关于高校毕业生就业指导的创新性探讨

目前国内的就业形势面临就业压力大,就业难的普遍问题,尤其是各大高校的应届毕业生,在走进职业生涯前诚惶诚恐,没有做好充分的准备。本文结合大学生就业指导的现状给予简要的分析,并针对目前的状况给出一些具有创新意义的思路。     

携肠球菌Ace抗原的铁蛋白纳米粒制备与免疫效果检测

为制备携肠球菌胶原蛋白黏附素Ace抗原表位的铁蛋白纳米颗粒,并评价其免疫效果,利用生物信息学软件预测Ace抗原表位,合成相应的基因片段,分别构建含有相应抗原表位基因与铁蛋白H亚基基因的融合表达载体,同时构建融合表达Ace蛋白和H亚基的质粒pET-32a-ace-H,分别转入大肠杆菌中进行融合表达。利用Western blot鉴定各重组融合蛋白的反应原性,并利用透射电镜观察目的蛋白表征。用重组铁蛋白纳米颗粒分别制备免疫原进行家兔接种试验,并定期检测家兔血清特异性抗体水平。结果显示,正确构建了6个Ace蛋白抗原表位基因与H亚基基因的融合表达载体pET-32a-ace1-H～pET-32a-ace6-H,其中pET-32a-ace1-H、pET-32a-ace3-H、pET-32a-ace5-H和pET-32a-ace6-H为可溶性表达载体。Western blot检测显示可溶性表达的4种融合蛋白均具有较好的反应原性。透射电镜图像显示,4种融合蛋白均形成了具有中空结构的铁蛋白纳米笼,其直径与天然铁蛋白类似;而融合蛋白Ace-H纳米笼没有中空结构,且直径比天然铁蛋白大。家兔免疫试验结果显示,6种融合蛋白均在家兔体内诱导产生了特异性抗体,而且,携带单个Ace表位的铁蛋白纳米颗粒Ace1-H、Ace3-H、 Ace5-H与携带多表位的Ace重组蛋白以及Ace-H纳米颗粒相比,其诱导的抗体效价和消长规律均一致,其中以铁蛋白纳米粒Ace5-H的免疫效果为最佳。本研究结果表明铁蛋白纳米颗粒能有效增强蛋白质抗原的免疫原性,有望作为候选表位疫苗佐剂得到应用。     

猴源cathepsin基因shRNA文库及其稳定敲减细胞系的构建

目前关于组织蛋白酶(cathepsin)在猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)生活周期中发挥功能的研究较少。为了探究宿主细胞中cathepsin在PRRSV吸附、入侵、脱壳、生物合成、组装以及释放过程中的作用,选取源于MA-104的非洲绿猴胚胎肾上皮细胞Marc145细胞系(对PRRSV易感);利用RNAi原理,构建了以pLKO.1为载体的cathepsin基因shRNA文库;并用puromycin筛选出稳定敲减cathepsin的细胞株。结果显示:本试验构建的cathepsin-shRNA文库包含45个克隆,涉及15种cathepsin基因,筛选出的稳定细胞株中相应cathepsin基因mRNA的表达量均有显著下降。这些细胞株的构建为进一步研究cathepsin在PRRSV生活周期中发挥的重要功能奠定了基础。     

猪cripto促进C2C12细胞分化

应用分子生物学方法、荧光显微镜和实时荧光定量PCR技术,对cripto基因进行克隆、真核表达载体的构建,探讨cripto对C2C12细胞生长增殖的影响和肌细胞分化相关基因MyoD、MyoG、P21、MHC的表达变化。结果显示,phiC31-cripto真核表达载体构建成功,荧光显微镜下可见转染phiC31载体和cripto基因共转染的C2C12细胞表达强烈的绿色荧光,且对细胞的生长增殖无显著性影响;Q-PCR检测MyoD、MyoG、P21、MHC结果证实,猪cripto可以促进细胞分化因子MyoD、MyoG、P21、MHC的表达。结果表明,本试验成功地构建了C2C12-phiC31-cripto过表达细胞系,Q-PCR结果分析发现cripto基因可以促进肌肉分化,为进一步探索cripto基因在肌肉分化中的分子机制提供理论依据。     

