富集文库－菌落原位杂交法筛选栉孔扇贝的微卫星标记

应用微卫星富集文库─菌落原位杂交法,筛选得到了40个栉孔扇贝的微卫星标记.用固定了(AG)15和(AC)15探针的尼龙膜(Hybond N )捕捉含有微卫星DNA的片段,经洗脱、PCR扩增和TA克隆,构建栉孔扇贝的微卫星富集文库.利用ECL试剂盒(Amersham公司)标记的(AG)15和(AC)15探针进行菌落原位杂交筛选微卫星富集文库,阳性克隆经测序获得微卫星DNA.富集文库中1200个重组克隆经过菌落原位杂交后,532个(44.3%)为阳性克隆.任意挑选100个克隆测序,结果显示所有的克隆都至少含有一个微卫星位点.利用软件设计了65对特异性PCR引物,40对能扩增出清晰的带谱;利用48个栉孔扇贝个体评价微卫星位点,分析表明37个位点具有多态性.不同的位点获得的等位基因数目为2～14个不等,37个多态性位点共获得258个等位基因,平均每个位点获得7.0个等位基因.观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)及多态性信息含量值(PIC)的范围分别为0.1000～1.0000、0.1197～0.9831和0.1172～0.9782.结果表明,富集文库─菌落原位杂交法适合大规模筛选目标物种的微卫星标记.     

河北扇贝养殖海域叶绿素a含量分布特征及初级生产力估算

干2004年9月--2005年11月,对河北扇贝养殖区海域进行了10个航次的叶绿素a含量调查。调查结果表明：（1）养殖区海域表层海水中叶绿素a平均浓度为0．73～4．44μg／L，叶绿素a浓度月均值周年变化呈单峰型。最大值出现在3月份。（2）叶绿素a平均浓度区域分布为：近岸海区〉中岸海区〉远岸海区，呈现从近岸海区向远岸海区逐渐降低趋势。（3）测区初级生产力均值变化范围为52．09～1390．3mg C／m^2·d，最低值出现在11月份．最高值出现在6月份,10个航次总平均值为311．74mgC／m^2·d。海区的营养盐、浮游动物及养殖贝类的摄食是制约影响调查海区叶绿素a周年变化和空间分布的主要因素。     

河北省扇贝养殖区河口区域磷酸盐污染分析

在河北省扇贝养殖区7条主要河流的入海口,分别在丰水期和枯水期对活性磷酸盐进行监测与分析,并采用单因子法进行评价.结果显示:5月枯水期7条入海河口活性磷酸盐含量全部超标,大蒲河入海口磷酸盐含量高达1.177 mg/L,超标39倍;各河口磷酸盐甲均污染指数高达19.44.8月丰水期除戴河口磷酸盐污染指数小于1,属末被污染外,其余各入海河口活性磷酸盐含量也全部超标,丰水期大蒲河入海口磷酸盐含量仍最高,达0.930 mg/L,超标31倍;丰水期各河口磷酸盐平均污染指数也达9.41.河北省扇贝养殖区河口区域磷酸盐含量远远超过国家海洋局制定的<海水增养殖区监测技术规程>中规定的扇贝养殖区第二类水质标准.     

扇贝常见病害种类及其流行趋势和防控

扇贝是我国北方贝类养殖的第一大品种。我国的扇贝养殖已有近30年的历史。1979年栉孔扇贝人工育苗及其养成获得成功，从此栉孔扇贝人工养殖开始走上规模化发展道路。80年代初又从日本引进了虾夷扇贝，从美国引进了海湾扇贝，在栉孔扇贝人工育苗技术的基础上，分别获得育苗和养殖成功。尤其是海湾扇贝采用控温育苗技术，当年育苗当年即可养成成品贝，更加速了扇贝养殖业的发展。     

10月份山东省水产养殖病害测报情况通报

10月份,全省各市对16个水产养殖品种(鱼类7种,甲壳类3种,贝类4种,棘皮动物1种,藻类1种)的病害发生情况进行了监测报告。鲫、乌鳢、虹鳟、大菱鲆、中国对虾、日本对虾、扇贝、虾夷扇贝、牡蛎、缢蛏和海带11个养殖品种没有发生病害;草鱼、鲤、南美白对     

栉孔扇贝异精雌核发育四倍体早期胚胎发育的细胞学荧光显微观察

用1500μW/cm2的紫外线照射长牡蛎(Crassostrea gigas)精子60 s以进行灭活处理,并使之与栉孔扇贝(Chlamys farreri)卵子受精,在卵子受精后排出第一极体前用6-DMAP(50 mg/L)处理受精卵,持续处理35 min,抑制第一极体和第二极体的排放,诱导异精雌核发育四倍体。采用二脒基苯基吲哚(DAPI)荧光染色显微观察法,对灭活的长牡蛎精子诱导的栉孔扇贝雌核发育四倍体早期胚胎发育过程进行细胞学观察。结果表明:经紫外线灭活过的长牡蛎精子进入栉孔扇贝卵子后发生轻微膨胀;在第一次卵裂中期,精核形成一致密的染色质小体(DCB),位于两组分开的母本染色体之间,不参与核分裂;第一次卵裂结束时DCB滞留于两卵裂球的分裂沟上或进入其中一分裂球中;第二次卵裂过程中,DCB的去向与第一次卵裂时基本一致。6-DMAP处理有效地抑制了第一极体和第二极体的排出,从而使雌核四倍化。对担轮幼虫染色体倍性分析结果表明,通过本方法可以获得6.25%的四倍体幼虫。本研究还对灭活的异源长牡蛎精子诱导栉孔扇贝雌核发育四倍体过程中产生的复杂倍性、核物质分离紊乱及多精附卵现象进行了观察和分析。     

