ST融合蛋白的酵母表面展示及其对大鼠小肠黏膜结构的影响

本试验旨在获得能够将大肠杆菌ST融合蛋白展示在酿酒酵母表面的重组酿酒酵母基因工程菌并探究其对大鼠小肠黏膜结构的影响。将estA和estB基因克隆至pYD1质粒中,构建重组质粒pYD1-estA-estB,应用酵母表面展示技术获得EBY-100/pYD1-estA-estB重组酵母基因工程菌。选取36只SPF级SD大鼠,随机分为空白对照组、工程菌组、酵母菌组,分别灌胃生理盐水、工程菌菌液、酿酒酵母菌菌液,持续灌胃21d后连续3d灌胃大肠杆菌H10407菌液,取各组大鼠的十二指肠、空肠、回肠制作切片,观察各段小肠绒毛的长度、宽度、隐窝深度及绒毛长度/隐窝深度(V/C)进行统计分析。利用ELISA、real-time PCR技术观察肠道黏膜中的SIgA、IL-2、IL-4和IFN-γ含量变化。结果显示,通过免疫荧光试验证明大肠杆菌ST融合蛋白成功在酿酒酵母表面展示;灌胃21d时,与空白对照组相比,工程菌组及酵母菌组的十二指肠绒毛长度、V/C值显著升高(P0.01),工程菌组绒毛宽度显著升高(P0.05);空肠绒毛长度、V/C值显著升高(P0.01),隐窝深度显著下降(P0.05);工程菌组和酵母菌组的回肠绒毛长度及V/C值显著升高(P0.01)。灌胃大肠杆菌后,各组与灌胃前相比,空白对照组及酵母菌组的十二指肠与空肠绒毛长度、V/C值显著下降(P0.01),空肠隐窝深度显著升高(P0.01),回肠V/C值显著下降(P0.01);工程菌组无明显变化。灌胃21d,工程菌组与酵母菌组的SIgA、IL-2、IL-4和IFN-γ含量均显著高于空白对照组(P0.01);攻毒大肠杆菌后,空白对照组及酵母菌组的SIgA、IL-2和IL-4含量均显著下降(P0.01),各组的IFN-γ含量显著升高(P0.01)。结果表明,EBY-100/pYD1-estA-estB重组酵母基因工程菌不仅具有酵母菌的益生作用,能促进小肠黏膜发育,而且对产肠毒素大肠杆菌引起的肠道黏膜损伤有一定的保护作用。本试验为新型微生态制剂的研发提供依据。     

不同能量结构全混合颗粒日粮对育肥羊生长性能和胴体品质的影响

试验旨在研究不同能量结构全混合颗粒日粮对育肥羊生长性能和胴体品质的影响。选取健康状况良好、90日龄、体重(20.98±2.06)kg的断奶小尾寒羊雄羔羊24只,随机分为6组,分别为A组、B组、C组、D组、E组、F组。6组分别饲喂等能等氮、不同淀粉水平、脂肪和糖的不同比例构成的全混合日粮。A组日粮为在30%淀粉水平下含有3.04%脂肪和4.11%糖的全混合日粮,B组日粮为在30%淀粉水平下含有2.65%脂肪和4.63%糖的全混合日粮,C组为在26%淀粉水平下含有4.61%脂肪和4.11%糖的全混合日粮,D组为在26%淀粉水平下含有2.58%脂肪和6.36%糖构成的全混合日粮,E组为在22%淀粉水平下含有5.23%脂肪和4.49%糖的全混合日粮,F组为在22%淀粉水平下含有2.59%脂肪和7.54%糖的全混合日粮。饲养试验90 d,其中预试期10 d,正式试验期80 d,第0、20、40、60、80 d称重,试验第80 d进行屠宰试验。结果显示,在0~20 d时,A组、D组、F组平均日采食量(ADFI)显著高于B组(P<0.05);在0~20 d时,A组、D组、F组平均日增重(ADG)显著高于B组、C组(P<0.05),在80 d,E组高于B组(P<0.05);在0~20 d,A组、B组、D组、E组、F组料重比(F/G)显著低于C组(P<0.05),80 d时,B组显著高于E组(P<0.05)。表明在肉羊育肥的不同时期,采用适宜的能量结构全混合颗粒日粮能够更好地促进动物生长;提高脂肪水平可以改善动物的屠宰性能和肉品质。     

