长江口日本鳗鲡群体遗传多样性RAPD初步分析

对2005年采集自长江口地区4个采样点、5批、共10尾性成熟前成鳗、82尾玻璃鳗的日本鳗鲡样本的遗传多样性进行了RAPD分析。在51条随机引物中筛选出具有稳定扩增、条带清晰的多态性引物16条，16条引物共检测到132个位点，其中多态位点114个（86．36％）。五个采样群体各自的平均杂合度（Hc）在0．2053～0．3150之间，平均基因多样性指数（Ho）在0．2974～0.4526之间；采样群体两两间的遗传分化指数几，在0．0508～0．1524之间。群体内遗传变异和群体间遗传变异对群体总遗传变异的贡献率分别为79．18％和20．82％；Nei的遗传距离在0．0593～0．1425之间；在玻璃鳗采样群体间未发现遗传差异同采样地点及月份有何显著关系，显示它们可能同属一个大混合群体。而遗传距离、遗传分化指数及NJ树分析结果一致表明：成鳗和玻璃鳗之间可能存在相当的遗传距离和遗传分化。     

鳗鲡苗种人工繁育的研究概况及其展望

扼要回顾了数十年来水产工作者对鳗鲡的研究成果 ,其中包括 :鳗鲡生殖洄游和产卵生态的调查 ;人工诱导鳗鲡性腺发育与排卵的研究 ;仔、幼鳗生物学和生态学的研究 ;人工孵化仔鳗的培育研究和鳗鲡生殖生理学的研究。另外还就存在的问题作了探讨 ,并对今后继续研究提出浅见     

外源激素及环境因子对日本鳗鲡卵巢发育的影响

开展了不同外源激素、剂量、注射针距以及环境因子对鳗鲡卵巢发育的影响的研究，在所试验的外源激素中，HCG和PT对鳗鲡卵巢催熟效果较好，LHRH－A和TOP则无明显效果。外源激素注射剂量越高，卵巢发育所需时间越短，但注射剂量过低，催熟率则急剧下降，采用注射剂量为0.5mgPT＋150IU HCG/500g。在外源激素总剂量不变的情况下，改变注射针距7－15d，除卵巢发育所需时间随针距而延长外，总催熟率不变。超过15d，则催熟率下降，研究认为，鳗鲡卵巢成熟所需外源激素最低总剂量为3.5-4.5mgTP 1050-1350TU HCG/500g。试验的环境因子包括温度，盐度，钙镁比以及PH，除温度高于24℃对卵巢发育有明显的影响外，其它因子在试验范围内对鳗鲡卵巢的发育影响不明显。     

患“红肝病”鳗鲡疱疹病毒的分离和鉴定

利用鳗鲡疱疹病毒(HVA)DNA聚合酶基因引物对患病双色鳗鲡和美洲鳗鲡进行PCR检测(PCR检测结果仅有双色鳗鲡),获得约394bp的目的条带,测序表明扩增出的条带为AHV的DNA聚合酶基因片段,与GeneBank公布的HQ992949、GU233800、FJ940765等6个鳗鲡疱疹病毒基因同源性为100%,与GU205167、AF363783鳗鲡疱疹病毒基因同源性为99%。将患病双色鳗鲡、美洲鳗鲡肝脏和肾脏组织的除菌滤液,接种EPC细胞,细胞7d出现CPE,双色鳗鲡株传代至15代,美洲鳗鲡株传代至5代。     

鳗鲡卵黄蛋白的生物效应

鳗鲡卵黄蛋白制备物与血清在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上分别呈现出2条相对应的蛋白区带,迁移率(R_f)相同。对照组雌鳗经5次和7次注射HCG与CPG后,成熟系数(GSI)分别为(11.94±2.83)%和(46.04±6.22)%,血清中17β-雌二醇(17β-E_2)浓度为(0.665±0.431)ng/ml和(0.421±0.010)ng/ml,睾酮(T)为(4.603±3.442)ng/ml和(3.817±1.399)ng/ml,经HCG.CPG与鳗鲡卵黄蛋白三者混合注射5次和7次后,GSI分别为(16.53±6.67)%和(53.23±11.25)%,血清中17β-E_2浓度为(1.036±0.316)ng/ml和(0.411±0.068)ng/ml,T为(11.170±5.818)ng/ml和(3.956±1.780)ng/ml。未经注射催情药物的雌鳗GSI为(0.50±0.32)%,血清中17β-E_2和T浓度低,检测不出。试验结果证明,外源性鳗鲡卵黄蛋白与HCG和CPG三者混合注射具有明显的促进鳗鲡卵巢加速发育成熟的作用。     

