外源性核酸对感染IBDV雏鸡免疫功能和抗氧化能力的影响

300只20日龄健康海兰白雏鸡随机分为6组,Ⅰ组为对照组,Ⅱ～Ⅵ为试验组,Ⅱ、Ⅴ组饲料中分别添加0.1%核酸,Ⅲ和Ⅵ组分别添加0.2%核酸,Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组于27日龄感染传染性法氏囊病毒(IBDV),分别于30,33,36,39,42日龄心脏采血测定T淋巴细胞转化率,白细胞的吞噬率,SOD、GSH-Px和CAT活性,用流式细胞仪测定鸡脾脏T淋巴细胞亚群的变化;时处死雏鸡,测定免疫器官法氏囊和脾脏指数,观察其组织结构.结果表明,日粮中添加不同剂量的核酸均可提高T淋巴细胞转化率和T淋巴细胞数,法氏囊和脾脏的相对质量均明显增加,并能促进法氏囊和脾脏的快速发育,提高脾淋巴细胞中CD3+、CD4+和CD8+T细胞百分率,改变CD4+/CD8+比值促进对机体免疫系统的调控,增强白细胞的吞噬功能;可显著提高鸡血清中SOD、GSH-Px和CAT活性.IBDV感染组与病毒感染加核酸组之间上述指标差异显著,感染IBDV组可使上述指标明显下降,感染IBDV加核酸组的上述指标接近正常对照组,说明核酸能补偿IBDV对雏鸡免疫系统的抑制作用,具有一定的抗氧化能力,而且能促进雏鸡修复组织损伤.     

大豆异黄酮及其在水产动物营养中的应用

大豆异黄酮(Soybean Isoflavone, SIF)是一种由豆科类植物的子叶与胚芽所提取的化合物,它也是一种具有良好的免疫与抗氧化功能的饲料添加剂。它对畜禽的影响作用已经有较多的研究,但它对水产动物营养的研究还比较薄弱,限制了其作为功能添加剂应用于水产动物饲料中。本文主要综述了SIF对动物营养的影响并展望了它在水产动物营养中的应用,以期为合理的利用SIF优化水产动物饲料,提高利用效率,促进其生产性能而提供理论依据。     

猪肺巨噬细胞源IFN-λ1的分子克隆、表达与活性分析

Ⅲ型干扰素(interferon lambda,IFN-λ)在机体抗病毒固有免疫、适应性免疫、黏膜免疫及抗肿瘤免疫等方面发挥重要作用。本研究利用RT-PCR技术从猪肺巨噬细胞CRL2845中扩增获得猪IFN-λ1基因(pIFN-λ1),并进行遗传进化分析和信号肽预测;将含信号肽的pIFN-λ1基因分别克隆至真核表达载体pcDNA3.1中,通过常规的质粒转化、阳性菌落筛选、质粒提取及酶切鉴定,获得重组质粒pcDNA-pIFNλ1;利用脂质体转染CRL2845细胞,转染48h后通过qRT-PCR、Western blot、间接免疫荧光方法分析pIFN-λ1表达及胞内定位;收集转染细胞总RNA,通过qRTPCR方法分析OAS1、ISG15、PKR、IFITM3等干扰素刺激基因的表达,并利用含报告基因的痘病毒VTT-EGFP感染瞬时表达pIFN-λ1的CRL2845细胞,通过流式细胞术分析pIFN-λ1抗痘病毒效果。结果显示,成功在猪肺巨噬细胞中扩增获得pIFN-λ1基因,并在CRL2845细胞内成功表达;瞬时表达后选择性诱导OAS1、ISG15的表达,并可抑制约38%的痘苗病毒感染CRL2845细胞。结果表明,瞬时表达pIFN-λ1能选择性诱导部分干扰素刺激基因的表达,且具有抗病毒活性,为深入研究猪IFN-λ1在宿主抗病毒免疫和黏膜免疫中的作用机理及其应用奠定基础。     

猪脑微血管内细胞的原代分离培养与鉴定

探讨获取纯度较高的原代猪脑微血管内皮细胞的分离和培养方法。采用1月龄的三元杂交猪,通过两次酶消化、BSA和Percoll非连续梯度离心获得较纯的脑微血管段后,接种于涂布有鼠尾胶的培养瓶进行原代培养;相差显微镜观察细胞并进行纯化和传代,采用Ⅷ因子相关抗原免疫荧光检测法对培养的细胞进行鉴定。结果表明,培养24 h即可见细胞从贴壁的脑微血管段周围爬出,细胞呈短梭形,集落呈典型的"鹅卵石样",区域性单层生长,6~7 d内皮细胞开始融合,血管内皮细胞特异性标志物Ⅷ因子相关抗原表达阳性。说明本试验成功的培养出了纯度较高的脑微血管内皮细胞,为后续的体外血脑屏障模型的建立奠定了基础。     