α-酮戊二酸对肥育猪生长性能、氮沉积及氮排放的影响

酮戊二酸(AKG)是连接碳和氮代谢的重要枢纽,对动物氮代谢具有重要作用。本试验旨在研究α-酮戊二酸对肥育猪生长性能、氮沉积及氮排放的影响。选取36头(54.21±2.95)kg杜×长×大杂交肥育猪,随机分到4个组,每组3个重复.每个重复3头猪。4个组分别饲喂添加0%(对照组)、0.5%、1.0%、1.5%的α-酮戊二酸的低蛋白(CP 10.99%)日粮。结果表明:添加α-酮戊二酸提高肥育猪的生长性能,氮沉积提高了10.42%,总氮排放量降低了26.16%。低蛋白日粮中添加1.0%和1.5%AKG可促进肥育猪生长,并有效降低血液尿素氮的含量,氮排放量可降低26.16%,氮沉积最高可提高10.42%。     

胰腺干细胞的研究进展

概述了胰腺干细胞的分布、胰腺的发生、胰腺干细胞的相关标记物以及胰腺干细胞的体外分离培养、增殖、分化等领域的研究进展，并对胰腺干细胞的生物学特征、体外分离培养时遇到的困难等进行了探讨，针对所遇到的困难提出了一些改进意见。     

辽宁绒山羊随机扩增多态DNA的研究

利用随机扩增多态DNA（RAPD）技术对辽宁绒山羊的遗传变异进行了分析，用37个随机引物和55个两两组合的随机引物组合进行筛选，筛选出了5个多态性较为丰富的随机引物（组合）。用这5个随机引物（组合）对35个个体进行扩增，据它们的RAPD指纹图计算了遗传变异度（0．2475）。     

猪圆环病毒2型(PCV2) Cap基因原核表达及抗血清制备

Cap蛋白作为猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)的重要结构蛋白,可以实现诱导机体免疫保护。以本实验室分离保存的PCV2毒株的Cap基因作为模板,设计特异性引物进行PCR扩增,并将该PCR产物连接至原核表达载体pET-28a上,获得重组质粒pET-28a-PCV2 Cap。将验证正确的菌种接入HB-pET自诱导培养基,过夜培养,SDS-PAGE及Western blot验证其表达,可获得28 000左右的目的蛋白。利用亲和层析技术纯化PCV2 Cap蛋白,免疫BALB/c小鼠获得小鼠阳性血清,通过ELISA方法检测其效价,并用Western blot验证其活性。结果显示,本试验成功应用大肠杆菌表达了PCV2 Cap蛋白,表达的蛋白具有免疫原性,并获得小鼠阳性血清,为PCV2 Cap蛋白的功能研究、鉴定、抗体及疫苗研制和病原检测奠定理论基础。     

鸡Slit2和Robo1基因mRNA组织表达特性分析

SLIT/ROBO信号通路在鸡的卵泡发育过程中发挥着重要作用,Slit2和Robo1基因是影响鸡产蛋性能的关键候选基因.本试验以大骨鸡和海兰白蛋鸡为供试素材,利用半定量RT-PCR方法对Slit2和Robo1基因在鸡不同组织中mRNA表达水平进行测定分析.结果显示,Slit2和Robo1基因mRNA在卵巢和输卵管等8种组织中均呈较广泛的分布(除在海兰白胸肌、腿肌中未检测到扩增条带外);Robo1基因mRNA相对表达量除在脾脏和肺脏组织中的表达水平相对较低(P＜0.01)外,在肝脏、卵巢和输卵管3种组织中的mRNA表达量均维持于较高水平(P＜0.01).虽然在被检各组织中的Slit2基因mRNA相对表达量存在一定的差异(P＜0.05),但在卵巢等其它7种组织中的表达水平均较高(除在海兰白肝脏组织中的表达较低外).在被检8种组织中Robo1和Slit2基因mRNA相对表达量在每一品种各分别呈现出基本一致的变化趋势.     