两种壳色虾夷扇贝的RAPD分析

采用RAPD技术对两种壳色虾夷扇贝Patinopecten yessoensis的遗传多样性和遗传结构及其分化进行研究。用筛选出的22个随机引物对白色贝和褐色贝各40个个体进行RAPD扩增，进行群体内及群体间的遗传学分析。白色贝共检测出128个多态位点，多态位点的比例为79．5％，Shannon遗传多样性指数为0．424；褐色贝共检测出127个多态位点，多态位点的比例为78．9％，Shannon遗传多样性指数为0．423。白色贝和褐色贝之间的遗传相似性指数和遗传距离为0．961和0．039，二者之间的遗传分化指数Gst为0．052，遗传分化的程度较低。结果表明，白色贝和褐色贝之间的等位基因频率、多态位点的比例和遗传多样性等的差别不明显，遗传变异主要来自于群体内。S285—1在褐色贝大部分个体中都能获得扩增片段，但在白色贝所有个体中均未见这个位点的扩增片段，推断S285—1为白色贝的特异阴性片段。     

河北省扇贝养殖区河口区域石油类污染分析

在河北省扇贝养殖区7条主要人海河流河口区域设立监测站位,于2007年5月枯水期和8月丰水期对水样和沉积物样品中石油类含量进行监测.河口水样平均石油类含量丰水期为0.94 mg/L,超标18.8倍;枯水期为0.51 mg/L,超标10.2倍;丰水期明显高于枯水期.河口沉积物中石油类含量丰水期为473μg/g,为标准值的0.95倍;枯水期为777μg/g,为标准值的1.55倍;部分河口沉积物中石油类含量超标严重.河口区域水体石油类污染的主要原因是大陆径流.     

6-DMAP诱导栉孔扇贝异源雌核发育二倍体

采用紫外线遗传灭活的长牡蛎精子激活栉孔扇贝卵子，运用L9（3^4）设计不同6-DMAP的处理条件来诱导染色体加倍，获得第二极体抑制型栉孔扇贝雌核发育二倍体早期胚胎。以雌核发育担轮幼虫为材料，滴片法制备染色体并采用计数法统计倍性，分析不同6-DMAP浓度、诱导时机和诱导持续时间对雌核发育二倍体诱导率的影响，并统计早期胚胎畸形率。结果表明，不同6-DMAP浓度、诱导时机和诱导持续时间对异源精子诱导栉孔扇贝雌核发育二倍体的诱导率均有显著影响；早期胚胎畸形率与二倍体的诱导率呈负相关，y=46.632-0.891x（r=-0.813，P〈0.01）。6-DMAP诱导栉孔扇贝雌核发育二倍体的最佳处理条件为：20%～25%受精卵排放出第1极体时，60μg/ml的6-DMAP持续处理25min可得到最高的诱导率为29.5±5.36%。研究结果为6-DMAP诱导栉孔扇贝雌核发育染色体加倍提供了一定的细胞学依据和技术参数。     

虾夷扇贝体形性状对软体重和闭壳肌重的影响效果分析

利用虾夷扇贝表型性状资料，分析性状间的相关关系及其相关程度，建立相应的回归方程，为扇贝的选择育种奠定基础。试验随机抽取126只体形规则的3龄大连獐子岛海区底播增殖的虾夷扇贝，其中雌雄各63只，测定其壳长(X1)、壳高(X2)、壳宽(X3)、活体重(Y)、软体重(Z)和闭壳肌重(W)，分别计算相关系数，采用通径分析方法计算了以体形性状为自变量对软体重和闭壳肌重作依变量的通径系数、决定系数及相关指数，定量的分析了体形性状对虾夷扇贝解剖性状的影响。结果表明虾夷扇贝壳长、壳宽、壳高与活体重、软体重和闭壳肌重的相关系数均达到极显著水平(P<0.01)；壳高、壳宽是影响雌性软体重的主要因素，壳长、壳宽是影响雄性软体重的主要因素，而混合组受3个壳尺性状的共同影响；影响虾夷扇贝闭壳肌重的主要因素是壳宽，壳长、壳高的作用不显著；决定系数分析结果与通径分析结果有一致的变化趋势；多元回归分析，剔除不显著因子，建立了壳长、壳高、壳宽对软体重、闭壳肌重的回归方程：1). 雌性 Z= -128.573 +1.355X2 +1.407 X3；W= -8.216 +0.869X3；2). 雄性 Z =138.493+1.082 X1+2.524 X3；W= -11.855 + 0.955 X3；3). 混合 Z = -133.939 +0.606 X1+0.679X2 + 1.709X3；W= -9.525+ 0.896 X3。通过性状间的相关分析对两性状间的关系进行明确的定量，有利于制定合理的多性状选择方案，为虾夷扇贝选育提供理想的测度指标。