副鸡嗜血杆菌的分离鉴定及我国鸡传染性鼻炎的流行状况分析

从不同地区免疫失败鸡场的鸡传染性鼻炎疑似鸡体内共分离到19株细菌，经回归试验、PCR等方法鉴定为副鸡嗜血杆菌。又将分离株用血清平板凝集试验、血凝抑制试验和型特异性单抗进行了血清型的鉴定，结果表明分离菌有15株为A型，4株为B型，说明我国鸡传染性鼻炎的流行已经出现了新的特点，在疾病预防和控制中应加以注意。另外大多数鸡场的免疫失败是由于免疫效果不良所致，但也有相当一部分鸡场的免疫失败是由于B血清型的出现引起的。     

Immunopotentiation of a Developed Salmonella enterica serotype Enteritidis Vaccine by Thymulin and Zinc in Meat Chicken Breeders

The humoral immunity, spleen and thymus weight indices, lymphocyte count in the thymus cortex, and granuloma diameter at vaccination sites were assessed in four differently immunopotentiated groups of meat chicken breeders. Breeders in the first two groups were given a killed Salmonella enterica serotype Enteritidis (SE) vaccine subcutaneously at 15 and 19 weeks of age. Breeders in the third and fourth groups were left unvaccinated. Breeders in the first group were further immunopotentiated with zinc and thymulin. Each bird in the first group was given the immunopotentiators intraperitoneally in a volume of 0.1 ml at intervals of 3 days for a period of 3 weeks, starting at 15 weeks of age. At each time, each bird in the first group received thymulin (10 ng) and ZnCl₂ (1 mol/L), using a carboxymethyl cellulose carrier, totalling 90 ng thymulin and 9 mol of ZnCl₂ per bird. Each bird in the first three groups was challenged orally with 6.7×10⁶ cfu/ml of highly virulent SE organisms, at an age of 22 weeks. The first group, which had received zinc and thymulin, had the earliest and highest humoral immune response to SE (p<0.05). This was observed at 2 and 4 weeks after the first vaccination. In addition, the first group had the highest mean thymus weight index, and the highest mean lymphocyte count in the thymus cortex. No significant difference was observed between the first two vaccinated groups in the mean granuloma diameter developed at the two vaccination sites 48 h after administration of the vaccine (p>0.05).     

我国主要流行的4种血清型禽腺病毒-I群感染SPF鸡的致病性比较研究

旨在对我国流行的4种血清型(4、8a、8b和11型)禽腺病毒-I群(fowl adenovirus, FAdVs)对鸡胚和鸡的致病性进行研究,选取12日龄SPF鸡胚和10日龄SPF鸡感染4种血清型FAdVs,对SPF鸡胚和鸡的死亡率及鸡胚胚体质量进行统计;对感染鸡的大体剖检变化、组织学变化进行观察和病毒载量进行研究。结果显示,FAdV-8b和FAdV-11感染SPF鸡胚后其死亡率高于45%,FAdV-8a感染后胚体质量降低最严重,FAdV-4感染后对胚体质量影响最小;FAdV-4感染SPF鸡死亡率高达53.3%,其他组鸡无死亡;除肝出现肿胀、变性、出血和炎性细胞浸润外,4种病毒感染SPF鸡后分别造成不同组织器官的严重损伤,FAdV-4感染出现心包积液、FAdV-8a感染肌胃出现糜烂、FAdV-8b感染导致腺胃肿胀和FAdV-11感染导致胰腺坏死,各损伤组织均出现实质细胞坏死和炎性细胞浸润;4种病毒感染SPF鸡均出现免疫器官的组织学损伤,其中,FAdV-8a、-8b 和-11感染鸡引起的免疫器官内淋巴细胞缺失和损伤较FAdV-4更为严重;组织病毒载量结果显示,FAdV-4感染鸡心和肾病毒载量最高,FAdV-8b和FAdV-11感染鸡胰腺病毒载量高于FAdV-4感染组,且FAdV-4感染鸡心、肝和肾病毒载量在感染后第5天高于第3、7天,除FAdV-8a感染组外,病毒载量与各组织损伤情况相一致。综上表明,4种血清型FAdVs中,FAdV-11对SPF鸡胚的致死性最强,FAdVs对SPF鸡的致死率最高,尽管FAdV-8a、-8b 和-11不致死SPF鸡,但对SPF鸡胚、SPF鸡的消化系统和免疫系统损伤较为严重,这将会造成鸡胚孵化率降低、鸡生长发育缓慢和易于继发其他病原感染。     

1株副猪嗜血杆菌血清4型的分离鉴定及耐药性分析

【目的】 阐明引起河南漯河某规模化猪场仔猪呼吸道症状的主要细菌性病原体及其生物学特性。【方法】 无菌采集发病仔猪的口鼻拭子及病死猪的胸腔积液及肺脏、肝脏、脾脏等组织器官,进行病原的PCR检测,并通过细菌分离培养、形态学观察、卫星试验、16S rDNA基因PCR扩增、系统进化树构建、多重PCR鉴定分离菌的血清型、致病性试验和药敏试验等对分离菌株进行生物学特性分析。【结果】 在含有V因子的BHI固体平板上生长出圆形、表面光滑湿润、无色透明的微小菌落,在不含V因子的培养基上不生长;分离菌株经革兰染色,镜下可见革兰阴性菌,多呈单个存在的球杆、长杆状;在金黄色葡萄球菌的培养物周围形成典型的"卫星菌落";16S rDNA基因序列分析表明,分离菌株与副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis,Hps）处于同一分支,相似性>97%,亚型鉴定结果判定分离菌为Hps血清4型;将分离的Hps腹腔注射感染小鼠,可导致感染小鼠多个器官不同程度出血,以肺脏最为明显;高剂量感染可导致小鼠死亡。药敏试验发现,该菌株对四环素、环丙沙星、复方新诺明具有较强抗性,合理用药后,取得了良好的治疗效果。【结论】 试验成功分离出1株血清4型Hps,可致感染小鼠多个器官不同程度出血,对四环素、环丙沙星、复方新诺明耐药,研究结果为副猪嗜血杆菌病的临床诊断和治疗提供了理论依据。     

