5种常见犬腹泻病毒基因芯片检测方法的建立

为建立一种简便、快速、高效的可同时区分犬腺病毒1型(canine adenovirus type 1,CAV-1)、犬腺病毒2型(canine adenovirus type 2,CAV-2)、犬冠状病毒(canine coronavirus,CCV)、犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)、犬细小病毒(canine parvovirus,CPV) 5种常见犬腹泻病毒的基因芯片诊断方法,本研究以CAV-1、CAV-2、CCV、CDV、CPV 5种犬腹泻病毒为靶病毒,根据NCBI上收录的病毒基因序列在其保守区域内设计引物,在此基础上根据变异区域设计针对每种病毒的探针2～3条,优化检测体系的各反应条件,确定该检测方法的特异性与敏感性,建立可同时区分5种病毒的基因芯片检测方法。结果显示,建立的基因芯片检测方法可同时检测以上述5种犬腹泻病毒,其中PCR的退火温度为55℃、延伸时间为1 min 15 s;探针与PCR产物的杂交温度40℃、杂交时间2.5 h时,该方法对CAV-1、CAV-2、CCV、CDV和CPV 5种病毒标准品的检测限分别为0.2 fg/μL、2 fg/μL、2 fg/μL、20 pg/μL和0.02 fg/μL,具有较高的灵敏性;同时对犬副流感病毒进行特异性试验,发现无阳性信号出现,具有较强的特异性;对14份临床腹泻样品检测结果显示,基因芯片方法对CAV-1、CAV-2、CCV、CDV和CPV 5种病毒的阳性检出率分别为28.57%、50.00%、64.28%、14.28%和85.71%,并且基因芯片检测方法的敏感性较PCR要高10～100倍。以上结果表明,本研究建立的基因芯片检测方法具有特异、敏感等特点,对临床中犬类混合感染病毒检测具有一定的诊断意义。     

禽致病性大肠杆菌外膜蛋白SDS-PAGE分析

提取4种血清型的禽致病性大肠杆菌外膜蛋白,进行SDS-PAGE分析,证明这些血清型的外膜蛋白主要由2条带组成,位于30～43KD.用血清型O78的免疫血清进行免疫印迹反应,结果显示,其与这4种血清型的外膜蛋白均发生反应,表明4种血清型的主要外膜蛋白不仅具有抗原性,而且具有交叉免疫性.     

水稻根区施用呋喃丹防治稻瘿蚊示范试验

1987年我站在标葱较严重的开山乡墙围村作秧田、大田根区施用呋喃丹防治稻瘿蚊示范试验,秧田8亩,大田50亩。 一、试验材料 1.农药:3％呋喃丹颗粒剂,25％杀虫双水剂。2.水稻品种:汕优63、64,威优64。 二、示范试验设计 1.,秧田根区亩施呋喃丹纯药100克(3％     

动物疫病防控创新策略

随着畜禽集约化养殖的发展,畜禽养殖规模不断扩大,养殖数量不断增多,导致畜禽疫病日趋复杂.在分析探讨中国当前动物疫病流行特点及防疫现状的基础上,应用科学发展观对中国当前动物疾病防控形势进行了全面分析,提出了以人为本、健全兽医管理制度、优化畜禽饲养模式、制定疫痛综合防控技术规范以及如何深入开展动物疫病研究、提升动物疫病防控能力的新思路.以促进畜牧业的经济效益、生态效益和社会效益得到全面发展.     

不同能量蛋白水平对贵阳瘦肉型生长育肥猪生产性能的影响

选取30(±1.5) kg、60.0(±1.5) kg和90.0(±1.5) kg贵阳杜长大(D×L×Y)生长肥育猪48头,分别饲喂不同能量蛋白水平的饲粮,测定各组平均采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)、料重比(F/G),并对结果进行比较、分析.研究结果表明,不同能量蛋白水平对贵阳30～60kg瘦肉型生长育肥猪ADG、ADFI和F/G影响显著;不同能量蛋白水平对贵阳60～90 kg瘦肉型生长育肥猪ADG、ADFI、F/G的影响显著;不同能量蛋白水平对贵阳90～120 kg瘦肉型生长育肥猪ADG影响不显著,对ADFI、F/G的影响显著;说明贵阳30～60、60～90、90～120 kg瘦肉型生长猪比较适宜的消化能和蛋白水平分别为:DE=14.82 MJ/kg,CP=17.92％;DE=13.91 MJ/kg CP=15.93％和DE=14.62 MJ/kg,CP= 14.84％;试验猪能量摄入量DEI(MJ/d)、粗蛋白摄入量CPI(g/d)与ADG(△W,g/d)的关系分别为:30～60kg,△W=74.984*DEI-66.062*CPI +93.95*(R2=0.972,P＜0.05);90～ 20kg,△W=-12.772* DEI +23.467*CPI +351.156*(R2=0.981,P＜0.05).     

