尼罗罗非鱼干扰素诱导蛋白44基因克隆及表达分析

【目的】探索干扰素诱导蛋白44基因（ifi44）在尼罗罗非鱼各组织的分布特征及其响应无乳链球菌感染和聚肌胞苷酸［Poly（I:C）］刺激过程中的表达模式，为进一步揭示ifi44基因在鱼类免疫应答中的作用机制打下基础。【方法】克隆On-ifi44基因开放阅读框（ORF），通过ExPASy、TMHMM-2.0、Euk-mPLoc 2.0、SOPMA和SWISS-MODEL等在线软件进行生物信息学分析，根据单细胞转录组测序结果分析On-ifi44基因在细胞层面的分布情况，并采用实时荧光定量PCR检测On-ifi44基因在尼罗罗非鱼各组织中的表达分布特征及在无乳链球菌感染和Poly（I:C）刺激后的时序表达情况。【结果】 On-ifi44基因ORF序列全长1437 bp，编码478个氨基酸残基，其编码蛋白分子量为52.7 kD，理论等电点（pI）为4.97。On-ifi44含有1个TLDc_dom结构域（1~157 aa）和1个GTP-bd结构域（197~322 aa），不含跨膜结构域。On-ifi44氨基酸序列与奥利亚罗非鱼ifi44氨基酸序列的相似性为97.94%；基于ifi44氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树也显示On-ifi44氨基酸序列与奥利亚罗罗非鱼ifi44氨基酸序列聚为一支，二者具有较近的亲缘关系。On-ifi44基因在尼罗罗非鱼的肠道、肝脏、鳃、皮肤、脾脏、体肾、胸腺、脑、头肾、肌肉、心脏等11个组织中均有表达，且主要在T细胞亚群表达；经无乳链球菌感染和Poly （I:C）刺激后，On-ifi44基因在尼罗罗非鱼脾脏、肾脏、头肾和肠道组织中的相对表达量均发生变化，且存在明显的时间依赖性。【结论】 On-ifi44含有1个TLDc_dom结构域和1个GTP-bd结构域，进化保守且在不同物种间具有相似的生物学功能； On-ifi44基因在无乳链球菌感染和Poly（I:C）刺激后呈时间依赖性上调表达，表明ifi44基因作为重要的调节因子，参与了尼罗罗非鱼抗细菌感染、抗病毒增殖的免疫应答过程。     

一种(鱼师)鱼诺卡氏菌酪氨酸蛋白磷酸酶基因的克隆及功能初步研究

這鱼诺卡氏菌是鱼类诺卡氏菌病的主要病原,可导致鱼类慢性系统性肉芽肿疾病.這鱼诺卡氏菌全基因组序列分析发现了一个酪氨酸蛋白磷酸酶(protein tyrosine phosphtase,PTP)基因,生物信息学分析显示该基因很可能编码一个靶向定位于宿主细胞线粒体的分泌蛋白.本实验对這鱼诺卡氏菌PTP进行了基因克隆、分泌蛋白鉴定、亚细胞定位、过表达和线粒体膜电位检测,结果显示,在這鱼诺卡氏菌胞外产物中质谱鉴定到了PTP肽段,证实其为分泌蛋白.亚细胞定位研究观察到PTP-GFP融合蛋白均匀地分布在FHM细胞中,与线粒体分布不重合,说明這鱼诺卡氏菌PTP蛋白并未靶向定位于线粒体.亚细胞定位和过表达研究都显示PTP蛋白在FHM细胞中表达后,细胞核出现固缩浓染、凋亡小体等明显的细胞凋亡特征.通过线粒体膜电位检测表明,在pcDNA-PTP转染后48 h,线粒体跨膜电位被明显破坏,说明這鱼诺卡氏菌PTP很可能是一种可诱导细胞凋亡的细菌蛋白.通过对這鱼诺卡氏菌PTP开展基因克隆和功能初步研究,为进一步揭示该基因的功能和深入了解這鱼诺卡氏菌的分子致病机理奠定了基础.     

北部湾春季多齿蛇鲻生物学特征及其年际变化

根据北部湾渔港采样及海上调查生物学测定与数据分析，研究了北部湾多齿蛇鲻(Saurida tumbil)春季生物学特征及其年际变化。结果显示，2008~2018年春季，多齿蛇鲻个体呈小型化趋势，各年度平均体长范围为15.8~16.9 cm，平均体质量范围为48.8~77.5 g，2018年的平均体长和平均体质量比2008年分别降低了6.5%和34.5%。体长–体质量关系式中的异速生长参数b的范围为3.03~3.42，表明春季群体主要呈正异速生长状态(b>3)。性成熟体长年际变化分析表明，北部湾多齿蛇鲻存在性成熟提前的现象，雌性群体50%性成熟体长从2008年(19.0 cm)至2018年(16.6 cm)整体呈减小趋势，10年间减小比例为12.6%，其中，2011~2015年海上采样的样品对比显示，50%性成熟体长减小比例为3.8%。2008~2018年北部湾多齿蛇鲻的肥满度整体呈下降趋势，均值变化范围为1.09~1.29，渔港采样样品和海上采样样品的肥满度年际变化皆呈下降趋势。     

壳聚糖接枝庆大霉素缀合物对小鼠溃疡性结肠炎的保护效果

为观察壳聚糖接枝庆大霉素缀合物（CS-GT）对葡聚糖硫酸钠（Dextran sulfate sodium salt,DSS）诱导小鼠溃疡性结肠炎的保护效果。30只健康雄性小鼠（C57BL/6J,SPF级）随机平均分为5组，分别为对照组、DSS组和CS-GT低、中、高剂量添加组。处理结束后，观察临床变化、肠道结构、血清生化指标和炎性因子表达。结果发现，与对照组相比，DSS处理组小鼠体重下降（P<0.01），结肠长度缩短（P<0.01），肠道出血及肠绒毛脱落，血清中ALB与TP含量显著降低（P<0.01），促炎因子IL-6表达水平显著升高（P<0.01），抗炎因子IL-4和IL-13表达水平显著降低（P<0.05）。而添加中、高剂量CS-GT组相较于DSS组小鼠体重显著上升（P<0.05）、结肠长度显著增加（P<0.05），肠出血现象减少，血清中ALB与TP含量显著上升（P<0.05），促炎因子IL-6表达水平显著下降（P<0.05），抗炎因子IL-4和IL-13有一定的上升趋势。说明CS-GT对DSS诱导的小鼠结肠炎有明显保护效果，有...     

以学生为主体的“作物栽培学”课程实践教学改革 探讨——以广东海洋大学“水稻栽培学”为例

本文总结了“作物栽培学”实践教学过程中存在的教学内容多而课时数少、实验教学不强且内容单调、实践实 习教学过程考核方式单一及学生学习效果评价不全面等问题，结合多年的教学经验，创新性地提出“线上平台资源+线 下答疑解惑+田间实践操作”相结合的教学模式，为培养新时代“乡村振兴”所需的创新型、复合型、应用型的科技人才 提供参考。