Characterization of novel avian paramyxovirus strain APMV/Shimane67 isolated from migratory wild geese in Japan

An avian paramyxovirus (APMV) isolated from goose feces (APMV/Shimane67) was biologically, serologically and genetically characterized. APMV/Shimane67 showed typical paramyxovirus morphology on electron microscopy. On hemagglutination inhibition test, antiserum against APMV/Shimane67 revealed low reactivity with other APMV serotypes and vice versa. The fusion (F) protein gene of APMV/Shimane67 contained 1,638 nucleotides in a single open reading frame encoding a protein of 545 amino acids. The cleavage site of F protein contained a pair of single basic amino acid (VRENR/L). The nucleotide and deduced amino acid sequences of the F gene of APMV/Shimane67 had relatively low identities (42.9–62.7% and 28.9–67.3%, respectively) with those of other APMVs. Phylogenetic analysis showed that APMV/Shimane67 was related to NDV, APMV-9 and APMV-12, but was distinct from those APMV serotypes. These results suggest that APMV/Shimane67 is a new APMV serotype, APMV-13.     

猪链球菌2型多重耐药菌株的人工诱导

采用6种常用抗菌药物对临床分离的38株猪链球菌2型进行敏感性检测,从中选择3株对红霉素和环丙沙星敏感的菌株,采用体外递增药物浓度的方法分别诱导成对红霉素和环丙沙星耐药的菌株,按临床检验标准委员会(CLSI)推荐的方法测定了红霉素和环丙沙星对同一亲本的敏感株和诱导耐药株的体外最小抑菌浓度(MIC),并测定在外排泵抑制剂利血平存在的情况下敏感株和诱导耐药株的MIC变化情况。微量稀释法测定的MIC结果显示:在所选的6种抗生素中,氟苯尼考和氨苄西林对临床分离的38株猪链球菌的作用最好,抑菌率都为100%,红霉素及环丙沙星有一定作用,耐药率分别达39.5%(15/38)和28.9%(11/38),而磺胺间甲氧嘧啶、四环素的抑菌效果最差,耐药率达100%。浓度递增法成功诱导了猪链球菌2型菌株对红霉素和环丙沙星耐药性,其MIC值分别由0.001 8 mg/L上升至128 mg/L。在外排泵抑制剂利血平存在的情况下,抗菌药物对部分猪链球菌2型菌株的MIC值下降。结果提示:逐步增加药物浓度可以诱导猪链球菌2型菌株对红霉素和环丙沙星的耐药性,而且猪链球菌2型菌株耐药性的产生可能与耐药性相关的主动外排机制有关。     

猪链球菌2型分选酶srtC5基因敲除突变菌株的构建及其特性分析

构建猪链球菌2型（Streptococcus suis serotypc 2）强毒株ZY458分选酶srtC5基因敲除突变体并分析其特性。首先通过重叠延伸PCR技术扩增AsrtC5片段,该片段携带srtC5编码基因及其上下游部分序列,但是中间缺失212bp序列。随后构建重组自杀载体pSET4s：：△srtC5,并将其电转化导入ZY458菌株,通过同源重组获得△srtC5突变体。通过体外的细胞黏附试验和体内的家兔攻毒试验证明△srtC5突变体比较野毒株,其细胞黏附能力和对家兔的致病性都显著降低。     

三型副鸡禽杆菌对SPF鸡的致病力试验

为探讨3株A型C-HPg 8(CVCC254)、B型(BJ-05株)和C型(668)副鸡禽杆菌对SPF鸡的致病力,用120只57日龄SPF鸡进行了此3个菌株的致病力试验,分别眶下窦内接种1.5×10<'4>cfu/0.2 mL·只-1～400x104cfu/(0.2 mL/只-1)C-HPg 8、BJ-05株和668株...     

内蒙古部分地区肉仔鸡致病性大肠杆菌私生物学特性的研究

从内蒙古四个盟市分离到10种优势血清型的肉仔鸡致病性E.codi，对其进行生物学特性研究表明：电镜观察均具有菌毛，形成不完全一致；有的还可见到有鞭毛生长。均无溶血性，对1％、3％、5％鸡红细胞悬液均可产生明显的凝集作用（＋＋＋－＋＋＋＋），加入甘露醇后，E.coliO1、O35、O54、O55、O103、O68表现为“＋”凝集作用，而O5、O20、O78则表现为抑制作用。所有血清型盐凝集阳性（SAT^ ），并且都能摄入刚果红染料。     

胸膜肺炎放线杆菌诊断抗原的制备及初步临床应用

利用14个血清型的胸膜肺炎放线杆菌的标准菌株制备诊断抗原，通过玻片凝集试验，琼脂扩散试验和对流免疫电泳，以标准抗血清作为参考，检验各种诊断抗原的灵敏性和特异性。分别用凝集抗原、超声波处理抗原和酚水抗原对来自湖北、湖南、江西、河南、安徽5省猪场的155份送检血清进行检测。结果表明可以对送检血清快速、准确地进行鉴别诊断和血清分型。