鸡4种主要RNA病毒病多重感染复合PCR检测方法的建立

依据Gen Bank中注册的禽流感病毒(AIV)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、新城疫病毒(NDV)和传染性法氏囊病毒(IBDV)基因组核苷酸序列,通过序列比对获得AIV、IBV、NDV、IBDV的相对保守序列。根据每种病毒的保守序列利用生物学软件分别设计3对特异性引物,4种病毒共设计12对引物,并对12对引物进行模拟筛选,获得匹配最佳的4对引物。对获得的最佳匹配引物进行单项PCR验证,优化复合PCR反应条件,确定最佳的退火温度、引物浓度和Taq DNA聚合酶使用量;经特异性、敏感性及简化PCR试验,最终建立了简易复合PCR检测方法。结果表明,建立的检测方法可同时扩增出4条大小与设计相符的特异性片段,即IBV(146 bp)、NDV(215 bp)、IBDV(345 bp)、AIV(435 bp);建立的复合PCR方法具有较强的敏感性和特异性,能检测出100 pg AIV、IBV、IBDV的cDNA和100 fgNDV的cDNA;将三温热循环改进为二温热循环,即将退火和延伸过程合为一步(62℃),大大缩短了反应时间。     

澳荷斯坦牛引入河南省后的产奶性能分析

澳荷斯坦牛引进河南后,由于饲养方式的转变,其产奶能力有了较大提高。将228头试验牛分为高、中、低产3组,分别测定并比较其产奶性能的差异。结果表明:一胎305 d平均产奶量接近6 500 kg;牛群第1、第2胎各泌乳月平均日产奶量均以第2个泌乳月为最高;高产奶牛在泌乳期第1个月就表现出高产状态。高产牛群305 d产奶量与90 d产奶量、最高日产奶量、最高月产奶量都呈强正相关关系;中产牛群305 d产奶量与90 d产奶量、最高日产奶量、最高月产奶量呈低度相关;低产牛群305 d产奶量与90 d产奶量和最高月产奶量间存在强正相关关系,最高日产奶量与305 d产奶量间为低度相关。     

多重PCR方法快速检测猪的5种呼吸道病原菌

猪胸膜肺炎放线杆菌(App)、副猪嗜血杆菌(Hps)、支气管败血波氏杆菌(Bb)、产毒性多杀巴氏杆菌(T+Pm)和猪肺炎支原体(Mhp)是最常见的几种猪呼吸道病原菌.笔者参照文献报道的基因序列设计针对App、Hps、Bb、T+Pm和Mhp的特异性引物,对单一PCR条件进行系统优化后建立5重PCR方法.该多重PCR方法能对同一样品中5种病原菌的DNA模板进行扩增,且在5种病原菌之间没有交叉反应;对大肠杆菌等其它6种常见猪细菌性病原的榆测结果均为阴性;对5种病原菌DNA模板检出的最小最均低于160 Pg,且能从攻毒小鼠(App、Hps、Bb和T+Pm)肺脏组织8 h增菌的培养物中快速检测出相应的病原菌.对中国华中地区269份临床样本的检测结果表明,5种呼吸道病原菌在华中地区猪群中普遍存在,且混合感染情况十分严重.这些试验结果表明该多重PCR方法可用于猪呼吸道病原菌App、Hps、Bb、T+Pm和Mhp的单一或混合感染的鉴别诊断及病原流行病学调查.     

猪ICOS基因部分cDNA的克隆与序列分析

研究旨在对猪T细胞诱导型刺激物(ICOS)基因的cDNA序列进行克隆与分析。根据已报道的人ICOS基因cDNA序列设计引物,首次从猪脾脏组织总RNA中扩增出ICOS基因编码区全长cDNA序列,克隆于pMD18-T载体后进行测序并进行序列拼接,运用生物信息学分析DNA序列。结果表明:该基因编码区全长630bp,编码210个氨基酸,包含5个外显子。该序列与人全基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列的同源性分别为80%和85%;与狗和小鼠的推导氨基酸序列的同源性分别为81%和75%。这为进一步研究该基因的结构特点和功能奠定了良好基础。     

