高压处理对肌球蛋白质的影响

从牛骨骼肌中提取肌球蛋白质后进行纯化,并用不同程度的压力(100,200,300,400 MPa)进行处理,再与未处理样品进行比较。采用SDS—PAGE分析了解压力对肌球蛋白的影响。从SDS—PAGE可观察到,随着压力的升高,肌球蛋白质条带逐渐变淡,压力为400 MPa时,13.8 kDa的肌球蛋白轻链几乎已经消失,而200 kDa的肌球蛋白重链下方出现了一条比较模糊的其他蛋白质条带。     

异黄酮与葛根素做比较异黄酮雌激素样作用更强的研究进展

一、试验研究 1.实验材料 （1）实验动物 20只昆明种雌性小白鼠,由内蒙古额济纳旗实验动物研究中心提供许可证号：〔SCIK（蒙2009-0001）〕。饲料为该中心提供的固体颗粒全价饲料,自由饮用自来水。     

高静压与к-卡拉胶对低脂猪肉凝胶保水和质构的影响

高静压处理与添加水溶性多糖是改善肉制品质构、保水性等品质的重要手段。本研究侧重调查100～300 MPa压力、0～1.0% к-卡拉胶添加水平对猪肉糜凝胶保水、质构的影响。试验结果表明，添加0.5%的к-卡拉胶可显著降低猪肉凝胶的蒸煮损失，提高总持水性及凝胶硬度(P＜0.05)；200 MPa以上的高静压不仅可以显著降低肉糜的蒸煮损失，而且也能够显著提高凝胶的硬度、黏结性与咀嚼性(P＜0.05)；但100～300 MPa的高静压对1.0%卡拉胶水平的凝胶弹性影响不明显(P＞0.05)。此外，对于肉制品保水性的评价，应注意选择合适的评价方法，尤其是蒸煮损失差异较大的肉制品样本，评价方法选择的合理性将直接影响评价的结果。     

短小乳杆菌重组S-层蛋白质的纯化及其体外黏附性的初步鉴定

以本实验室已构建的pMD19T-slp为模板,应用PCR方法亚克隆slp基因,将其定点插入到原核表达载体pGEX-4T-3中,成功构建原核表达载体pGEX-slp,经IPTG诱导获得重组融合蛋白GST-SLP并用LiCl的方法进行纯化。应用SDS-PAGE和Western blot方法对表达产物进行鉴定,应用ELISA方法鉴定重组融合蛋白的体外黏附特性。在大肠埃希菌裂解样品中,SDS-PAGE和Western blot结果均证明分子质量大小约为71ku的重组融合蛋白GST-SLP的存在;ELISA结果提示,该重组融合蛋白在体外能够有效地黏附在乳酸乳球菌NZ9000表面。本试验为S-层蛋白质生物学特性的进一步研究奠定了基础。     

武川县农业生态经济类型区划分的研究

以位于阴山北麓生态脆弱带的武川县为研究对象。以近年来该县农业经济发展统计资料为依据。运用主成份聚类分析方法。将武川县划分为东南部山地农业区，北部丘陵地农业区，西北部风蚀沙化农牧结合区和西南部山地农牧结合区，并分析了各区农，林，牧业发展状况，为农业和牧业结构调整提供了科学依据。     

内蒙古锡林郭勒盟地区优势蜱种及其基因多样性分析

为了解内蒙古锡林郭勒盟地区的优势蜱种及其存在的基因多态性,应用传统形态学和分子生物学相结合的方法,对该地区14个主要牧区采样点进行蜱虫种型的鉴定和基因多态性分析。通过传统形态学鉴定方法,对蜱虫样品进行显微镜观察以初步确定蜱属。采用聚合酶链式反应(PCR)对蜱虫的16S rRNA基因序列进行扩增,测序后对蜱种进行分子鉴定和基因序列同源性分析,确定蜱种多样性。应用Mega 6.06软件构建系统进化树,与GenBank数据库中已知蜱虫的16S rRNA进行聚类分析,以确定蜱进化的规律。结果显示14个不同地区的蜱虫均属于草原革蜱,为锡林郭勒盟地区的优势蜱种之一,但不同地区的蜱虫之间存在明显的基因多态性。     

