鰤鱼诺卡氏菌HYD基因的克隆及亚细胞定位研究

鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)是鱼类诺卡氏菌病的主要病原。鰤鱼诺卡氏菌水解酶(hydrolase,HYD)可能是鰤鱼诺卡氏菌的毒力因子。研究结果表明鰤鱼诺卡氏菌HYD的肽段不是分泌蛋白。亚细胞定位研究发现HYD-GFP融合蛋白均匀地分布在胖头鲤(FHM)细胞的细胞质中。亚细胞定位和过表达研究都显示HYD蛋白在FHM细胞中表达后,细胞核出现固缩浓染、凋亡小体等细胞凋亡特征,但Caspase-3活性检测表明HYD并未显著增加细胞凋亡水平。研究为进一步了解鰤鱼诺卡氏菌的致病机理奠定了基础。     

生物统计法分析T-2毒素对凡纳滨对虾形态指标的影响

以不同剂量T-2毒素染毒的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)为研究对象,以毒素染毒剂量为自变量、凡纳滨对虾形态学指标为因变量,采用灰色关联度分析、通径分析和回归分析探究毒素剂量与染毒凡纳滨对虾形态学指标的相关性,筛选出最便捷、最简单的生物学统计方法。灰色关联度和通径分析显示,凡纳滨对虾体质量、体长、头胸甲长和第一腹宽是受T-2毒素影响最大的指标;利用回归分析进行显著性检验发现,T-2毒素对凡纳滨对虾体质量、体长、头胸甲长和第一腹宽指标的影响均为显著水平(P<0.05)。3种统计学方法得出的结果相吻合,体质量、体长、头胸甲长、第一腹宽等染毒凡纳滨对虾形态指标的重要生物学标记,均与T-2毒素的暴露剂量呈负相关。其中,灰色关联度分析法是最便捷、最简单的生物统计法。     

蚕沙叶绿素及丝素蛋白在肿瘤可视纳米示踪剂上的应用研究

大力开发蚕桑产业高附加值新产品是以高科技手段促进广西蚕桑产业可持续发展的重要途径。试验以蚕沙叶绿素、蚕茧丝素蛋白、大豆卵磷脂为主要原料,以人体必需的微量元素铁、锰或铜离子制备蚕沙叶绿素微量元素配合物,与水解丝素蛋白制备肿瘤可视纳米示踪剂,研究了示踪剂纳米粒大小及分布,对荷瘤小鼠进行了裸眼示踪实验。经过SPSS统计分析,在正常光线下纳米示踪剂能准确靶向乳腺癌组织,使肿瘤部位染成蓝色。相对于病理切片法,纳米示踪法准确率达93.75%。用蚕沙提取的叶绿素替代血红素C,用大豆卵磷脂替代心磷脂,与丝素水解蛋白等制备的纳米材料成本约为用血红素、心磷脂等制备纳米材料的千分之一,制备过程简单,能大规模工业化生产。该纳米示踪剂具有肿瘤裸眼示踪功能,为肿瘤的精准治疗提供新了材料,为提高蚕桑产业链向高附件加值的医药产业方向发展提供了新途径。     

CO2体积浓度对酒精废水培养微藻及其净化效果的影响

从4种常见微藻中筛选出能够充分利用木薯酒精废水及CO2废气生长的种类,并探究CO2体积浓度对其生长及净化废水中总氮(TN)、总磷(TP)、化学需氧量(CODCr)能力的影响。通过微藻在废水中生长的干重变化及叶绿素a(Chl-a)含量判断其生长情况,筛选出最适合的微藻。通过单因子试验,研究不同CO2体积浓度对筛选微藻的干重及叶绿素a(Chl-a)含量,以及CO2固定速率的影响,来寻找最适合生长的质量浓度。通过测定废水中TN、TP、CODCr的变化来评估净化作用。筛选试验结果表明,钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)能适应酒精废水和CO2废气中的生长环境,在未经稀释的酒精废水中,其干重和Chl-a均显著高于波吉卵囊藻、普通小球藻和四尾栅藻(P<0.05)。单因子试验结果显示,当通入体积浓度2.5%的CO2,在酒精废水中培养的钝顶螺旋藻的干质量为(1.62±0.05)g/L、Chl-a为(12.1±0.7)mg/L,均高于其他试验组(P<0.05)。同时其对酒精废水中TN、TP、CODCr的去除率显著最高,分别为(50.5±2.1)%、(73.2±2.0)%及(24.9±0.6)%。钝顶螺旋藻能够适应酒精废水的生长环境,能吸收利用CO2废气,并有不错的净化效果。最适合其生长的CO2体积浓度是2.5%。     

