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| 猪细小病毒SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法的建立 | |
| 引用本文： | 李明凤,魏战勇,王学斌,张红英,王亚宾,崔保安.猪细小病毒SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法的建立[J].浙江农业学报,2009,21(3). |
| 作者姓名： | 李明凤 魏战勇 王学斌 张红英 王亚宾 崔保安 |
| 作者单位： | 1. 河南农业大学,牧医工程学院,河南,郑州,450002;河南省动物性食品安全重点实验室,河南,郑州,450002 2. 河南农业大学,牧医工程学院,河南,郑州,450002 3. 河南省动物性食品安全重点实验室,河南,郑州,450002 |
| 基金项目： | 河南省杰出科研人才创新工程项目 |
| 摘 要： | 利用PCR技术扩增出猪细小病毒VP2保守区基因194 bp片段,并克隆到pGEM T载体上,纯化质粒作为PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释质粒为标准模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了猪细小病毒的荧光定量PCR检测方法.该方法检测灵敏度可达1.0×102拷贝/μL,与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒、猪乙型脑炎病毒、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒和猪流感病毒不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性;对10份疑似病料和阴性病料进行了检测,发现10份均为荧光定量PCR阳性,而常规PCR只能检测出7份阳性.结果表明,建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床猪细小病毒(PPV)的检测. |
| 关 键 词： | 猪细小病毒 实时定量PCR 标准曲线 |
Development of SYBR Green Ⅰ real-time PCR assay for detection of porcine parvovirus |
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| LI Ming-feng,WEI Zhan-yong,WANG Xue-bin,ZHANG Hong-ying,WANG Ya-bin,CUI Bao-an.Development of SYBR Green Ⅰ real-time PCR assay for detection of porcine parvovirus[J].Acta Agriculturae Zhejiangensis,2009,21(3). | |
| Authors: | LI Ming-feng WEI Zhan-yong WANG Xue-bin ZHANG Hong-ying WANG Ya-bin CUI Bao-an |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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