新疆野苹果S基因特异性PCR体系优化

[目的]构建适合新疆野苹果自交不亲和基因的PCR扩增程序的优化体系.[方法]采用单因素比较试验,对影响S-RNase基因PCR反应体系的6个主要因素进行梯度扩增.[结果]在20μL的PCR总反应体系中,Mg2+的最适浓度为2.5 mmol/L,dNTP的最适浓度为0.2 mmol/L,引物的最适浓度为0.5mmol/L,TaqDNA聚合酶的最适用量为0.75 U,模板DNA的最适用量为800 ng,最适退火温度为49℃.[结论]利用优化的扩增体系在99个新疆野苹果都获得了有效扩增,证明该体系为进行新疆野苹果S基因PCR扩增的最佳体系,具有良好的稳定性.     

缙云山三种典型阔叶树光合生理特性研究

为研究缙云山三种典型阔叶树光合生理特性,并找出合适的光响应拟合曲线,通过测定自然条件下三种典型树种四川山矾（Symplocos setchuanensis）、四川大头茶（Gordonia acuminata）、白毛新木姜子（Neolitsea aurata）光合生理生态特征参数,采用修正直角双曲线模型、非直角双曲线模型对光响应曲线进行拟合,结果表明:（1）四川大头茶的光饱和点为1 048μmol/（m²·s）,光补偿点为3.25μmol/（m²·s）,四川山矾光饱和点为2337μmol/（m²·s）,光补偿点为5.48μmol/（m²·s）,白毛新木姜子光饱和点为1 164μmol/（m²·s）,光补偿点为4.62μmol/（m²·s）;（2）蒸腾速率表现为白毛新木姜子>四川大头茶>四川山矾,在相同光强下,白毛新木姜子比四川山矾蒸腾速率高0.6～0.7μmolCO₂/（m²·s）。四川山矾的耐光性最强,且可能为C4植物;对于有光抑制现象树种,修正直角双曲线模型在求光饱和点、最大净光合速率方面更具优势。     

利用地下海水进行海湾扇贝越冬的效果研究

把5cm以上海湾扇贝亲贝按43-50个／m^3密度吊养于水泥沉淀池,利用附近井水调温：使池水温度达4℃以上。越冬两个半月,成活率84％以上,而自然海区越冬贝成活率仅70％．升温促熟后．亲贝产卵孵化率60％以上,而自然海区越冬贝仅为15．1％。地下海水越冬贝的单位水体出苗量为505万粒／m^3和544万粒／m^3,而自然海区越冬贝出苗量仅有209万粒／m^3．证明利用地下海水调温,在沉淀池进行海湾扇贝亲贝越冬,效果明显,完全可行．     

上海近代里弄住宅绿化现状调查研究——以静安、徐汇和卢湾区为例

里弄,作为上海最具本土特色的居住类型,具有重要的历史和文化价值.对里弄绿化进行研究,是为了更完整地保留这份文化遗产,弥补同领域研究的不足,同时为改善现存里弄绿化环境提供理论依据.本研究对上海市三个行政区中的9处代表性里弄住宅绿化现状进行调查,还原绿化种植平面图,并从种植区域、植物配置形式、树种和绿化率等方面进行分析归纳,从而得出里弄住宅绿化的演变规律,即从无到有、从散点带状布置到集中绿地、从封闭到开放等特点.进而分析里弄住宅绿化的影响力,最后对进一步研究给予展望.     

淡水养殖珍珠对常德市水体主要水质因子的影响研究

[目的]探讨淡水养殖珍珠对常德市水体主要水质因子的影响。[方法]选取4个珍珠池塘养殖水面进行跟踪调查研究,对水体中的透明度、pH值、溶解氧、总氮、总磷、化学耗氧量、生化需氧量等水质因子进行测定。[结果]5～9月是三角帆蚌的快速生长时期,随着其生命活动增强,可使水体透明度增加,其增加幅度达96．4％,使水体中总氮、总磷、化学耗氧量、生化需氧量含量明显下降,分别下降67．2％、67．2％、40．3％和24．6％。[结论]淡水养殖珍珠可明显起到了控制水体富营养化的作用。     

川茶产业发展的技术需求及对策措施

四川是茶树原产地之一,是有文字记载的最早人工种茶的地方,也是茶叶饮用、加工、贸易及茶文化的发源地。四川茶叶历来以数量大、品名多、分布广、品质好、声誉高而著称,自古就有“蜀土茶称圣”的美誉。     

