野桑蚕、家蚕海藻糖酶基因5''侧翼区的克隆与序列分析

海藻糖是一种双糖,广泛存在于包括细菌、酵母、植物和无脊椎动物在内的生物体内,主要功能是储备生物代谢所需的能源.在昆虫血液中,海藻糖是一种最重要的糖类,具有供给能量和提供合成生物大分子的底物等功能.其功能主要是通过海藻糖酶(Trehalase)的作用来实现的.家蚕海藻糖酶有可溶型和膜固定型两种类型,可溶型主要存在于蛹期中肠,而膜固定型存在于包括卵巢在内的多种组织.这两种类型酶是由同一个基因表达而形成不同的成熟海藻糖酶.海藻糖酶膜固定型存在于向血液面的卵巢膜内,该基因的表达是由滞育激素诱导调控.卵母细胞通过位于膜内的海藻糖酶,将血液中海藻糖降解成葡萄糖,然后吸收到胞内,最后合成糖原,从而导致蚕卵的滞育.从而海藻糖酶基因是从分子水平来解明家蚕滞育机理的一个重要途径.本实验从野桑蚕、家蚕苏@菊×明@虎基因组中分别克隆了野桑蚕和家蚕的海藻糖酶基因的5′侧翼区片段并进行了测序分析,以供进一步的启动子功能研究,现报道如下.     

T7 RNA多聚酶基因的克隆、序列测定及其在E.coli中的表达

从BL21(DE3)E．coli菌株中以PCR的方法扩增得到了与T7RNA多聚酶(T7RNApolymerase，T7pol)基因大小一致的DNA片断。将PCR产物纯化后直接克隆到pGEM—T载体中，经酶切鉴定和DNA序列分析表明克隆得到了正确的T7pol基因。将T7pol基因亚克隆入pET-28b( )中，构建得到原核表达质粒pET28T7。该质粒的BL21(DE3)pLysS转化菌在IPTG的诱导下可表达约98800的蛋白，这与T7pol的相对分子质量一致。将该质粒转化DH5α、JMl09、HBl01、BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS等5种不同的宿主菌，仅有转化T7pol酶活性受到抑制的宿主菌BL21(DE3)pLysS才能得到转化子，而其余4种T7T7pol酶活性不受抑制的E．coli宿主菌不能得到转化子。pET28T7原核表达质粒这种仅能在T7pol酶活性受到抑制的宿主菌中才能存活的现象说明本试验所克隆的T7pol基因能正确表达出具有RNA转录酶活性的蛋白。     

半胱胺不同添加方式对生长肥育猪胴体品质的影响

在生长期和肥育期的猪基础日粮中分别添加360mg／kg和450mg／kg半胱胺(CS)(试验I组每6d添加1d，5d间隔期喂基础日粮)或分别添加60mg／kg和75mg／kgCS(试验Ⅱ组)，研究CS不同添加方式对生长肥育猪酮体品质的影响。屠宰试验表明：胴体瘦肉率试验I组和试验Ⅱ组比对照组分别提高5．24％(P＜0．05)和4．63％(P＜0．05)，胴体脂肪率试验I组和试验Ⅱ组比对照组分别降低9．52％和8．53％(P＜0．05)。肉质测试表明，CS对背最长肌肉质无明显影响。经包被处理的CS间断性添加和持续添加对朋体性状和肉质均无显著性差异。试验I组和试验Ⅱ组的皮下激素敏感脂酶和血清中生长激素含量分别比对照组提高41．38(P＜0．05)、31．11(P＜0．05)和38．23(P＜0．05)、24．44％(P＜0．05)。     

