虫草及相关真菌发酵产物对烟草黑胫病的抑制效果

为了探索真菌次生代谢产物对烟草黑胫病的抑茵活性,采用生长速率法,对来自全球的75株虫草及相关真菌菌株发酵液进行活性筛选,并对活性较强的白色生赤壳[Bionectria ochroleuca (Schwein.)Schroers&Samuels](四川)、细脚拟青霉[Paecilomyces tenuipes (Peck) Samson]、白色生赤壳[Bionectria ochroleuca (Schwein.)Schroers&Samuels](韩国)和尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum Schltd)4种发酵虫草液及虫草菌素进行不同浓度的室内毒力测定.结果表明:对烟草黑胫病菌菌丝生长具有抑制作用的有30株发酵液,占总筛选菌株的40.00％;4种真菌发酵液对烟草黑胫病菌具有较强的抑制作用,且随使用剂量的增大而增强;从蛹虫草液体发酵液中提取的虫草素对烟草黑胫病菌也具有明显的抑制作用,且随使用剂量的增大而增强,其有效抑制中浓度EC50=77.98 μg/mL.     

兰科植物天麻基因组DNA提取方法的比较研究

天麻Gastrodia elata组织内含有大量的糖类、酚类等次生代谢物质，用常规的CTAB(十六烷基溴化铵)法或SDS(十二烷基硫酸钠)法难以获得高质量的DNA模板。为获得高质量的DNA，笔者通过对兰科植物天麻基因组DNA几种提取方法以及天麻不同部位所得的DNA质量进行分析。结果表明，SDS—CTAB法是较理想的提取方法，能满足普通PCR的需要。天麻不同部位DNA提取的结果表明，幼嫩花茎是获得高质量DNA的最佳部位。     

不产子实体蛹虫草单孢子分离株的获得及RAPD分析

对优势蛹虫草原始菌株WWM04进行单孢子分离,共获得9个单孢子分离株,采用米饭培养基培养确证并且获得6个完全不产子实体的单孢子分离株。利用随机扩增多态性DNA(RAPD)分子标记方法对菌落差异的4个菌落特征典型的不产子实体单孢子分离株(SSP2、SSP7、SSP19和SSP21)、原始菌株以及由原始菌株12次转接后退化的菌株进行遗传多样性分析。结果表明,引物S37、S61对6个菌株的扩增谱带具有非常明显的特异性,该结果为蛹虫草退化分子标记奠定基础,并且在一定程度上也印证了蛹虫草异核现象和准性生殖理论。     

银杏内生真菌及发酵液粗提物抗肿瘤活性研究

为了筛选有抗肿瘤活性的银杏内生真菌及次生代谢产物,采用MTT法,用105株银杏内生真菌发酵液的乙酸乙酯粗提物分别对A549肺癌细胞与Hep G2肝癌细胞进行抗肿瘤活性的检测。结果显示:有12株内生真菌对A549细胞表现出一定的抑制,有11株内生真菌对Hep G2细胞表现出一定的抑制,经过梯度浓度筛选,其中菌株G-04-05对A549和Hep G2细胞都显现出了较高抑制作用,对其活性成分值得进一步的探索和研究。     

固体培养条件对蛹虫草产子实体和虫草菌素的影响

研究了营养液不同pH值和米粒大小两个培养条件对蛹虫草固体发酵产子实体和虫草菌素的影响.当营养液pH值为5.5～6.0时子实体的产量最大,营养液pH值为6.5时,虫草菌素总的产量最大,达48.44 g/瓶.较大的米粒有利于蛹虫草子实体的生长,较小的米粒有利于蛹虫草虫草菌素的积累.子实体的产量随着米粒的变小而减少;子实体中虫草菌素的含量随着米粒的变小而增加.当采用整米作为培养基基质时,蛹虫草子实体产量最大,达1.67 g/瓶,当采用40目米 10目米(1∶1,M/M)作为培养基基质时,蛹虫草子实体中虫草菌素含量最大,达1.87%,虫草菌素总的产量也最大,达52.46 mg/瓶.     

一株嗜酸氧化亚铁硫杆菌的生物学特性研究与分子鉴定

从贵州省六盘水市某煤矿矿井水中分离到1株脱硫菌SCJ,其最适生长温度为30℃,最适pH为2.0。SCJ菌株是化能自养菌,能分别利用亚铁、单质硫、葡萄糖生长,不能利用硫代硫酸钠或蛋白胨生长,具有较强的亚铁和硫氧化活性。以该菌株及其GenBank的近似16SrDNA序列构建系统发育树,鉴定SCJ菌株为嗜酸氧化亚铁硫杆菌Acidthiobacillus ferro-oxidans。     

贵州野生春兰遗传多样性的RAPD分析

采用RAPD标记对贵州及周边分布的野生春兰遗传多样性进行分析.结果表明:筛选的48个引物共扩增了324条600～2 000 bp带,其中201条(62.0%)显示多态性,RAPD标记可以有效地用于春兰野生资源遗传多样性评价;原产于贵州不同居群问样品的遗传差异性较大,多态性百分率为36.8%(荔波样品)～69.8%(黎平样品),高于60%的样品占全部贵州样品的1/3,分布于全省5个地州市;聚类分析显示,样品的聚类具有很强的地域性,特别是贵州样品表现更为明显,来自川西的样品和黔北、黔东北的样品具有很高的同源性.     

石斛中多糖和生物碱的含量测定

石斛Caulis dendrobii味甘,微寒,归胃、.肾经,为常用中药,其药用历史悠久.原植物为兰科石斛属Dendrobium多种植物的茎,具有益胃生津、滋阴清热、润肺止咳之功效[1].现代科学研究表明,石斛主要成分为多糖和生物碱,其药理作用与二者有着密切关联[2-5].随着人们生活水平的提升,保健意识的增强,对石斛的需求不断增加,有必要寻找高产量的品种以利推广.迄今,平行比较多种石斛的文献少见报道,为此,笔者从成分含量上进行比较探索,用苯酚-硫酸法和酸性染料比色法测定所收集的19种石斛的多糖和总生物碱含量[6-7],为其品种选育推广提供参考.     

缺陷假单胞菌HD13发酵过程中生物量和抗菌活性的变化

为探索简单快捷检测缺陷假单胞菌发酵过程中生物量和抗真菌病原菌活性的方法,采用OD值法、菌饼法、差量法和活菌计数法对缺陷假单胞菌菌株HD13发酵过程中生物量和抗菌活性的变化进行研究。结果表明:菌株HD13不同浓度的发酵液与其OD值、抑制率呈正相关,在30℃时其最佳发酵时间为4.5d;其发酵液的最佳检测波长为460nm,在此波长下,OD值(x)与活菌数(y1)、发酵物湿重(y2)、发酵物干重(y3)和病原真菌抑制率(y4)的回归方程分别为y1=1.585 6x+0.060 5(R2=0.991 9),y2=7.223 2x+1.080 2(R2=0.991 9),y3=0.951x+0.072 2(R2=0.915 8),y4=84.166x-3.960 1(R2=0.948 2)。运用OD值可以快速、准确和实时地监控菌株HD13发酵过程中生物量和抗菌活性的变化。