不同水平的氨基酸对小香鸡免疫性能与抗氧化性能的影响

选取120只健康、体重相近、出栏前5周的商品小香鸡为试验动物,随机分为苏氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸4个处理,每周称重1次。屠宰时,每个重复选取具有代表性的公、母鸡各1只,进行翅下静脉采血,分别测定免疫指标、抗氧化性能指标。结果表明,3种水平的苏氨酸处理对小香鸡免疫、抗氧化性能之间的差异不显著;添加0.3%的异亮氨酸比添加0.1%的异亮氨酸能显著提高小香鸡抗氧化性能;添加0.2%的异亮氨酸比添加0.1%异亮氨酸能显著提高总蛋白含量;添加0.2%的缬氨酸较添加0.3%缬氨酸能显著提高GSH-PX活性;添加0.2%的缬氨酸与添加0.1%的缬氨酸相比,总蛋白含量显著提高;添加0.3%的缬氨酸与添加0.1%的缬氨酸、0.2%的缬氨酸相比,总蛋白含量差异不显著;添加0.2%的缬氨酸处理的球蛋白含量与添加0.1%的缬氨酸、0.3%的缬氨酸差异显著;苏氨酸处理组与亮氨酸处理组球蛋白含量差异极显著,异亮氨酸处理组与亮氨酸处理组球蛋白含量差异显著,但是缬氨酸处理组球蛋白含量与其他3组差异均不显著。     

长株潭城市群的土壤重金属分布特征

为长沙-株州-湘潭(长株潭)城市群的资源节约型和环境友好型实验区规划和建设特别是环境污染预警方面提供依据,在长沙-株洲-湘潭地区采集土壤样品60个,用聚类分析和相关分析方法对重金属Cd、Cr、Cu、Ni、Pb和Zn的空间分布特征、来源及污染程度进行分析。结果表明,长沙-株州-湘潭城市群土壤中Cd、Cr、Cu、Ni、Pb和Zn的平均含量分别为4.1mg/kg、59.8mg/kg、59.4mg/kg、29.9mg/kg、100.4mg/kg和281.5mg/kg。除Cu外,均超过该区域内的土壤背景值,Cd和Zn分别超标7.8倍和4.7倍,28.3%的样点处于重污染级;Cd、Cu、Ni、Pb、Zn两两之间均存在显著的相关性;长株潭城市群土壤的重金属污染,尤其是Cd污染的潜在风险应引起足够的关注。     

H1N1猪流感病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立

目的:建立H1N1猪流感病毒环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法。方法:从GenBank中获得H1N1猪流感病毒血凝素(HA)、神经氨酸酶(NA)基因序列,应用DNAStar软件MegAlign程序分析其序列,利用Primer ExplorerV4软件在序列保守区域设计LAMP引物,即外引物和内引物,同时以H1N1猪流感病毒的cDNA作为阳性模板,对试验中的几个反应条件进行优化。结果:LAMP检测方法对H1N1猪流感病毒的灵敏度达到4～6个拷贝,其引物对于H9亚型禽流感病毒、猪瘟病毒和猪圆环病毒均无非特异性扩增,表现出良好的特异性。结论:建立的H1N1猪流感病毒环介导等温扩增快速检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,为快速检测猪流感病毒提供了新方法和新思路。     

猪场生物安全措施

当前养猪业可以说是高利润与高风险共存,疾病已成为决定养猪效益的一个关键性因素,谁能把病防好,谁养猪就成功了一大半.要把病防好,除了有良好的饲养管理和营养、合理有效的疫苗接种以及药物保健外,有效的生物安全措施尤为重要.