氟苯尼考及氟苯尼考胺在西伯利亚鲟体内的药动学及组织分布

采用液质联用法(HPLC-MS/MS)建立了氟苯尼考和氟苯尼考胺同时检测的方法,研究了氟苯尼考口灌给药西伯利亚鲟后,氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺在西伯利亚鲟体内的药动学和组织分布。水温22℃下,氟苯尼考以15 mg/kg剂量单次口灌给药西伯利亚鲟,检测血浆、肝脏、肾脏和肌肉等组织中氟苯尼考及其代谢产物氟苯尼考胺的浓度,结果显示:氟苯尼考及其代谢产物氟苯尼考胺在西伯利亚鲟体内的药时数据均符合一级吸收二室开放模型,氟苯尼考在血浆中的达峰浓度(Cmax)为3.4μg/mL,达峰时间(Tpeak)为2.943 h,表观分布容积(V/F)为3.267 L/kg,消除半衰期(t1/2β)为31.21 h,药时曲线下总面积(AUC)为76.51μg.h/mL,Cmax(FFA)/Cmax(FF)和AUCFFA/AUCFF仅为5.44%和20.73%;氟苯尼考在各组织中分布广泛,分布规律相近,肝脏、肾脏中药物浓度较高。结果表明:氟苯尼考在西伯利亚鲟体内具有吸收迅速、达峰浓度高、消除相对缓慢及组织中分布广泛的特征且氟苯尼考主要以原形药物形式代谢消除。研究亮点:针对氟苯尼考目前广泛用于水产养殖中细菌性疾病防治的现状,本文首次采用液质联用法进行了氟苯尼考及其代谢产物氟苯尼考胺在西伯利亚鲟体内分布及代谢规律的研究。建立了比较简单的样品处理方法,并从药物本身和代谢产物整体来研究药动学及组织分布特征,为制定该药安全使用方法提供了理论基础。     

虹鳟肠炎红嘴病病理模型的构建

为探讨鲁氏耶尔森菌侵染虹鳟的致病机制,本实验建立了鲁氏耶尔森菌感染虹鳟引起的肠炎红嘴病的病理模型,制定相应的临床症状及组织病理学评分系统,并对该模型进行研究。将43尾平均体质量约为12 g的健康虹鳟随机分成5组:3个实验组(n=30)、对照组(n=10)和哨兵组(n=3)。3个实验组分别采用2.0×106、2.0×107和2.0×108 CFU/m L的鲁氏耶尔森菌感染浓度,通过腹腔注射方式进行人工感染试验。对感染鲁氏耶尔森菌的虹鳟肠、肝脏、脾脏和肾脏组织进行镜检及临床症状、剖检病变判断,结合细菌学检测,按制定的评分系统评价各组肠炎红嘴病造模效果,确定最佳造模方案。结果显示,各攻毒组虹鳟感染后72 h均出现不同程度死亡,临床症状表现为红嘴、肛门红肿、鳍(胸鳍、腹鳍、臀鳍)等出现不同程度充血,下颌部、腹部出现出血点等。组织病理学可见肝脏、脾脏、肾脏及肠组织均有炎性细胞浸润现象出现,肝细胞、肠上皮细胞和肾小管上皮细胞等实质细胞变性、坏死,脾脏部位淋巴细胞减少、红细胞死亡堆积。综合各组得分发现,2.0×107 CFU/m L组的鲁氏耶尔森菌感染虹鳟造模效果最佳,患病虹鳟的临床症状显著且组内差异较小,病程迁延较长,便于研究。研究表明,对体质量约12 g的虹鳟幼鱼腹腔注射0.1 m L浓度为2.0×107 CFU/m L的鲁氏耶尔森菌可成功构建肠炎红嘴病病理模型。     

传染性胰脏坏死病毒VP3抗血清的制备及应用

为丰富传染性胰脏坏死病毒(infectious pancreas necrosis virus,IPNV)的检测方法,以GenogroupⅠ型的IPNV ChRtm213分离株基因组RNA为模板,利用一步法RT-PCR扩增获得了编码IPNV VP3基因序列(711 bp),将其克隆至pET-32a原核表达载体,利用大肠杆菌Rosetta进行VP3蛋白表达,以纯化的VP3蛋白为免疫原制备鼠抗血清,利用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)对抗血清效价进行测定,并利用间接免疫荧光抗体法(indirect immunofluorescent antibody test,IFAT)和中国不同地区的IPNV分离株,对抗血清识别中国现行IPNV分离株的能力进行免疫学鉴定.结果表明:SDS-PAGE分析显示,表达纯化的VP3蛋白条带单一,相对分子质量约为45000,与理论值相符;抗血清效价分析显示,所制备的鼠抗IPNV VP3血清与IPNV的反应效价为16000,与纯化的IPNV VP3蛋白的反应效价为32000;间接免疫荧光抗体法分析显示,制备的鼠抗血清能够特异性识别中国不同地区的GenogroupⅠ和GenogroupⅤIPNV分离株,且该血清不与传染性造血器官坏死病毒(IHNV)和病毒性出血性败血症病毒(VHSV)发生交叉反应,具备较好的特异性.研究表明,本研究中利用原核表达系统表达的IPNV VP3蛋白具有良好的免疫原性,所制备的IPNV VP3抗血清能够特异性识别中国不同地区的IPNV分离株.     