柔嫩艾美耳球虫感染鸡盲肠和脾脏一氧化氮合酶的表达

采用NADPH—d(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate—diaphroase)组织化学法观察了雏鸡感染柔嫩艾美耳珠虫(E．tenella)后一氧化氮合酶(N0S)在盲肠和脾脏中的分布与表达情况。试验结果表明，所有正常鸡盲肠粘膜下层和肌层均有较深的着色，根据以往的资料和N0S的表达特性初步判断为神经元型N0S(nNOS)；试验鸡在感染后3～5d，盲肠粘膜上皮和肠腺上皮也有较深的着色，并从感染后7d开始着色减弱；而对照组鸡盲肠粘膜上皮和肠腺上皮以及对照组和试验组的脾脏几乎不着色或着色很浅。试验结果提示，盲肠粘膜上皮和肠腺上皮的着色可能是诱导型N0S(iN0S)表达的结果，而由其产生的N0参与雏鸡球虫感染过程。     

Physiological Indices and Selection of Methods on Rapid Identification for Sweet Potato Drought Resistance

The relationships between the changes of relative water content （RWC）, malondialdehyde （MDA） contents, superoxide dismutase （SOD） activity and free proline contents in sweet potato leaves, and drought resistant ability under different concentration of polyethylene glycol （PEG） treatment applied at rhizosphere of sweet potato seedlings were studied. A highly positive correlation between RWC and drought resistance （r =0.783, P〈0.01）, a highly negative correlation between MDA contents and drought resistance （r = -0.848, P〈0.01）, a highly positive correlation between SOD activity and drought resistance （r = 0.777, P〈0.01） was observed. Free proline contents in leaves was not related obviously to the sweet potato drought resistance under 25% PEG treatment. The stronger the drought resistance of variety, the less decrease of RWC and increase of MDA contents, the more increase of SOD activity. By determining these physiological indices in sweet potato leaves under 25% PEG treatment, rapid identification of drought resistant ability of different varieties can be obtained in the lab.     

6-BA诱导的过氧化氢酶及其在提高水稻抗寒力中的作用研究

6-BA可以显著提高水稻抗寒性。为了进一步明确6-BA诱导水稻抗寒机制,对6-BA及低温 诱导水稻的过氧化氢酶进行了研究。研究表明,过氧化氢酶可受6-BA诱导,并且在提高水稻抗寒力 中可能起重要作用。     

浅论酶联免疫吸附法在饲料安全检测中的应用

酶联免疫吸附技术作为先进的免疫化学检测技术正越来越广泛地应用于饲料安全检测。本文简要介绍了酶联免疫吸附法的原理在饲料安全检测中的运用及其试验的条件要求。     

地衣芽孢杆菌与其他微生物产酶能力的比较

试验对能在动物肠道产酶的芽孢产品—“益畜宝”的有效成分—地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)的产酶特性进行了初步定性研究。在单一碳源培养基上的观察结果表明，该地衣芽孢杆茵能产生植酸酶、淀粉酶及蛋白酶。相同的试验条件下，大肠杆菌和啤酒酵母菌都不产生植酸酶。实验结果还表明，大肠杆菌虽然能产生淀粉酶和蛋白酶，但其活性比地衣芽孢杆菌要低得多，而啤酒酵母菌则不产生淀粉酶和蛋白酶。     

影响烟草花粉胚胎发生的某些因子——铁盐、蔗糖和腺素

本文研究了铁盐、蔗糖等培养基成份对烟草花粉胚胎形成的影响。结果表明,铁盐和蔗糖与烟草花粉胚形成有密切关系。培养基中没有铁盐,胚发育停止球形期;没有蔗糖、胚发育受阻在多细胞原胚期,不能进一步发育。培养基中仅有蔗糖,胚发育停止在鱼雷胚早期,将其转到只含铁盐的培养基中,鱼雷胚可继续发育直至成株。培养基中不附加铁盐或蔗糖,胚的发育均受阻。只有铁盐和蔗糖而无大量元素、微量元素及有机成份,即能形成胚状体并再生植株,但胚胎发生频率低,表明其它附加成份并不是没有意义的。另外,培养基中附加一定浓度的腺素对花粉胚形成是有利的,但高浓度是有害的。