添加低分子壳聚糖对怀乡鸡生长、屠宰性能及肉品质的影响

为研究低分子壳聚糖对肉鸡生产性能及脂质代谢的影响,将300只42日龄怀乡鸡随机分成5组,每组6个重复,每个重复10只,分别饲喂基础日粮及基础日粮中添加0.20%、0.40%、0.60%、0.80%低分子(5000Da)壳聚糖的日粮,试验期42d。每周称重并统计采食量,试验末从每个重复选取1只接近平均体重的鸡测定屠宰性能指标及肉品质。结果表明:①添加低分子壳聚糖对生长性能没有显著影响(P0.05);②屠宰率、半净膛率、全净膛率、胸肌率、腿肌率组间差异不显著(P0.05),但添加壳聚糖显著降低怀乡鸡的肝脂率和腹脂率(P0.05),随着壳聚糖添加量的增加肝脂率和腹脂率均呈折线下降变化,其最佳降脂效应的添加水平分别为0.66%、0.56%;③各项胸肌肉品质指标组间均差异不显著(P0.05),但添加壳聚糖有降低胸肌滴水损失的趋势(P0.1),趋势分析呈折线变化,其最佳效应的添加水平为0.53%。综上,添加低分子壳聚糖对怀乡鸡的生长没有影响,但能显著降低肝脂和腹脂沉积,有改善肉品质的趋势,其适宜添加水平为0.58%。     

5-氨基乙酰丙酸对绿豆碳代谢及产量的影响

以绿豆品种绿丰2号和绿丰5号为材料,设置5-氨基乙酰丙酸（ALA）拌种处理,未用ALA拌种为对照,研究ALA对始花期绿豆碳代谢及产量的影响。结果表明,ALA提高了2个绿豆品种叶绿素a、叶绿素b以及总叶绿素含量,同时显著增强了2个绿豆品种叶片净光合速率、气孔导度以及蒸腾速率,提高了胞间CO₂浓度与外界CO₂浓度比值,降低了气孔限制值。ALA能有效提高2个品种光合系统潜在活性（F_v/F_o）,分别较对照增加11.98%和5.49%,显著提高了实际光化学量子效率,提高了功能叶片蔗糖含量,降低淀粉含量,并提高了蔗糖合成酶活性,降低了酸性转化酶活性。ALA可有效促进V1–V5期绿豆叶面积指数增加。拌种处理通过改善绿豆百粒重、单株粒数、单株粒重及单株荚数等产量构成因素来提升产量。综上,ALA能够有效改善不同绿豆品种的光合特性和碳代谢途径。     

新加坡石斑鱼虹彩病毒ORF39L基因克隆、表达及抗体的制备

为研究新加坡石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)核心基因ORF39L在病毒侵染过程中的作用,制备了SGIV ORF39L表达蛋白的抗体;通过生物信息学软件预测SGIV ORF39L的抗原表位基因,并以所选抗原表位基因片段39Ag1和39Ag2构建原核表达质粒pET32a-39Ag1和pET32a-39Ag2;将质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达融合蛋白pET32a-VP39Ag1和pET32a-VP39Ag2;用所得融合蛋白分别免疫小鼠,获得了高效特异抗体39Ab1和39Ab2;利用制备的抗体进行间接免疫荧光试验,结果显示,VP39参与了SGIV的装配。本研究结果为进一步研究ORF39L基因在SGIV感染过程中的作用机制提供了数据资料。     

马尾藻岩藻聚糖硫酸酯抑制HepG2细胞的增殖研究

采用MTT方法考查不同浓度的马尾藻岩藻聚糖硫酸脂对HepG2细胞存活率的影响,进一步运用流式细胞仪和检测ROS含量探讨马尾藻岩藻聚糖硫酸酯抑制HepG2细胞增殖的机理。结果表明,在0.5~8.0 mg/mL内,HepG2细胞的存活率随着马尾藻岩藻聚糖硫酸脂浓度的升高呈下降趋势。研究发现,随着马尾藻岩藻聚糖硫酸脂浓度的增加,细胞内SubG1和G0/G1的细胞数量升高。而且,通过检测细胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)含量,发现随着马尾藻岩藻聚糖硫酸脂浓度的增加,细胞内ROS含量显著升高。马尾藻岩藻聚糖硫酸脂抑制HepG2细胞增殖是通过诱导细胞内ROS的过量产生导致细胞发生凋亡和G0/G1阻滞。