烟酸诺氟沙星在松浦镜鲤体内代谢残留规律的研究

分析烟酸诺氟沙星在松浦镜鲤体内代谢残留规律,准确制定该种药物的休药期,为有效、安全、合理地使用烟酸诺氟沙星提供准确科学的理论依据。选用松浦镜鲤(Cyprinus carpio L.)为实验对象,连续5 d口灌30 mg/(kg·d)烟酸诺氟沙星(norfloxacin nicotinate,NFX)后,分别于给药后1,2,3,4,5,6,7,9,11,13,15,20,25 d采集鲤血浆、肌肉、皮、肝和肾5种组织,通过高效液相色谱法检测其各组织内烟酸诺氟沙星的残留量。烟酸诺氟沙星在鲤体内吸收分布迅速,代谢较为缓慢,各组织分布量由多到少依次为:肾脏、肝胰脏、肌肉、皮肤、血浆,为避免组织内残留过多药物,建议休药期为24 d。     

施氏鲟免疫球蛋白酶解片段分析

采用几种蛋白水解酶对施氏鲟免疫球蛋白的酶解片段进行了分析。结果显示施氏鲟的免疫球蛋白在37℃条件下可以被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶及胰蛋白酶分别裂解成不同的片段：木瓜蛋白酶的酶解片段出现在分子质量为130KDa、50KDa、10KDa和7KDa的蛋白谱带附近，而在酶量比较小、酶解时间较短的一组，在94KDa附近也有一条蛋白谱带；胃蛋白酶的水解片段，主要出现在分子质量为130KDa、94KDa、90KDa和32KDa的蛋白谱带附近；胰蛋白酶酶解片段主要为分子量为130KDa和74KDa的两条主带。     

杂交鲶(怀头鲶♀×鲶鱼♂)常见病及其防治技术

杂交鲶是在鲶鱼人工繁殖成功的基础上 ,根据杂交组合优势的原理 ,以怀头鲶 (♀ )的生长速度和鲶鱼 (♂ )肉质细嫩的优良性状 ,通过种间杂交培育出的生长迅速、肉质鲜美的杂交鲶鱼新品种。杂交鲶的抗病力较强 ,套养时由于放养密度较稀很少发病 ,但在集约化养殖条件下 ,由于养殖驯化密度较高 ,时常会发生一些病害 ,导致其发病的原因主要包括 :(1 )病原生物的侵袭使杂交鲶发病 ,主要包括细菌、寄生虫、霉菌引起的疾病 ;(2 )溶解氧量 :杂交鲶属于耐低氧的鱼类 ,但当水体中含氧量过低时亦会引起杂交鲶的死亡 ,溶氧过高时小苗则会发生气泡病 ;(3)…     

鲟鱼病毒性疾病研究进展

鲟鱼是一种有着较高经济及科研价值的稀有、大型鱼类。但近年来，一些危害较大的流行性疾病的发生，给鲟鱼养殖业带来了巨大的经济损失。前期研究发现，病毒性疾病所占比重较大，是造成鲟鱼苗种大批死亡的重要原因之一。高首鲟虹彩病毒，高首鲟疱疹病毒-Ⅰ，Ⅱ和铲鲟虹彩病毒是已知引发鲟鱼病毒性疾病的主要病毒。本文针对这四种病毒病的临床症状、疾病的诊断方法、病原分离的方法以及该病的预防、治疗方法等研究进展进行概述。     

水中镧在鲤鱼体内富集作用的初步研究

本文初步研究了硝酸镧在鲤鱼体内的富集与分布情况。实验分为三个梯度组：Ⅰ组为对照组，Ⅱ组为0．5ppm组，Ⅲ组为2ppm组。结果表明：鲤鱼对水体中硝酸镧的富集作用轻微，其富集能力的顺序为肾＞鳃盖骨＞鳃＞肝。     

鲟鱼病毒性疾病研究进展

鲟鱼是一种有着较高经济及科研价值的稀有、大型鱼类。但近年来，一些危害较大的流行性疾病的发生，给鲟鱼养殖业带来了巨大的经济损失。前期研究发现，病毒性疾病所占比重较大，是造成鲟鱼苗种大批死亡的重要原因之一。高首鲟虹彩病毒，高首鲟疱疹病毒-Ⅰ，Ⅱ和铲鲟虹彩病毒是已知引发鲟鱼病毒性疾病的主要病毒。本文针对这四种病毒病的临床症状、疾病的诊断方法、病原分离的方法以及该病的预防、治疗方法等研究进展进行概述。     

鲤鱼黏孢子虫病在黑龙江地区的发生、诊断和防治

黏孢子虫 (Ｍｙｘｏｓｐｏｒｅａｎ)属于黏孢子门 ,黏孢子虫纲。除少数种类寄生在蠕虫、两栖类和爬行类外 ,绝大部分寄生于鱼类 (包括海水鱼类和淡水鱼类 ) ,可以说黏孢子虫是鱼类特有的一类寄生原生动物。自Ｇｌｕｇｅ首次发现黏孢子虫以来 ,至今国内外报道的有近 12 0 0种 ,其中我国淡水鱼类中寄生的就有 6 0 0余种 ,此类寄生虫几乎在鱼类所有器官中发现。近年来 ,鲤鱼黏孢子虫病在黑龙江频繁的发生 ,由于该病的早期诊断困难 ,大多数鱼病工作者仅能在疾病发生的末期诊断该病 ,因此不能及早的控制该病 ,给渔业生产带来了巨大的经济损失。作…