一种蜱源性粪产碱杆菌内蒙古株的分离与鉴定

从内蒙古呼伦贝尔地区自然放牧的羊群中采集蜱虫样本,分离出可疑细菌,并采取常规方法和分子生物学方法对其进行种型鉴定。采用高盐普通琼脂培养基从收集的蜱虫体内分离和纯化培养可疑细菌,并进行革兰染色;对纯化的可疑细菌进行生理生化、药物敏感试验及对盐的耐受性鉴定;PCR方法扩增和测序16SrRNA基因序列并应用Mega6.0生物软件绘制出该细菌系统发育进化树。结果显示,分离菌革兰染色呈革兰阴性短杆菌;溶血性试验结果呈现α-溶血;药物敏感试验对头孢类抗生素敏感,对青霉素、两性霉素B耐药;该菌具有运动性并可在含有10%的NaCl的培养基中生长;蔗糖、甘露醇、麦芽糖、乳糖、葡萄糖等糖分解试验、吲哚试验、硝酸盐(还原)试验、明胶液化试验等结果为阴性;脲酶试验、氧化型与发酵型试验、西蒙氏枸橼酸盐试验、氧化酶试验结果为阳性;根据16SrRNA基因绘制的系统发育树可看出,本试验分离株与粪产碱杆菌遗传距离近,处在相同分支。本试验成功分离出1株新的蜱源性粪产碱杆菌(Alcaligenes faecalis),重新命名为Alcaligenes faecalis IMH(简称为A.faecalis IMH),其16S rRNA基因重新注册于GenBank中,注册号为:LC213619.1。本试验为进一步研究该菌的致病性奠定基础。     

查干额日格嘎查走上致富路

隆冬季节,我们来到了巴彦温部苏木查干额日格嘎查。这里漫山遍野虽是白雪覆盖,但我们的座谈会却是一片欢腾,春意浓浓。嘎查干部和牧民们代表争先恐后地向我们介绍一年来所走过的路程。嘎查干部说:“我们年初制定的四项奋斗目标,即牲畜头数稳中有增,种植业大步上,人均收入增加100元,10户特困户争取脱贫,现都已如期实现”。牧民代表     

猪流行性腹泻病毒S2基因B细胞表位嵌入型S-层蛋白在副干酪乳杆菌中的表达与鉴定

【目的】构建新型猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)乳酸菌活菌疫苗载体。【方法】应用DNA重组技术将嗜酸乳杆菌S-层蛋白(SLP)基因及PEDV S2基因B细胞表位(EpitopeS2)融合基因(SLP-EpitopeS2)克隆到乳酸杆菌表达载体pTRK892中,构建重组载体pTRK-SLP-EpitopeS2,通过电转化方法将重组质粒导入副干酪乳杆菌中,获得重组副干酪乳杆菌。分别用SDS-PAGE、Western blotting和免疫荧光试验(IFA)鉴定目的蛋白在副干酪乳杆菌中的表达。【结果】PCR结果显示,成功扩增出大小为1 400 bp的目的条带,与插入融合基因大小一致,双酶切结果出现大小分别为1 400和4 700 bp的2条带,基因测序结果显示无碱基缺失和突变等,从而确定重组质粒pTRK-SLP-EpitopeS2构建正确。SDS-PAGE、Western blotting结果显示,在48 ku处出现与理论值大小一致的目的蛋白条带,表明融合基因SLP-EpitopeS2在副干酪乳杆菌中得到有效表达。IFA结果显示,与对照组副干酪乳杆菌相比,重组副干酪乳杆菌均能被激发出特异性绿色荧光信号,与高浓度氯化锂(LiCl)洗脱下来的菌体膜蛋白样品补充鉴定试验结果相吻合。表明融合蛋白SLP-EpitopeS2可能在副干酪乳杆菌的菌体表面表达。【结论】成功构建了PEDV EpitopeS2及嗜酸乳杆菌SLP嵌入型融合表达载体pTRK-SLP-EpitopeS2,为乳杆菌活菌载体疫苗相关研究奠定了基础。     

牛微小隐孢子虫表面抗原CP15基因原核表达及其表达产物的鉴定

试验旨在构建微小隐孢子虫表面抗原CP15基因原核表达载体并获得重组CP15蛋白。试验以已知重组质粒pMD-CP15为模板,PCR方法扩增出CP15基因片段,并亚克隆到pGEX4T-3,构建了在E.coli BL21中GST融合表达载体pGEX-CP15;经1 mmol/L IPTG进行诱导表达获得目的蛋白,其大小采用SDS-PAGE电泳和Western blotting进行鉴定。结果表明,扩增出约390 bp的微小隐孢子虫表面抗原CP15基因片段并成功构建pGEX-CP15质粒,表达出分子质量为42 ku的融合蛋白,与推导的理论值相符。Western blotting显示该蛋白能被GST血清识别。牛微小隐孢子虫表面抗原CP15基因在大肠杆菌中得到了高效表达。