猪CD151基因的克隆及过表达细胞系的构建

猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)主要感染猪肺泡巨噬细胞,但对猪源的其他细胞系不易感。本试验通过构建PK15-CD151和3D4/21-CD151过表达细胞系,为深入研究PRRSV感染宿主细胞的机制奠定基础。应用分子生物学方法、实时荧光定量PCR和荧光显微镜技术,对基因CD151在组织中的分布情况进行检测、基因克隆、真核表达载体的构建、对CD151在PK15和3D4/21细胞内的过表达情况,以及对细胞生长增殖的影响进行了研究。结果显示:CD151基因在不同组织内均有表达,但表达量有差异;PB真核表达载体构建成功,荧光显微镜下可见转染PB载体和CD151基因共转染的PK15和3D4/21细胞表达强烈的绿色荧光,实时荧光定量PCR分析结果进一步证实,CD151在转染后的细胞中获得超表达,并且对细胞的生长增殖无影响。本试验成功构建了PK15-CD151和3D4/21-CD151过表达细胞系,过表达细胞系的成功构建为进一步探索CD151在PRRSV感染细胞过程中的协同作用提供了细胞模型,特别是对深入研究PRRSV的入侵及宿主识别具有重要意义。     

荷斯坦公犊牛生产小牛肉的研究进展

国外利用荷斯坦公犊牛乳饲、谷饲生产小牛肉的技术已经十分成熟,为满足我国消费者对高档牛肉日益增长的需求,借鉴国内外经验技术,合理利用我国丰富的奶公犊资源生产高附加值牛肉,既能提高奶牛养殖经济效益又能解决我国高档牛肉进口量逐年增加的问题。现从小牛肉的分类、荷斯坦公犊牛生产小牛肉品质的影响因素、生产犊牛白肉的犊牛代乳品研究、生产犊牛红肉的饲料日粮研究四方面展开综述,以期为我国利用荷斯坦公犊牛生产小牛肉技术提供参考。     

氟中毒对小鼠肾脏ROS、MDA和GSH含量的影响

为了研究氟中毒对小鼠肾脏活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量的影响,并研究添加GSH后是否有缓解作用,试验建立氟化钠(NaF)+GSH模型,将50只小鼠分为对照组、100 mg/L NaF组、100 mg/L NaF+200 mg/kg GSH组、100 mg/L NaF+400 mg/kg GSH组和100 mg/L Na F+800 mg/kg GSH组,饲养结束后断颈处死小鼠,采集肾脏测定ROS、MDA和GSH含量。结果表明:与对照组比较,100 mg/L Na F可极显著增加肾脏MDA含量,降低GSH含量(P 0. 01);加入GSH后,与100 mg/L NaF组比较,100 mg/L NaF+800 mg/kg GSH组的GSH含量显著增多(P0. 05);而对于ROS,氟摄入和添加GSH均未发现明显变化(P0. 05)。说明添加GSH可以缓解氟中毒引起的肾脏损伤。     

猴源rab基因shRNA文库及其稳定细胞株的构建

为揭示Rab蛋白在猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)入侵进入宿主细胞后的功能,本研究以PRRSV易感的猴胚胎肾上皮细胞Marc-145为模型,构建了针对猴源rab基因的短发夹RNA(shRNA)文库。此文库中的shRNA以pLKO.1为载体质粒,与pMD2.G和psPAX2包装质粒共同转染HEK293T/17细胞,获得慢病毒;利用慢病毒感染Marc-145,通过puromycin筛选获得稳定抑制猴源rab基因表达的细胞株。通过荧光定量PCR方法检测各细胞株中rab基因的敲减效率。本试验构建的文库包含187个克隆、涉及62种rab基因。荧光定量PCR结果证明,筛选出的稳定细胞株中相应rab基因mRNA的表达量均有显著下降。结果显示本试验成功构建了猴源rab基因shRNA文库并筛选出了稳定细胞株,可用于后续进一步研究Rab蛋白在PRRSV生活周期中发挥的重要功能。     

利用荷斯坦阉牛生产大理石纹牛肉的研究

本文主要从荷斯坦牛肌内脂肪沉积相关基因的研究入手,主要阐述荷斯坦牛大理石纹的影响因素,去势对荷斯坦牛肉品质(大理石纹和牛肉嫩度)影响及营养(营养浓度和维生素A成分)调控对荷斯坦阉牛肌内脂肪沉积的影响展开综述,以期为利用荷斯坦阉牛生产大理石纹牛肉提供参考。