大鲵虹彩病毒贵州分离株MCP基因的克隆与原核表达

根据Gen Bank中大鲵虹彩病毒主衣壳蛋白MCP(major capsid protein,MCP)基因序列(序列号:KF512820),设计一对特异性引物,以大鲵虹彩病毒贵州分离株基因组DNA为模板,PCR扩增大鲵虹彩病毒MCP基因并测序,与Gen Bank中大鲵虹彩病毒MCP基因进行比对,然后将其亚克隆到原核表达载体p ET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后进行Western blot分析。结果显示:PCR扩增出长度为1 392 bp的片段,与Gen Bank中大鲵虹彩病毒MCP基因核苷酸序列相似性为99.7%~99.9%,SDSPAGE电泳显示该重组蛋白的相对分子质量约为67×103。免疫原性检测结果表明,该重组蛋白可与兔抗大鲵虹彩病毒阳性血清特异性反应,具有免疫原性。     

国外引进种牛暴发附红细胞体病的诊治

正2015年10月,贵州省某肉牛养殖场从澳大利亚引进60头安格斯种牛突然发病,先后死亡15头。通过发病情况、临床症状、病理变化以及采用血推片染色,光学显微镜进行病原学诊断检测,确诊为附红细胞体病。现将诊治情况报道如下,供同行参考。1流行情况2015年10月11日,贵州省某肉牛养殖场从国外引进的60头安格斯种母牛突然发病。该群牛系     

HPLC法同时测定和评价“黔中金荞麦”中4种成分含量

“黔中金荞麦”是贵州省农业科学院畜牧兽医研究所选育的优质牧草（品种登记号：2019581）。为建立同时测定该药材中表儿茶素、原花青素B2、芦丁和槲皮素的检测方法,考察其含量多样性。采用高效液相色谱法建立检测方法,测定并分析其含量与野生金荞麦的差异。结果得出检测方法为：C18柱（250×4.6 mm,5 μm）,乙腈-0.4%磷酸水梯度洗脱,进样量10 μL,流速0.7 mL/min,检测波长254 nm,温度30 ℃;原花青素B2、表儿茶素、芦丁和槲皮素分别在5～85 μg/mL（r2=0.9998）、5～80 μg/mL（r2=0.9998）、0.5～8 μg/mL（r2=0.9996）、0.125~2.0 μg/mL（r2=0.9999）范围内呈现良好线性关系,加样回收率高;黔西和麦坪的“黔中金荞麦”4种成分总含量高达1189.70μg/g、1108.01μg/g,其中原花青素B2、芦丁和槲皮素含量最高,丹寨野生金荞麦表儿茶素含量最高。试验结果说明本法准确可靠,适合“黔中金荞麦”的内控质量监测,“黔中金荞麦”中活性物质含量高且质量稳定,优于野生金荞麦。因此本试验为该药材的开发应用提供了理论基础。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒及混合感染的诊治

针对贵州省遵义市某规模化猪场的发病情况,通过病理学观察、血液学和细菌学检查及病原核酸检测等方法,确诊该猪场发生了猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒、猪瘟病毒、猪链球菌与猪附红细胞体的混合感染,经采取综合防治措施,控制了疫情.为进一步了解PRRS在贵州省各地区的流行情况、多种病原的混合感染情况及探索PRRS有效的防治方法提供理论依据.     

贵州山羊的主要寄生虫病及其防控中存在的问题

为加强贵州山羊寄生虫病的防控,减少寄生虫病对山羊养殖业的危害。文章对贵州山羊主要寄生虫病的病原形态、临床特征进行了介绍,并结合山羊寄生虫病日益严重的危害,对贵州山羊寄生虫病防控中存在的问题进行了探讨。     

对流免疫电泳鉴定猪源多杀性巴氏杆菌血清型

通过特异性试验、敏感性试验、阻断试验等建立鉴定猪源多杀性巴氏杆菌Pasteurella multocida血清型的对流免疫电泳（CIE）技术。结果表明，抗原、抗体之间具有较好的特异性，而且有着很好的重复性；敏感性较琼脂扩散试验至少提高4倍；对本实验室分离的13株Pm进行荚膜血清型分型鉴定显示，A型（8／13，61．54％）、D型（5／13，38．46％），符合PCR鉴定结果。本方法具有快速、特异等特点，且不需要特殊设备，操作简便。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒 Nsp10基因的克隆及序列分析

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒 BJ-4序列,选择Nsp10基因保守区域设计并合成特异性引物,用RT-PCR方法扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州地方株(命名为JL株)Nsp10基因片段,克隆到pMD18-T载体并测序,应用DNASTAR、Clustal_1.81和Mega序列分析软件进行同源性比较.结果表明:贵州JL株Nsp10基因的cDNA长699 bp,可编码233 个氨基酸;贵州JL株Nsp10基因与早期分离毒株MLV株、BJ-4株、VR-2332株、CH-1a株、CH2002株和GS2004株相应序列的核苷酸同源性为 91.7%～94.0%,氨基酸同源性为97.4%～98.7%;而与最近分离毒株HN2007株、SX2007株、GD2007株、YN2008株、GS2008株、XL2008株、TJ株和JXA1株的核苷酸同源性为 98.3%～98.6%,氨基酸同源性为 99.6%～100%.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的诊断

<正>猪繁殖与呼吸综合征(porcine…reproductive…and…respiratory…syndrome,PRRS)是由PRRSV(Porcine…reproductive…and…respiratory…syndro…me…Virus,PRRSV)引起猪的一种高度接触性传染病,主要特征是妊娠母猪早产、流产、死胎、木乃伊胎等繁殖障碍及各种年龄猪呼吸系统疾病,仔猪高死亡率、感染猪出现免疫抑制等。高致病性     

斗鸡新城疫强毒感染的诊治

为对某斗鸡场病死斗鸡病死因进行确诊,进行了流行病学调查、剖检病变观察、细菌分离及RT-PCR检测试验,结果该场病死斗鸡肛门周围粘有灰绿色粪便,腹部、颈部、胰腺、腺胃等多处出血;在培养基上肝脏组织液无细菌生长。针对新城疫病毒（NDV）强弱毒基因序列之间的差异设计通用、强毒和弱毒引物,样本RNA经RT-PCR扩增后,通用型和强毒型鸡新城疫病毒扩增出特异性片段,弱毒引物未扩增出相应片段。由此确诊该场病死斗鸡为新城疫强毒感染。