外源褪黑素处理方式对荷斯坦奶牛体内褪黑素富集与代谢的影响

为研究正常情况下经产荷斯坦奶牛24 h内血液中褪黑素浓度的变化情况,探索不同外源褪黑素处理方式对荷斯坦奶牛血液褪黑素浓度的影响,本研究采用颈静脉注射、颈部皮下注射、颈部皮下埋植和口腔灌服外源褪黑素等方式处理经产荷斯坦奶牛,观察血液中褪黑素浓度的变化情况并分析褪黑素在体内的分泌规律及代谢速率。结果显示,在24 h内,经产荷斯坦奶牛血液中褪黑素浓度变化明显,04：00浓度最高,为8.30 ng/mL,16：00浓度最低,为2.08 ng/mL。皮下埋植和口腔灌服外源褪黑素以后,血液中褪黑素浓度升高幅度较小;皮下注射46.4、4.64和0.464 mg褪黑素后,血液中褪黑素浓度迅速升高,1 h后达到峰值,分别为561.94、487.03、92.89 ng/mL,极显著高于注射前（P<0.01）;静脉注射46.4、4.64和0.464 mg褪黑素后,血液中褪黑素浓度迅速升高,0.5 h之后达到峰值,分别为767.68、639.19、110.56 ng/mL,极显著高于注射前（P<0.01）,高水平褪黑素可稳定持续48 h。本研究证明了荷斯坦奶牛体内褪黑素分泌有明显的昼夜节律性,静脉或皮下注射外源褪黑素可以迅速提高血液中褪黑素的浓度,且血液中褪黑素的代谢速度与褪黑素的浓度高度相关,随着血液中褪黑素浓度的增加,褪黑素的代谢速度明显加快。     

空肠弯曲菌PEB1A蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立

为了建立检测血清中空肠弯曲菌（Campylobacter jejuni）抗体的间接ELISA方法,试验通过PCR扩增并克隆空肠弯曲菌PEB1A基因,构建原核表达载体pET32a-PEB1A,将该表达载体转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,诱导表达获得约47 ku的可溶性目的蛋白,通过Western blotting证明所表达的重组蛋白具有良好的生物学活性。以纯化后的重组蛋白作为包被抗原,建立空肠弯曲菌抗体间接ELISA方法,对其特异性、敏感性、重复性进行检测。结果表明,本试验建立的空肠弯曲菌抗体间接ELISA检测方法临界值为0.3424,本方法仅与空肠弯曲菌阳性血清发生特异性反应,与其他抗血清无交叉反应,具有较强的特异性,批内、批间的重复性试验变异系数均<5%,具有较好的重复性和稳定性。该方法的建立可应用于血清中空肠弯曲菌抗体的快速检测,为进一步防制空肠弯曲菌腹泻提供依据。     

30～60kg生长猪磷需要量研究

本试验旨在研究饲粮磷水平对30 ～60kg生长猪生长性能、血清生化指标及胫骨性能的影响,探讨饲粮中磷的适宜需要量.试验采用单因子完全随机设计,将30头体重( 32.12±0.49) kg的“杜×长×大”生长猪随机分为5组,每组6个重复,每个重复1头猪,各组分别饲喂磷水平为0.38％(对照组)、0.43％、0.48％、0.53％、0.58％的玉米-豆粕型试验饲粮.预试期7d,正试期28 d.结果表明:1)与对照组相比,0.53％磷水平组平均日增重、平均日采食量极显著提高(P＜0.01),料重比极显著降低(P＜0.01);2)各试验组血清磷含量均极显著高于对照组(P＜0.01),0.53％磷水平组血清钙含量显著低于对照组(P＜0.05),各组血清胰岛素样生长因子-Ⅰ含量差异不显著(P＞0.05);3)随饲粮磷水平的提高,胫骨长度及胫骨钙、磷含量均呈现先升高再降低的趋势,当饲粮磷水平为0.53％时,各指标达到最大值,但差异不显著(P＞0.05);0.53％磷水平组胫骨脱脂烘干重显著高于对照组(P＜0.05),其他各组之间差异不显著(P＞0.05).综上所述,在本试验条件下,30 ～ 60 kg生长猪饲粮磷的适宜添加水平为0.53％.     

畜禽无公害化生产技术

食品的安全与质量问题关系到国民生活水平的健康发展，畜禽产品的卫生安全性正迅速成为国内消费者的首要追求，成为畜禽产品争夺国内外市场的第一商业要素。我国出口的畜禽产品，因“药物残留”问题多次发生被扣留、退货、索赔、终止合同等事件，造成的经济损失，占到我国农产品出口企业损失的95％：欧盟仍将中国最主要的出口产品猪肉和禽肉拒之门外。     

肠炎沙门菌C50336ZinT基因缺失株构建及其相关生物学特性

为研究锌调控蛋白ZinT在肠炎沙门菌致病中的作用,本试验利用λ-Red同源重组系统构建了肠炎沙门菌(C50336)ZinT基因缺失突变株(C50336ΔZinT),并对其生物学特性进行分析。结果显示,与野生型菌株和回复菌株相比,缺失株C50336ΔZinT在LB培养基中生长速度无明显差异,生化特性亦无明显变化,但其在Minimal培养基中生长明显变慢。此外缺失株C50336ΔZinT对H_2O_2处理和高渗环境的适应能力显著下降,但在巨噬细胞内的存活率无明显降低。动物试验表明,ZinT基因缺失突变株的毒力和野生型菌株相比仅有轻微下降。本试验探讨了ZinT与肠炎沙门菌锌摄取和毒力间的联系,为进一步阐释肠炎沙门菌感染致病机制奠定基础。     