不同栽培品种生大豆对大鼠生长性能和血液理化指标的影响

为比较吉林小粒6、吉林30、吉林45、吉农7、丰交7607栽培品种生大豆对大鼠的抗营养影响,通过检测生大豆中胰蛋白酶抑制因子(PI)和凝集素(Lectin)含量,并以50只50±2日龄Wister大鼠为实验动物,分别饲喂5个品种生大豆为主要蛋白源的日粮,测定其生长性能,第30天宰杀大鼠时颈静脉采血,检测血液生理生化指标。结果表明:吉林30、吉林小粒6、丰交7607和吉农7的PI含量明显高于吉林45品种生大豆(P0.05),吉林小粒6Lectin含量明显高于吉农7、丰交7607、吉林45和吉林30品种生大豆(P0.01),生长性能各组间大鼠差异不显著(P0.05),吉林小粒6大鼠总胆红质含量(TBIL)与吉林45、丰交7607日粮组之间差异显著(P0.05)。各品种生大豆对大鼠抗营养影响为吉林小粒6吉林30丰交7607吉林45吉农7。     

长效干扰素

干扰素(Interferon,IFN)具有抗病毒、抗细胞增殖、免疫调节等极具医疗价值的功能,已经广泛应用于肝炎、多发性硬化症、结核病、布鲁菌病等病毒或细菌病.然而由于IFN在动物体内半衰期仅2～3h,不能完全发挥功效,所以基于研究开发长效IFN的临床需要,研究者们应用多种思维和方法展开工作,主要分为化学修饰法、物理修饰法和生物学修饰法.目前,这些方法都取得了一定的进展.本文综述了长效IFN的研究现状,并做出展望,以期对长效IFN的深入研究提供帮助.     

30种中草药对耐药性猪链球菌的抑菌试验

为了观察中草药对耐药性猪链球菌的体外抑菌效果,将所选中草药按常规法制备水提取物,用平板打孔法和试管两倍稀释法检测中草药水提取物对耐药性猪链球菌的抑菌作用.结果所选30种中草药中8种对上述病原菌有中度以上抑菌作用.其中以维吾尔草药V抑菌作用最强,其次是柴胡、吴茱萸、维吾尔草药U、诃子和石榴皮.结果表明所选部分中草药中对耐药性猪链球菌有较强的抑菌作用.     

葡萄糖对体外培养的牛脂肪细胞HSL mRNA和ADPN mRNA丰度的影响

在体外牛脂肪细胞培养介质中分别添加0,5,10,15,20,25 mmol/L等不同梯度的葡萄糖,各浓度组均设置3个重复,应用荧光定量PCR技术,观测不同浓度的葡萄糖对体外单层培养的牛脂肪细胞脂联素（ADPN）mRNA与甘油三酯脂肪酶（HSL）mRNA丰度的影响。结果表明,葡萄糖可抑制牛脂肪细胞ADPN mRNA的表达,并促进HSL mRNA的表达。     

蛋白A/G在PPR H蛋白ELISA中的应用研究

分别以山羊、绵羊和牛的阳性血清和阴性血清作为待检血清,分别以酶标蛋白A/G、酶标兔抗山羊抗体、酶标兔抗绵羊抗体和酶标兔抗牛抗体作为酶标二抗,进行以小反刍兽疫(PPR)裂解蛋白为抗原和基于抗血凝素(H)蛋白的单克隆抗体的PPRH蛋白酶联免疫吸附(ELISA)试验。结果四种酶标抗体均分别能使山羊、绵羊和牛阳性血清的百分抑制率达到100。在阳性血清百分抑制率为100时,检测山羊时酶标蛋白A/G、酶标兔抗山羊抗体的百分抑制率分别为17、12,检测绵羊时酶标蛋白A/G、酶标兔抗绵羊山羊抗体的百分抑制率分别为20、16,检测牛时酶标蛋白A/G、酶标兔抗牛抗体的百分抑制率分别为14、13。结果认为,酶标蛋白A/G而且与酶标抗抗体相比,具有本底低的优点,在PPRH蛋白ELISA试验中可以同时应用于检测山羊、绵羊和牛血清并具有较好效果。     

初情期启动过程中小尾寒羊下丘脑GnRH基因甲基化状态及表达量关系研究

初情期启动的早晚关系到雌性动物的繁殖性能,GnRH是动物初情期启动过程中的关键基因,其启动子区甲基化状态与GnRH mRNA表达量之间的关系尚不清楚。本研究选择初情期前、临近初情期和初情期雌性小尾寒羊的下丘脑作为样本,利用亚硫酸氢盐测序(BSP)技术和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测了初情期不同阶段小尾寒羊GnRH启动子区的甲基化状态和GnRH mRNA的表达量,并分析二者之间的关系。结果表明:小尾寒羊到达初情期时,GnRH基因启动子区甲基化水平显著降低(P0.05),尤其是在启动子区-570位点降低最明显,而随着初情期的启动GnRH mRNA表达量呈上升趋势。结果提示,初情期启动过程中,GnRH mRNA表达量升高可能与下丘脑GnRH基因启动子区特定位点甲基化水平降低存在一定的关系。