疫原性,有望作为候选表位疫苗佐剂得到应用。     

猪源粪肠球菌菌毛亚单位蛋白多抗对其生物被膜形成及黏附侵袭作用的影响

以猪源粪肠球菌N9、N41为受试菌株,探究了粪肠球菌N9、N41的生物膜形成能力和对猪肠上皮细胞(IPEC-J2)的黏附侵袭能力,然后与重组亚单位蛋白(Ebp)的多克隆抗血清及纯化IgG作用,分别测定其生物膜的形成量、对猪肠上皮细胞(IPEC-J2)的黏附侵袭能力。结果表明,多抗IgG EbpA1、EbpC1和EbpA3对生物被膜的形成有阻断作用(P0.05),且EbpA1的阻断作用最强,其次是EbpC1。6个蛋白片段的多抗血清对细菌黏附、侵袭细胞均有一定的阻断作用,但血清EbpA1和EbpC1对菌株的黏附侵入阻断能力最强,且对N41菌株黏附、侵袭细胞的阻断能力强于N9菌株;6个纯化多抗IgG的黏附、侵入阻断作用基本同多抗血清的作用。这说明重组亚单位蛋白EbpA1和EbpC1可诱导试验动物机体产生相对应的特异性抗体,且在体外试验中具有明显的免疫保护作用。     

猪源粪肠球菌和屎肠球菌多重PCR快速鉴定方法的建立

粪肠球菌和屎肠球菌是引起猪感染发病的优势肠球菌种,以肠球菌的16S rRNA基因设计属特异性引物,利用SodA基因多态性设计种特异性引物,同时优化反应条件,建立了能同时测定猪源粪肠球菌和屎肠球菌多重PCR方法。通过特异性和敏感性分析,该方法能扩增出肠球菌属特异性片段及粪肠球菌和屎肠球菌种特异性片段;对粪肠球菌敏感性为0...     

自家苗对猪传染性胸膜肺炎的防制试验报告

1　发病情况河南省某猪场年出栏生猪 1 .2万头左右。2 0 0 2年 3月份 ,该场所在地区的气温较高 ,4月中旬气候骤变 ,阴雨连绵、气温大幅度下降 ,持续至5月。而 4月份该场保育舍 40日龄左右的仔猪开始出现高烧、咳嗽、渐进消瘦、拉稀 ,起初疑为肺炎、大肠杆菌病 ,药物治疗无效 ,死亡率 1 0 %。2　临床症状病猪精神沉郁、咳嗽、呕吐 ,体温 40～ 41℃ ,眼结膜潮红 ,四肢内侧、脐部有紫斑 ,拉黄色稀粪、渐进性消瘦、衰竭死亡。少数猪不出现明显症状、死亡快 ,死亡后无尸僵、鼻孔带血有泡沫 ,四肢末梢发紫。3　剖检症状胸腹腔有黄色积液 ,心脏、肺…     

葡萄酒市场学研究型教学实践

讨论了研究型教学模式的核心理念,介绍了葡萄酒市场学研究型教学实践的措施,并提出了研究型教学应该注意的几点建议。     

肠球菌主要毒力基因多重PCR方法的建立与应用

根据GenBank公布的基因序列,分别针对肠球菌属及其毒力基因cylA、esp和AS设计合成了4对引物。通过改进模板DNA提取方法和优化反应条件,建立了可以同时测定肠球菌和其携带的3种主要毒力基因的多重PCR方法。经过对不同来源的疑似肠球菌分离株进行检测,该多重PCR方法具有快速、可靠的特点。在不同来源的疑似肠球菌菌株中,临床感染分离株携带上述3种毒力基因的比例均高于鲜肉分离株和粪便分离株（分别为84．2％、55．7％和27．1％）;而且在各种来源肠球茵菌株中这3种毒力基因的携带率以cylA最高。     

猪流感病毒毒株感染对猪外周血淋巴细胞炎性因子转录时相的影响

试验用猪流感病毒（Swine influenza virus,SIV）（毒株）体外感染猪外周血淋巴细胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC）,利用real—timePCR方法对病毒感染不同时间细胞中的病毒量和炎性细胞因子mRNA表达量进行检测。结果显示,感染后1h就可检测到病毒,但病毒量相对较小;在24h时病毒开始大量增殖;在72h病毒量达到最高峰,为1h时20倍以上。IL-1βmRNA的表达量在48h增加到最高;IL-6mRNA的表达量在感染后1h内显著增加;IL-8mRNA的表达量在12h时达到最大量;IL-12P35mRNA的表达量在72h迅速上升,为对照的56．1倍;IL-12P40mRNA的表达量在1～2h表达量较高;IL-13在72h达到最大值,为对照的30．7倍;IL-17mR—NA的表达量在72h达到最大值,为对照的4．9倍;IL-18mRNA的表达量在12h达到对照的1．9倍。结果表明,SIV感染PBMC后,随着病毒的大量复制,多种炎性细胞因子表达量显著增加。     

肉牛运输前后牛源肠球菌的分离鉴定及其耐药基因检测

为探讨肉牛运输应激综合征的潜在致病菌,本试验采集肉牛运输前后的粪便和血液,针对牛源肠球菌进行分离鉴定、药敏试验和耐药基因检测。结果检出45株肠球菌（粪便中34株,血液中11株）,且对克林霉素等不敏感,其中携带耐药基因aac（6’）／aph（2＂）阳性菌株14株（阳性率31.1%）和ant（6）-Ⅰ的阳性菌株9株（阳性率20%）。表明肉牛经过长途运输后易被携带耐药基因的肠球菌侵入。