酿酒酵母及EtpA酿酒酵母基因工程菌对大鼠小肠黏膜结构的影响

为了调查酿酒酵母及Etp A酿酒酵母基因工程菌对大鼠小肠黏膜生长发育状况的影响,120只健康断奶SD大鼠,随机分为空白对照组、酿酒酵母菌组、Etp A酿酒酵母基因工程菌组,分别灌胃生理盐水、酿酒酵母菌液、Etp A酿酒酵母基因工程菌液2 m L/只,持续28 d后连续3 d灌胃大肠杆菌菌液。分别取7、14、21和28 d及灌胃大肠杆菌后大鼠的十二指肠、空肠、回肠制作石蜡切片,HE染色,显微镜下观察,记录各段小肠绒毛的宽度、长度、隐窝深度及绒毛长度/隐窝深度比值(V/C)。结果显示:1)与空白对照组相比,酿酒酵母菌组及Etp A酿酒酵母基因工程菌组的十二指肠绒毛长度、V/C在第21和28天时均显著升高(P0.05);空肠绒毛长度、V/C在第28天均极显著升高(P0.01)同时隐窝深度显著下降(P0.05);回肠V/C在第28天显著升高(P0.05);各肠段绒毛宽度均无显著差异(P0.05)。2)灌胃大肠杆菌后,与Etp A酿酒酵母基因工程菌组相比,空白对照组及酿酒酵母菌组的空肠绒毛长度、V/C均极显著下降(P0.01);回肠V/C均显著下降(P0.05)。结果表明:酿酒酵母和Etp A酿酒酵母基因工程菌均可以促进肠道黏膜发育,提高消化吸收能力;Etp A酿酒酵母基因工程菌对肠道黏膜的保护作用更显著。     

小反刍兽疫病毒M蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

为制备鼠抗小反刍兽疫M蛋白多克隆抗体,提取小反刍兽疫病毒(PPRV,Nigeria 75/1疫苗株)总RNA,用RTPCR方法扩增M基因并克隆到pMD18-T载体中,以鉴定正确的质粒进行酶切,回收目的片段后克隆于原核表达载体PGEX-4T-1,获得重组质粒PGEX-4T-1-M,转化大肠杆菌Transetta(DE3)并进行诱导表达,优化诱导蛋白表达条件,放大培养收获目的蛋白,并进行纯化,用纯化后的目的蛋白制备免疫原免疫昆明鼠制备多克隆抗体,利用间接免疫荧光方法检测抗体的结合能力。结果成功扩增出大小约为1 005bp(去掉终止密码子)的PPRV M基因;并构建了真核表达载体PGEX-4T-1-M,经IPTG诱导后目的蛋白以包涵体的形式表达,蛋白表达的最优条件为37℃,0.4mmol/L IPTG诱导4h;用经Ni-NTA纯化后的重组蛋白3次免疫昆明鼠后成功获得了PPRV M蛋白鼠源多克隆抗体,间接免疫荧光试验显示该多克隆抗体能够特异性识别非变性全长M蛋白。     

春玉米测土施肥技术参数的研究

为了科学合理施肥,促进农业持续发展,通过采用田间试验、养分速测和常规分析相结合的方法,研究草甸黑土上春玉米的目标产量、百公斤经济产量所需养分量、土壤的供肥量、肥料利用率及土壤有效养分的校正系数等参数。结果表明,在草甸黑土上,春玉米目标产量为9945 kg/hm2;每形成100 kg春玉米籽粒需要吸收氮2.27 kg、五氧化二磷0.88 kg、氧化钾2.01 kg;草甸黑土在玉米的生育期可提供氮212.4 kg/hm2,五氧化二磷81.4 kg/hm2,氧化钾209.9 kg/hm2;土壤有效养分校正系数：氮素为0.49,磷素为1.20,钾素为0.37;而肥料利用率：氮肥为27.8%,磷肥为10.8%,钾肥为20.6%。这说明测土施肥技术的参数是确定施肥量的关键,这些参数受土壤肥力、气候条件等影响,各个参数经过田间试验校验之后,可长期在该土类测土施肥中应用。通过连续3年正常年份春玉米的产量估测的春玉米的目标产量是比较科学合理的。     

不同大豆品种对大鼠抗营养影响的比较

为比较2个不同栽培品种生大豆中抗营养因子对大鼠的影响,以50±2日龄Wister大鼠为实验动物,分别饲喂以吉林30、吉农7品种生大豆和膨化大豆粕(对照组)为主要蛋白源的日粮,测定生长性能,第30天解剖大鼠,颈静脉采血检测血液生理生化指标,内脏器官称重,制作肠道组织切片。结果表明:吉林30日粮组大鼠增重、料肉比、胰腺重量、小肠长度、小肠重量、空肠绒毛长度、空肠隐窝深度、白细胞、血浆尿素氮、谷丙转氨酶和总胆红质与对照组大鼠差异显著(P0.05),吉林30日粮组大鼠胰腺重量、空肠隐窝深度(JCD)比吉农7日粮组大鼠高29.1%、14.4%(p0.05)。吉林30做日粮对大鼠抗营养的影响大于吉农7。     

多赛特羊与蒙古羊微量元素、超氧化物岐化酶和氧自由基的比较

通过测定无角多赛特肉羊和蒙古羊血清、被毛中微量元素铜、锌、锰,血清中超氧化物岐化酶(SOD)和氧自由基(O-.)含量,发现2个品种羊春、秋季节血清、被毛中铜、锌、锰含量差异显著(P0.05);春、秋季节血清中T-SOD、CuZn-SOD、Mn-SOD、O-.含量差异显着(P0.05)。2个品种绵羊血清中Cu、Zn含量与CuZn-SOD含量呈正相关,T-SOD与O-.之间存在一定的相关性。该研究对引进肉用羊的饲养、育种及疾病防治等方面具有重要意义。