兔豆状囊尾蚴的压片技术及染色方法研究

为了详细观察豆状囊尾蚴头节的形态结构,通过屠宰检验或病兔剖检采集的豆状囊尾蚴的囊泡,制作压片后用不同的染色方法进行了比较.结果表明,制作豆状囊尾蚴头节压片的关键是载玻片要洁净、干燥,从囊泡中取出的头节应完整无损,并尽量除去黏附在头节上的囊液.将带有头节的结节放在载玻片的中部,再在其上放一载玻片,两手在载玻片的两端均匀用力挤压,待结节全部展开即可.为了观察头节的正面结构,在压制玻片前,应用手术刀片除去原始颈节与体节部分.通过常用的几种单染色和复染色法对压片进行染色,证明单染色更有利于详细的观察头节的结构,而且几种单染色之间有互补染色效果.     

酶解豆粕对肉鸡生产性能和养分消化率的影响

本试验旨在研究微生物蛋白酶水解豆粕对1～21日龄肉鸡生长性能和养分消化率的影响。选择1日龄科宝母雏336只,随机分为4组,即对照组、试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组。对照组为玉米—豆粕型基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组分别以5%、10%和15%酶解豆粕替代对照组中等量的普通豆粕。试验结果表明,与对照组相比,试验组显著提高了肉鸡采食量（12%～21%）和增重（8%～16%）(P<0.05),降低料重比（3%～7%）(P<0.05);试验组对干物质、粗蛋白质、能量、钙和磷的消化率也具有显著的提高作用(P<0.05);各试验组之间,生产性能和干物质、粗蛋白质、钙消化率差异显著(P<0.05),但能量和磷的消化率差异不显著(P>0.05)。因此,豆粕经酶解改善了其蛋白质的营养价值,肉仔鸡日粮添加酶解豆粕可以提高肉鸡的生长性能和养分消化率。     

甲氧苄啶、二甲氧苄啶与磺胺氯吡嗪钠联用的抗球虫效果比较

选用220只10日龄海兰褐公雏口服柔嫩艾美耳孢子化卵囊制造人工感染球虫病模型,对不同浓度的磺胺氯吡嗪钠(Esb3Na)以5:1比例与甲氧苄啶(TMP)、二甲氧苄啶(DVD)联合应用的抗球虫增效作用进行比较.结果表明:高剂量Esb3Na(0.06%)与TMP或DVD联用均呈高效,抗球虫指数(ACI)分别为180.32和181.30,二者之间无明显差异.中、低剂量Esb3Na (0.03%、0.015%)与TMP联用的ACl分别为181.56和129.38,抗球虫效果强于与DVD联用,对应的ACI分别为169.68和106.19.推荐使用0.03%的Esb3Na与TMP以5:1联用防治鸡球虫病感染.     

奶牛真菌性乳房炎的诊断及控制

通过对奶样中的细菌进行分离、培养和鉴定,确定了两头奶牛的乳房炎是由白色念珠菌引起,系真菌性乳房炎。利用氟康唑氯化钠注射液乳房灌注及激光照射,病牛乳房炎得到了有效控制,产奶量明显恢复。     

丙酮酸钙对山羊瘤胃挥发性脂肪酸浓度动态变化的影响

以8只装有永久性瘤胃瘘管的成年徐淮山羊为试验动物,采用自身对照设计,研究丙酮酸钙对山羊瘤胃内挥发性脂肪酸浓度动态变化的影响.结果表明:与对照组相比,添喂丙酮酸钙后,在0～8h内,对pH值无显著影响.4h时,总挥发性脂肪酸(TVFA)浓度升高25%(P<0.01);丙酸浓度升高60%(P<0.01).0～8h内,丙酸比例均高于对照组(17%～30%);乙丙比均低于对照组(20%～29%).说明在山羊日粮中添加一定量丙酮酸钙,可在不影响pH值的情况下,提高丙酸比例,降低乙丙比,改变瘤胃发酵类型.     

寄生虫基因组研究进展

基因组测序计划以及有关的转录组和蛋白质组图谱计划已经给寄生虫学的研究带来了一场革命。随着越来越多种类的寄生虫基因组序列被测定,通过系统的比较和分析基因的序列使得预测基因和功能验证的准确性越来越高,也为人们认知寄生虫的生物学特征、为人类和兽医筛选新的候选疫苗和药物靶标提供了重要数据。本文就寄生虫基因组研究进展作一简单综述。