缙云山针阔混交林土壤呼吸速率对降水输入量变化的响应

为探讨亚热带季风性湿润气候地区降水对土壤呼吸的影响,于2014年选取重庆市缙云山自然保护区内针阔混交林为研究对象,通过人为拦挡和增水方式模拟不同降水输入量对土壤呼吸速率的影响,包括达到土壤含水量的70%(增水70%,70%A),100%(增水100%,100%A),130%(增水130%,130%A)及对照(CK)和零降水(Z)5种情况。结果表明:(1)不同降水处理下土壤呼吸速率日变化均呈单峰变化曲线,并在12:00—14:00之间达到最大值;其年内月变化也为单峰曲线,于8月份达到最大值,12月份达到最小值。(2)适当增水可以提高土壤呼吸速率与10cm深度土壤温度的Pearson相关性,但指数模型的拟合度以对照组最好,减水和过度增水都会减少其相关性;温度敏感性Q10值的变化情况与其相同。(3)土壤呼吸速率与10cm深度的土壤含水量的相关性总体很低,但明显受到土壤水分条件影响,除零降水处理表现为极显著正相关外,对照组几乎不相关,增水处理转为明显的负相关,尤其增水130%后呈显著负相关。(4)在研究地区的自然环境条件下,增水100%时提高了土壤呼吸速率,也扩大了其变化范围,减水明显降低了土壤呼吸速率。     

上海城市综合性公园运动专用场地游憩度评价体系构建——以康健园为例

游憩度是衡量城市综合性公园运动场地设计与管理水平的一个重要指标。本研究以科学性、针对性、可操作性、全面性和客观性为原则,确定13个公园的18个运动专用场地为调查对象,调查结果显示,上海综合性公园已开展的运动项目多样化程度较低,运动专用场地的游憩度不高。运用层次分析法和多指标综合指数法,从空间场地、配套设施和环境景观三个维度甄选13个指标构建游憩度评价体系,运用于康健园运动专用场地游憩度评价,得出运动专用场地游憩度应注重安全性和运动场地"公园化"的结论。本研究对同类和类似场地的规划设计具有参考价值。     

上海和东京儿童户外活动偏好与需求调查

了解儿童的户外活动偏好与需求,对于儿童户外活动空间设计具有重要意义。选取上海和东京两个现代化都市的1 400名儿童进行问卷调查,运用定性与定量、对比与归纳相结合的方法,从户外活动态度、时间、场所、项目与内容、活动伙伴层面,分析两地儿童的户外活动偏好;从活动时间长度、场地空间规模、场地与设施质量、活动安全性,以及植物等环境层面,分析两地儿童户外活动的满意度与需求。研究发现,超过80%的儿童都喜欢户外活动,但上海儿童对户外活动时长、活动空间规模等的满意度远低于东京儿童,本文阐述两地的共性与差异化及其原因,对上海儿童户外活动空间的建设给出建议。     

牛MEN1基因真核表达载体的构建及其表达分析

多发性内分泌腺瘤致病因子1 (multiple endocrine neoplasia Ⅰ,MEN1)参与乳腺发育与泌乳行为的调控.本研究克隆了牛(Bos taurus) MEN1基因(bMEN1)的全长cDNA,并在不同细胞中检测bMEN1mRNA及其编码蛋白menin的表达情况.根据GenBank中bMEN1基因序列,设计特异性引物,用qRT-PCR方法得到附带EcoR Ⅰ和HindⅢ酶切位点的bMEN1片段,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1-myc-his(A)中.体外转染物种同源性细胞牛乳腺上皮细胞(bovine mammary gland epithelial cell,MAC-T)和异源性细胞中国仓鼠(Cricetulus barabensis)卵巢细胞(Chinese hamster ovary cells,CHO)、小鼠(Mus musculus)成肌细胞(mouse myoblast cells,C2C12),利用qRT-PCR和Westem blot技术检测转染前后bMEN1 mRNA和蛋白menin的表达.双酶切和基因测序结果表明,成功构建了bMEN1基因的真核表达载体pcDNA3.1-myc-his-bMEN1.所建立的转染体系可以使目的基因bMEN1在3种不同细胞中成功表达mRNA和目的蛋白,转染后24 h都达到最高表达量,并达到极显著水平(P＜0.01),之后逐渐降低.其中,CHO细胞中的转染24 h后bMEN1 mRNA和menin蛋白的表达量分别是对照的28 415倍和5.65倍.本研究建立了bMEN1基因的真核表达载体及其转染体系,能够在不同细胞中成功表达,为体外研究MEN1基因对于乳腺的调节功能及其对于机体代谢的调节机制提供了一种工具和技术体系.