太平洋双色鳗鲡肌肉营养成分分析与评价

测定并分析了太平洋双色鳗鲡(Anguilla bicolor pacifica）肌肉中营养成分组成与质量分数。结果显示院太 平洋双色鳗鲡肌肉中含62.56%、蛋白质15.85%;肌肉中测出氨基酸17 种(未测色氨酸）,总量为36.33%(干样）,其中 包括人体必需氨基酸总量(EAA）7 种,总量为13.99%(干样）,必需氨基酸组成基本符合FAO/WHO 评分标准,太平洋 双色鳗鲡的限制性氨基酸为(蛋氨酸+胱氨酸）和缬氨酸,其必需氨基酸指数(EAAI）为78.26,5 种鲜味氨基酸(DAA） 总量为16.58%(干样）;脂肪酸中单不饱和脂肪酸占44.41%,多不饱和脂肪酸占16.70%,其中EPA+DHA 的占 7.33%。该结果表明,太平洋双色鳗鲡具有较高的使用价值与保健作用。     

人工催熟日本鳗鲡精子的显微和超微结构

对经人工催产获得的日本鳗鲡（Anguilla japonica）精子的显微和超微结构进行了观察。光镜下观察，日本鳗鲡精子有两种形态结构，一种精子的细胞核为圆形或近 似圆形，这精子较小，细胞核长径为(2.57±0.62) μm，短径为(2.11±0.59) μm，鞭毛长度为(38.35±7.71) μm；另外一种精子的细胞核为“眉形”或“新月形”，精子较大，细胞核长径为(7.66±1.09) μm，短径为(2.54±0.46) μm，鞭毛长度为(38.35±9.02) μm。透射电镜观察结果显示：圆形精子头部的顶端无顶体，植入窝位于细胞核底端的中间，由细胞核向内凹陷而成，呈一沟状，其走向与精子的长轴平行。中心粒复合体位于植入窝内。细胞核的下端有2～3个线粒体。基体的头端呈筒状，由电子致密物构成。基体的尾端分裂成9束。尾部从袖套腔中伸出且细长，轴丝始端与基体的尾端相连，微管多呈电子致密状，轴丝为典型的“9+2”结构。圆形精子为日本鳗鲡正常成熟的精子。“眉形”或“新月形”精子头部细胞核弯曲，在弯曲处有一圆形的球状物，球状物内含有线粒体和中心粒复合体，轴丝为“9+0”结构。这种精子可能存在发育缺陷或没有达到完全正常成熟。     

欧洲鳗鲡血清免疫球蛋白纯化及其结构分析

应用亲和层析技术提纯欧洲鳗鲡免疫球蛋白（Ig），并对欧鳗Ig的结构和抗原性进行分析。层析结果表明：Ig蛋白呈现一个锐形曲线，蛋白峰与抗原活性峰高度重叠。SDSPAGE分析表明：欧鳗Ig重链分子量为68 kD，轻链有3条，分子量分别为21 kD、23 kD和26 kD。凝胶电泳结果显示：在非变性非还原条件下，欧鳗Ig有790 kD和350 kD 2条蛋白带，在变性非还原条件下有790 kD、593 kD和350 kD 3条蛋白带。Western-blotting试验证实：兔抗欧鳗Ig能识别欧鳗Ig的多种不同聚合体和Ig的重链，但不能识别Ig的轻链。结论：欧鳗Ig在自然条件下可能以四聚体和二聚体的形式存在，这与其它硬骨鱼的Ig形式有差异。欧鳗Ig链间二硫键不健全,在SDS作用下可解聚产生多种不同分子量的聚合体，首次揭示欧鳗Ig的轻链有3种异型。     

日本鳗鲡脾脏抗菌肽抗菌活性检测方法的比较

本试验旨在建立一种在日本鳗鲡脾脏抗菌肽分离纯化过程中简便、灵敏的检测其抗菌活性的方法。试验以日本鳗鲡脾脏分子质量小于10 ku的蛋白质为抗菌肽样品,选择琼脂板孔穴扩散法和微孔液体培养法2种传统方法及微量液体培养法为检测方法,比较这3种方法在抗菌肽对3种鳗鲡常见致病菌株(迟钝爱德华菌、气单胞菌、嗜水气单胞菌)抗菌活性检测中的灵敏度和优缺点。结果表明:与琼脂板孔穴扩散法及微孔液体培养法相比,微量液体培养法简便、易于观察结果,具有最高的灵敏度且样品用量最少,适合在鳗鲡脾脏抗菌肽分离纯化过程中跟踪检测抗菌活性,尤其适合分离纯化后期获得微量单一样品抗菌活性的检测。由此得出,微量液体培养法适用于检测日本鳗鲡脾脏抗菌肽的抗菌活性。