硫酸改性沸石中主要交换性阳离子动态变化研究

近年来天然沸石在农业中得到了广泛的应用.利用硫酸对天然沸石进行活化试验,通过对其1年的动态监测,分析沸石中对植物生长有重要影响的交换性K+、Ca2+、Mg2+、Na+以及阳离子交换量动态变化,以得到硫酸和沸石反应后各养分的动态变化,为改性后沸石生产农作物矿物肥提供理论依据.     

玉米秸秆低温纤维素分解菌的筛选及分解效果测定

在低温条件下,从腐烂的秸秆与土壤的混合样品中分离出降解纤维素能力强的4株菌株,测定这4株菌在玉米秸秆发酵中的CMC酶活。结果表明,菌株A14和A41在整个培养过程中CMC酶的活性比较高,分别为8.341 U/g和8.792 U/g。采用A14、A41处理玉米秸秆10 d,降解率分别达30.80%和31.52%。确定菌株A14和A41的最佳产酶条件为摇床转速150 r/min,接菌量为菌悬液(108个孢子/mL)与秸秆用量比1/10(质量比)。     

饲料蛋白对翘嘴红鲌蛋白质周转代谢的影响

选择健康的翘嘴红(体重12.84±0.60g)为试验鱼,以红鱼粉为蛋白源,配制5个蛋白水平(31.04%、35.51%、40.89%4、6.62%、50.33%)的等能、等必需氨基酸(EAA)平衡关联度的半精制饲料;又以豆粕替代鱼粉,大豆蛋白分别替代0、13.5%、27%、40.5%、54%的鱼粉蛋白,配制5个EAA关联度的等蛋白(40%)、等能(20MJ.kg-1)的半精制饲料,探讨饲料蛋白水平和大豆蛋白对鱼粉蛋白的替代对翘嘴红肌肉和肝胰脏蛋白质周转代谢的影响。8周饲养结果表明,饲料蛋白水平对翘嘴红的特定增重率(SGR)具有显著性影响(P<0.05),40.89%饲料蛋白组的SGR显著高于31.04%、35.51%饲料蛋白组(P<0.05),但与46.62%和50.33%饲料蛋白组没有显著性差异(P>0.05);饲料蛋白水平对白肌、肝胰脏蛋白质生长率具有相似的影响,40.89%饲料蛋白组的白肌、肝胰脏蛋白质生长率分别达到2.13%.d-1,显著高于31.04%和35.51%两组(P<0.05),但与46.62%和50.33%饲料蛋白组无显著性差异(P>0.05)。饲料蛋白水平的增加促进了翘嘴红的生长和蛋白质的合成。肌肉蛋白质合成率(Ks)、蛋白质降解率(Kd)随饲料蛋白水平的增加而增加(P<0.05),肌肉蛋白质的增加归因于蛋白质合成的增加较降解的增加更占优势,蛋白质的沉积率在适宜蛋白水平时最高。当大豆蛋白分别替代13.5%2、7.0%4、0.5%的鱼粉蛋白时,翘嘴红的SGR与对照组差异不显著(P>0.05),而且都显著高于54.0%替代组(P<0.05)。白肌蛋白质生长率(Kg)也显著受到大豆蛋白替代的影响(P<0.01),当饲料中大豆蛋白对鱼粉蛋白替代量为40.5%时,与对照组相比,Kg极显著下降(P<0.01)。随着饲料中大豆蛋白对鱼粉蛋白替代量的增加,白肌Ks随之降低,当饲料中大豆蛋白对鱼粉蛋白替代量达54%时,与对照组相比,肌肉Ks显著下降(P<0.05)。白肌Kd与白肌Ks的变化趋势相似(P<0.1),而PDE没有受到饲料中大豆蛋白对鱼粉蛋白替代的影响(P>0.05)。可见随着大豆蛋白对鱼粉蛋白替代量的提高,氨基酸平衡关联度逐渐降低,蛋白质合成逐渐降低(P<0.05),生长下降,饲料必须氨基酸平衡程度的变化没有改变蛋白质的沉积效率。