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多重PCR方法快速检测猪的5种呼吸道病原菌
引用本文:薛云,赵战勤,陈杨,邹浩勇,何启盖,李文洁,熊金凤,陈焕春.多重PCR方法快速检测猪的5种呼吸道病原菌[J].畜牧兽医学报,2009,40(8).
作者姓名:薛云  赵战勤  陈杨  邹浩勇  何启盖  李文洁  熊金凤  陈焕春
作者单位:1. 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室,武汉430070;河南科技大学动物科技学院动物病原微生物学实验室,洛阳471003
2. 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070
基金项目:国家科技支撑计划项目 
摘    要:猪胸膜肺炎放线杆菌(App)、副猪嗜血杆菌(Hps)、支气管败血波氏杆菌(Bb)、产毒性多杀巴氏杆菌(T+Pm)和猪肺炎支原体(Mhp)是最常见的几种猪呼吸道病原菌.笔者参照文献报道的基因序列设计针对App、Hps、Bb、T+Pm和Mhp的特异性引物,对单一PCR条件进行系统优化后建立5重PCR方法.该多重PCR方法能对同一样品中5种病原菌的DNA模板进行扩增,且在5种病原菌之间没有交叉反应;对大肠杆菌等其它6种常见猪细菌性病原的榆测结果均为阴性;对5种病原菌DNA模板检出的最小最均低于160 Pg,且能从攻毒小鼠(App、Hps、Bb和T+Pm)肺脏组织8 h增菌的培养物中快速检测出相应的病原菌.对中国华中地区269份临床样本的检测结果表明,5种呼吸道病原菌在华中地区猪群中普遍存在,且混合感染情况十分严重.这些试验结果表明该多重PCR方法可用于猪呼吸道病原菌App、Hps、Bb、T+Pm和Mhp的单一或混合感染的鉴别诊断及病原流行病学调查.

关 键 词:  呼吸道病原  多重PCR  检测

Development of a Rapid Multiplex PCR for Simultaneous Detection of Five Major Pathogenic Bacteria of Respiratory Tract Diseases in Swine
XUE Yun,ZHAO Zhan-qin,CHEN Yang,ZOU Hao-yong,HE Qi-gai,LI Wen-jie,XIONG Jin-feng,CHEN Huan-chun.Development of a Rapid Multiplex PCR for Simultaneous Detection of Five Major Pathogenic Bacteria of Respiratory Tract Diseases in Swine[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2009,40(8).
Authors:XUE Yun  ZHAO Zhan-qin  CHEN Yang  ZOU Hao-yong  HE Qi-gai  LI Wen-jie  XIONG Jin-feng  CHEN Huan-chun
Abstract:
Keywords:
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